بررسی اثرات پودر ریزوم زنجبیل (Zingiber officinale) بر فاکتورهای اکسیدانی و آنتی اکسیدانی در آسیب کبدی ناشی از استامینوفن در موشهای صحرایی نر

فصل اول: کلیات و مروری بر مطالب گذشته

1-1-استامينوفن ……………………………………………………………………………………………………….. 2

1-1-1- مصارف درماني……………………………………………………………………………………………. 3

1-1-2-عوارض جانبي………………………………………………………………………………………………. 3

1-1-2-نارسايي حاد كبدي………………………………………………………………………………………..  4

1-1-3-پاتوفيزيولوژي ………………………………………………………………………………………………. 4

1-1-3-1-تغيير ايمني ذاتي  ………………………………………………………………………………………. 4

1-1-3-2-اختلال در عملكرد ميتوكندري ……………………………………………………………………. 5

1-1-3-3-متابوليت سمي استامينوفن …………………………………………………………………………… 5

1-1-4-استرس اكسيداتيو ………………………………………………………………………………………….. 7

1-1-5-مهارگرهاي CYP2E1 …………………………………………………………………………………… 8

1-1-6-القا كننده پروتئين شوك حرارتي (HSP) …………………………………………………………  8

1-1-7-پاسخ انطباقي به استرس سلولي ………………………………………………………………………… 9

1-2-آنتي اكسيدان ها ………………………………………………………………………………………………10

1-3-درمان گياهي سميت كبدي ناشي از استامينوفن  ……………………………………………………. 11

1-4-زنجبيل …………………………………………………………………………………………………………. 12

1-4-1-تركيبات اصلي زنجبيل …………………………………………………………………………………. 13

1-4-2-موارد تجويز زنجبيل در گياه درماني ………………………………………………………………. 14

1-4-3-برخي مطالعات انجام شده بر روي زنجبيل ……………………………………………………….. 15

1-4-4-خاصيت آنتي اكسيداني زنجبيل …………………………………………………………………….. 16

1-5-اهداف و فرضيات طرح ……………………………………………………………………………………. 17

فصل دوم: وسایل، مواد و روش ها 

2-1- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………………. 19

2-2- وسايل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………. 20

2-3- دستگاه هاي مورد استفاده  ………………………………………………………………………………. 21

2-4- حيوانات و نحوه ي گروه بندي ………………………………………………………………………… 22

2-4-1- نمونه مورد مطالعه  ……………………………………………………………………………………… 22

2-4-2- نحوه ي گروه بندي حيوانات  ………………………………………………………………………. 22

2-5- روش انجام آزمايشات ……………………………………………………………………………………. 23

2-5-1- تهيه و آماده سازي گياه ………………………………………………………………………………. 23

2-5-2- نحوه آزمايش ……………………………………………………………………………………………. 23

2-5-3- روش كالبدگشايي حيوانات…………………………………………………………………………. 23

2-6- روش هاي اندازه گيري فاكتورهاي مرتبط با استرس اكسيداتيو بافت كبد …………………. 24

2-6-1- فعاليت آنزيم كاتالاز (CAT) ……………………………………………………………………….. 24

2-6-2- فعاليت آنزيم پراكسيداز ………………………………………………………………………………. 24

2-6-3-استخراج پروتئين ………………………………………………………………………………………… 25

2-6-4- سنجش ميزان MDA ………………………………………………………………………………….. 26

2-6-5- سنجش ميزان H₂O₂  ………………………………………………………………………………….. 26

2-7- روش بررسي هيستوپاتولوژي …………………………………………………………………………… 27

2-7-1-پایدار کردن یا ثبوت بافت (Fixation)……………………………………………………………  27

22-7-2-مراحل آماده نمودن بافت (Tissue processing)……………………………………………. 27

2-7-2-1-آب­گیری (Dehydration)……………………………………………………………………….. 27

2-7-2-2-شفاف کردن والکل­گیری (Clearing)  ………………………………………………………. 27

2-7-2-3-آغشتگی به پارافین (Impregnation with wax)………………………………………….. 28

2-7-2-4 -قالب­گیری (Blocking) …………………………………………………………………………. 28

2-7-2-5-برش بافت (Cutting  section) ………………………………………………………………..  28

2-7-3-آماده کردن نمونه به منظور رنگ­آمیزی برش­ها (Practical basis of staining)…….. 28

