تاثیر اسانس مرزه خوزستانی بر باروری اسپرم موش های تحت استرس اکسیداتیو القاء شده توسط نونیل¬فنل در مقایسه با ویتامین E

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                                     صفحه

1-مقدمه   ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………1

فصل دوم، کلیات

1-2- خصوصیات موش سوری ……………………………………………………………………………………………………………………………4

1-1-2- برخی شاخص­های بیولوژیک در موش سوری……………………………………………………………………………………….5

2-1-2 شاخص­ها و مشخصات خونی در موش­های سوری………………………………………………………………………………….5

3-1-2 خصوصیات تولید مثلی موش سوری  ……………………………………………………………………………………………………..6

2-2 دستگاه تناسلی نر………………………………………………………………………………………………………………………………………….6

1-2-2  گنادها یا غدد جنسی    …………………………………………………………………………………………………………………………7

1-1-2-2 تونیکا واژینالیس (غشا مهبلی)……………………………………………………………………………………………………………7

2-1-2-2 تونیکا آلبوژینا(سپید پرده)…………………………………………………………………………………………………………………..7

3-1-2-2 تیغه­های بیضه­ای ومدیاستن بیضه………………………………………………………………………………………………………7

2-2-2 سلول­های آندوکرینی بینابینی…………………………………………………………………………………………………………………7

3-2-2 لوله­های منی­ساز……………………………………………………………………………………………………………………………………….8

1-3-2-2 پارین    …………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 8

4-2-2 سلول­های پشتیبان(سرتولی)  …………………………………………………………………………………………………………………9

5-2-2 اسپرماتوژنز   …………………………………………………………………………………………………………………………………………11

1-5-2-2 مرحله گلژی ……………………………………………………………………………………………………………………………………..12

2-5-2-2 مرحله تشکیل کلاهک………………………………………………………………………………………………………………………12

3-5-2-2 مرحله اکروزومی   ……………………………………………………………………………………………………………………………12

4-5-2-2 مرحله بلوغ   …………………………………………………………………………………………………………………………………….13

6-2-2 مجاری تناسلی ………………………………………………………………………………………………………………………………………16

1-6-2-2 لوله­های بیضه­ای مستقیم………………………………………………………………………………………………………………….16

2-6-2-2 شبکه بیضه   …………………………………………………………………………………………………………………………………….16

3-6-2-2 اپی­دیدیم ………………………………………………………………………………………………………………………………………….17

4-6-2-2 مجرای وابران  …………………………………………………………………………………………………………………………………..17

5-6-2-2 مجرای اپی­دیدیم  …………………………………………………………………………………………………………………………….17

7-2-2 لقاح………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..19

8-2-2 اسپرم غیر طبیعی   ………………………………………………………………………………………………………………………………20

9-2-2 ماهیت دودمانی سلول­های زایگر   ……………………………………………………………………………………………………….20

10-2-2 تولید جنین در شرایط طبیعی  …………………………………………………………………………………………………………21

1-10-2-2 لقاح  ………………………………………………………………………………………………………………………………………………21

1-1-10-2-2  نزدیک شدن گامت­ها ………………………………………………………………………………………………………………21

2-1-10-2-2 آمیختن گامت­ها…………………………………………………………………………………………………………………………21

3-1-10-2-2  نتایج لقاح………………………………………………………………………………………………………………………………….22

2-10-2-2 تسهیم  …………………………………………………………………………………………………………………………………………..22

11-2-2 تولید جنین در شرایط in vitro………………………………………………………………………………………………………23

1-11-2-2  ظرفیت­پذیری اسپرم­ها  ……………………………………………………………………………………………………………….24

2-11-2-2   لقاح آزمایشگاهی(IVF) ………………………………………………………………………………………………………………25

12-2-2 هورمون­های کنترل­کننده عملکرد بیضه  ………………………………………………………………………………………….26

1-12-2-2 تستسترون………………………………………………………………………………………………………………………………………26

1-1-12-2-2 اعمال تستسترون   ……………………………………………………………………………………………………………………27

2-12-2-2 کنترل ترشح تستسترون با فیدبک منفی………………………………………………………………………………………27

3-12-2-2 تنظیم اسپرماتوژنز توسط FSH و تستسترون……………………………………………………………………………….27

4-12-2-2 کنترل فیدبک منفی فعالیت لوله­های اسپرم­ساز-نقش اینهیبین…………………………………………………..28

