بررسی بیان ژن KLF4 به عنوان یک مارکر مولکولی جدید در تومورهای سینه  

1

1-1    پستان و اپیدمیولوژی سرطان پستان

11

1-2    بیماریهای خوش­ خیم پستان

12

1-2-1.کیست

13

1-2-2- تغییرات فیبروکیستیک

13

1-2-3- فیبروآدنوم

13

1-2-4- گشادی مجرا و التهاب اطراف مجاری

14

1-2-5- آبسه

14

1-2-6- ندولاریتی

14

1-2-7- نکروز چربی

14

1-2-8- هايپرپلازي اپی­تليال (رشد زياد سلول‏هاي پستان)

15

1-2-9- پاپيلوم داكت (ترشح مايع زرد و خون)

15

1-2-10- اكتازي داكت (ترشح مايع زرد و چسبناك)

15

1-2-11- آنومالي‏هاي تكامل طبيعي

15

1-2-12- درد، پستانهاي توده‏اي

15

1-2-13- توده خوش‏خيم غدد شيري

15

1-2-14- التهاب‏ها وعفونت‏ها

15

1-2-15- اوريون

15

1-2-16- ليپوم (تومور چربي)

15

1-2-17- كالاكتوسل (نوعي كيست در بارداري)

15

1-2-18- بيماري‏هاي مادرزادي

15

1-2-19- نوك پستان‏هاي فرورفته

15

1-2-20- پستان‏هاي اضافي، نوك‏هاي اضافي پستان

15

1-2-21- مشكلات پوستي وكيست‏هاي سباسه

15

1-2-22- بيماري‏ها واختلالات قفسه سينه

16

1-2-23- شيردهي

16

1-2-24- تومورهاي­خوش‏خيم­ديگر

16

1-3 بیماریهای بدخیم پستان (سرطان)

16

1-3-1- کارسینومای غیر­مهاجم مجاری پستان (Ductal carcinoma in situ)

16

1-3-2- کارسینومای غیر­مهاجم لوبولی پستان (Lobular carcinoma in situ)

17

1-3-3- کارسینومای مهاجم مجاری پستان (Invasive or infiltrating ductal carcinoma)

17

1-3-4- کارسینومای مهاجم لوبولی پستان (Invasive or infiltrating lobular carcinoma)

18

1-4 انواع سرطان پستان نادر

18

1-4-1- سرطان پستان التهابی(Inflamatory brest cancer)

18

1-4-2- کارسینومای مدولاری(Medullary carcinoma)

19

1-4-3-سرطان پستان منفی سه گانه(Triple-negative cancer یا Metaplastic carcinoma)

19

1-4-4- کارسینومای موسینوس (Mucinous carcinoma)

20

1-4-5 بیماری پاژه نوک پستان (Paget disease of the nipple)

20

1-4-6- کارسینومای پاپیلاری (Papillary carcinoma)

20

1-4-7- تومور فیلوئیدی (Phyllodes tumor)

20

1-4-8- کارسینومای توبولی (Tubular carcinoma)

21

1-4-9- آنژیو سارکوما (Angiosarcoma)

21

1-5 فاکتورهای ریسک

21

1-5-1- جنسیت

21

1-5-2- سابقه­ خانوادگي سرطان پستان (بستگان درجه يك)

21

1-5-3- بالا بودن سن (سن بالاتر از 35 سال)

22

1-5-4- سرطان‏هاي ديگر مانند سرطان تخمدان

22

1-5-5- رژيم غذايي (چربي و گوشت)

22

1-5-6- مصرف الکل

22

1-5-7- بيماري­هاي خوش‏خيم پستان

22

1-5-8- مصرف استروژن (داروهاي استروژني)

23

1-5-9- منارك زودرس (شروع قاعدگي زودتر از موعد)و يائسگي بعد از 55 سالگي

23

1-5-10- اولين حاملگي بعد از 25 سالگي

23

1-5-11- نولي پاريته (نداشتن زايمان)

23

1-5-12- اختلاف جغرافيايي ( جهان غرب)

23

1-5-13- چاقي

23

1-5-14- ويروس‏ها

23

1-5-15- تابش اشعه يونيزان

23

1-5-17- شخصيت ( مضطرب)

24

1-5-18- سابقه سرطان پستان در سمت مقابل

24

1-6- سرطان پستان را چگونه مرحله بندی می­کنند

26

1-7- چگونه می توان سرطان پستان را درمان کرد

27

1-8 – مشکلات تشخیصی سرطان پستان

27

1-9- روش­های تشخیصی عمده­ در سرطان پستان

27

1-9-1- معاینه­ی کلینیکی

28

1-9-2- تکنیک­های تصویربرداری

28

1-9-3- مطالعات پاتولوژیک

28

1-10- تومور مارکرها و نقش آن­ها

30

1- 11- بیومارکرهای سرطان پستان

32

1-12- خانواده Krüppel-like Factor

33

1-13-  KLF4

34

1-13-1- نقش KLF4 در سرطان

34

1-13-1-1- KLF4  به عنوان سرکوبگر تومور

38

1-13-1-2- KLF4  به عنوان یک آنکوژن

41

1-14- نقش KLF4 در سلول­های بنیادی

43

1-15- نقش KLF4 در حفظ هموستازی بافت­ها

44

1-16- مکانیسم مولکولی KLF4

49

1-17- مکانیسم فعال کردن ژن­ها توسط  KLF4

50

1-18- مکانیسم سرکوب رونویسی توسط KLF4

فصل دوم

52

2-1- نمونه‌گيري از انسان

52

2-2- بررسی بیان ژن در سطح mRNA

52

2-2-1- استخراج ­RNAي كل از بافت

56

2-2-2- بررسي كمي و كيفي ­RNAي استخراج شده

56

2-2-2-1- UV اسپكتروفتومتري

57

2-2-2-2- الكتروفورز ژل آگارز

58

2-2-2-2-1- محلول EDTA (8=pH و M5/0)

59

2-2-2-2-2- بافر الكتروفورز (X10) TBE

59

2-2-2-2-3- محلول اتيديوم برمايد (mg/ml 10)

60

2-2-2-2-4- بافر سنگين كننده مخصوص RNA

60

2-2-2-2-5- بافر سنگين كننده (X6 (type III-مخصوص DNA

62

2-3- تیمار با آنزیم Dnase I

64

2-4- واكنش رونويسي معكوس

66

2-5- واكنش PCR

66

2-5-1- طراحي پرايمر

68

2-5-2- آماده ‌سازي پرايمرهاي PCR

68

2-5-3- واكنش PCR

71

2-5-4- عكسبرداري از ژل آگارز

72

2-5-5- بهینه سازی تعداد سیکلPCR

72

2-6- .بررسی بیان ژن به صورت نیمه کمی

72

2-7- آنالیز آماری

فصل سوم

73

3-1- نتایج

73

3-1-1- توصیف نمونه­های انسانی

82

3-1-2- تعیین کیفیت و کمیت RNAی استخراج شده

84

3-1-3- تعیین تعداد سیکل مناسب PCR

86

3-1-4- بیان ژن KLF4 در نمونه­های توموری و حاشیه­ی تومور بافت پستان

93

3-1-5- آنالیز آماری بیان ژن KLF4 در گروه­های مختلف

97

3 -2- بحث

97

3-2-1- اهميت مطالعه­ي سرطان پستان و انتخاب KLF4

103

3-2-2- تفسير نتايج حاصله و اهميت آن­ها

110

3-3- نتيجه­گيري

112

3-4- پيشنهادها

113

                منابع

ضمائم

    چکیده ی ا­نگلیسی