2-7-3-1-ذوب نمودن پارافين اطراف مقاطع و خروج از بافت ……………………………………… 28

2-7-3-2-آب­دهی (Hydration)…………………………………………………………………………….. 29

2-7-3-3- رنگ­آمیزی (Staning) ………………………………………………………………………….. 29

2-7-3-4- آب­گیری (Dehydration)………………………………………………………………………. 29

2-7-3-5- شفاف کردن (Clearing) ………………………………………………………………………… 29

2-7-3-6- مونته کردن (Mounting) ………………………………………………………………………… 30

محاسبات آماری  ……………………………………………………………………………………………………. 30

فصل سوم : نتایج 

3-1-بررسي تغييرات فاكتورهاي مرتبط با استرس اكسيداتيو در بافت كبد ………………………… 32

3-1-1-بررسي تغييرات فعاليت آنزيم كاتالاز در بافت كبد ……………………………………………. 32

3-3-1-2- بررسي تغييرات فعاليت آنزيم پراكسيداز در بافت كبد …………………………………… 33

3-1-3-بررسي تغييرات سطح MDA در بافت كبد ………………………………………………………. 34

3-1-4-بررسي تغييرات سطح H₂O₂ در بافت كبد ……………………………………………………….. 35

3-2-بررسی نتایج فاکتورهای هیستوپاتولوژی كبد ……………………………………………………….. 36

فصل چهارم: بحث و نتیجه گیری

بحث و نتيجه گيري  …………………………………………………………………………………………………42

نتيجه گيري كلي ……………………………………………………………………………………………………. 47

پيشنهادات  ……………………………………………………………………………………………………………..48

فصل پنجم: منابع

منابع انگليسي ………………………………………………………………………………………………………….50

فهرست شكل ها

شكل1-1 ساختمان شيميايي استامينوفن ………………………………………………………………………….2

شكل 1-2- مسيرهاي متابوليك كبدي استامينوفن و مكانيسم حفاظت در مقابل سميت كبدي ناشي از استامينوفن ……………………………………………………………………………………………………..6

شكل1-3- زنجبيل …………………………………………………………………………………………………..12

شكل1-4: تركيبات شيميايي اصلي زنجبيل ……………………………………………………………………14

شکل3-1 مقاطع بافت كبد در بررسی­های پاتولوژیک رنگ­آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین در گروه نرمال ………………………………………………………………………………………………………. 37

شكل 3-2 بافت كبد در بررسی­های پاتولوژیک رنگ­آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین در گروه استامينوفن ………………………………………………………………………………………………………38

شكل 3-3 بافت كبد در بررسی­های پاتولوژیک رنگ­آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین در گروه زنجبيل ………………………………………………………………………………………………………….39

شكل 3-4 بافت كبد در بررسی­های پاتولوژیک رنگ­آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین در گروه استامينوفن زنجبيل …………………………………………………………………………………………..40

فهرست جدول ها

جدول 1-1-برخي از گياهان دارويي بررسي شده بر سميت كبدي ناشي از استامينوفن ………….11

جدول 2 -1- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………19

جدول2-2- وسايل مورد استفاده ………………………………………………………………………………..20

جدول 2-3- دستگاه هاي مورد استفاده ………………………………………………………………………..21

جدول 3-1: نتايج بافت كبد در بررسی­های پاتولوژیک رنگ­آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین در گروه هاي مورد بررسي ………………………………………………………………………………………..36