3-2  نونیل­فنل ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….29

1-3-2 ساختار و خواص نونیل­فنل…………………………………………………………………………………………………………………….29

2-3-2 منشا نونیل­فنل  …………………………………………………………………………………………………………………………………….30

3-3-2 نحوه تولید نونیل­فنل …………………………………………………………………………………………………………………………….30

4-3-2 مکانیسم عمل نونیل­فنل………………………………………………………………………………………………………………………..31

5-3-2 ارتباط بین نونیل­فنل و تنش اکسیداتیو………………………………………………………………………………………………..31

6-3-2 خطرات برای سلامت انسان ………………………………………………………………………………………………………………….32

7-3-2 ارتباط نونیل­فنل با سرطان   ………………………………………………………………………………………………………………..32

4-2 سمیت تولید مثلی بواسطه جنس نر………………………………………………………………………………………………………….32

1-4-2 مکانیسم سمیت تولیدمثلی به واسطه جنس نر……………………………………………………………………………………33

5-2 اثرات سوء تنش اکسیداتیو در دستگاه تولیدمثلی نر…………………………………………………………………………………35

6-2 آنتی­اکسیدانت­ها  ……………………………………………………………………………………………………………………………………….36

7-2 مرزه خوزستانی …………………………………………………………………………………………………………………………………………37

8-2 نقش حفاظتی آنتی­اکسیدانت­ها در برابر تنش اکسیداتیو…………………………………………………………………………37

فصل سوم، مواد و روش کار

1-3 مواد و وسایل و دستگاه­ها و روش تهیه دارو و عصاره مورد استفاده  ……………………………………………………..40

2-3 حیوانات مورد استفاده و گروه بندی و نحوه تجویز دارو   ……………………………………………………………………….42

1-2-3 گروه­بندی حیوانات    …………………………………………………………………………………………………………………………..42

3-3 زمان تزریق گنادو تروپین­ها……………………………………………………………………………………………………………………….42

4-3 آماده­سازی محیط کشت برای IVF ………………………………………………………………………………………………………….43

1-4-3 طرز تهیه محیط HTF ………………………………………………………………………………………………………………………….44

5-3 بررسی پارامترهای مربوط به اسپرم ………………………………………………………………………………………………………….44

1-5-3 نحوه استحصال اسپرم از دم اپیدیدیم…………………………………………………………………………………………………..44

2-5-3 ارزیابی تحرک اسپرم­ها  ……………………………………………………………………………………………………………………….45

3-5-3 شمارش اسپرم­ها …………………………………………………………………………………………………………………………………..45

4-5-3 ارزیابی زنده بودن اسپرم­­ها …………………………………………………………………………………………………………………..45

5-5-3  مورفولوژی اسپرم­ها ……………………………………………………………………………………………………………………………..45

6-5-3  ارزیابی بلوغ هسته اسپرم …………………………………………………………………………………………………………………….46

7-5-3 ارزیابی عدم پیوستگی دو رشته   …………………………………………………………………………………………………………46

6-3 تخمک­گیری و لقاخ داخل آزمایشگاهی……………………………………………………………………………………………………..46

7-3 ارزیابی رشد جنین­ها  ……………………………………………………………………………………………………………………………….47

8-3  نحوه ارائه داده­ها به صورت درصد ……………………………………………………………………………………………………………47

9-3  بررسی بافت­شناسی دستگاه تناسلی ……………………………………………………………………………………………………….47

1-9-3 نمونه­برداری بافت­های بیضه…………………………………………………………………………………………………………………..47

1-1-9-3 طرز تهیه چسب آلبومین   ………………………………………………………………………………………………………………48

2-9-3  رنگ­آمیزی هماتوکسیلین ……………………………………………………………………………………………………………………48

1-2-9-3 روش تهیه رنگ هماتوکسیلین…………………………………………………………………………………………………………50

3-9-3 مراحل مختلف رنگ­آمیزی   …………………………………………………………………………………………………………………50

4-9-3 رنگ­آمیزی به روش آهن­وایگرات  ………………………………………………………………………………………………………..51

10-3 ارزیابی هیستومورفومتریک بیضه­ها  ………………………………………………………………………………………………………53

1-10-3 ارزیابی میزان اسپرماتوژنز در بافت بیضه  …………………………………………………………………………………………53

11-3 ارزیابی­های بیوشیمیایی سرم و بافت بیضه  …………………………………………………………………………………………..53

1-11-3 اندازه­گیری TAOC در سرم و بافت بیضه …………………………………………………………………………………………54

2-11-3  اندازه­گیری MDA در سرم و بافت بیضه …………………………………………………………………………………………54

12-3 آنالیز آماری داده­ها  ………………………………………………………………………………………………………………………………..55

فصل چهارم، نتایج

1-4- نتایج بررسی­های بافت­شناسی بیضه  ………………………………………………………………………………………………………56

1-1-4-تغییرات مربوط به قطر لوله­های منی­ساز……………………………………………………………………………………………..56

2-1-4- ارزیابی اسپرماتوژنز در بافت بیضه   …………………………………………………………………………………………………..57

1-2-1-4 تغییرات ضریب اسپرمیوژنز  …………………………………………………………………………………………………………….57

2-2-1-4  تغییرات ضریب تمایز لوله­ای  ………………………………………………………………………………………………………..57

3-2-1-4  تغییرات ضریب جایگزینی RI ………………………………………………………………………………………………………..58

3-1-4  بررسی تغییرات سلول­های لیدیگ ……………………………………………………………………………………………………..59

4-1-4 بررسی تغییرات سلول­های سرتولی……………………………………………………………………………………………………….60

2-4 نتایج مربوط به پارامترهای اسپرم …………………………………………………………………………………………………………….65

1-2-4 بررسی تعداد اسپرم­ها به ازای دم اپی­دیدیم  ……………………………………………………………………………………….66

2-2-4 بررسی درصد زیست­پذیری یا قدرت زنده­مانی  …………………………………………………………………………………..67

3-2-4 ارزیابی تحرک اسپرم­ها…………………………………………………………………………………………………………………………..67

4-2-4 بررسی مورفولوژی اسپرم­ها  …………………………………………………………………………………………………………………68

5-2-4 ارزیابی شکستDNA   …………………………………………………………………………………………………………………………70

6-2-4 ارزیابی کیفیت تراکم کروماتین اسپرم…………………………………………………………………………………………………..71

3-4 نتایج آزمایشات بیوشیمیایی سرم وبافت بیضه  ……………………………………………………………………………………….74

1-3-4 سنجش میزانTAOC سرم وبافت بیضه  …………………………………………………………………………………………….74

2-3-4 سنجش MDA در سرم و بافت بیضه……………………………………………………………………………………………………74

4-4 توان باروری آزمایشگاهی اسپرماتوزوئید و رشد جنینی در گروه­های مختلف آزمایشگاهی……………………..76

فصل پنجم، بحث

1-5 مکانیسم اثر وبررسی اترات سوء نونیل­فنل…………………………………………………………………………………………………80

2-5 اثرات نونیل­فنل روی تعداد و مورفولوژی سلول­های لیدیگ  …………………………………………………………………..85

3-5 ارتباط تعداد سلول­های سرتولی با فرایند اسپرماتوژنز……………………………………………………………………………….86

4-5 پارامترهای مربوط به اسپرم و ارتباط آنها با مصرف نونیل­فنل  ……………………………………………………………….86

5-5 ارتباط بین کیفیت پایین اسپرم­ها و توان باروری آزمایشگاهی   …………………………………………………………….88

6-5 نتیجه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………………………………………..89

7-5 پیشنهادات …………………………………………………………………………………………………………………………………………………89

چکیده فارسی   …………………………………………………………………………………………………………………………………………………90

Abstract  ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….92

6 منابع………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..94