%38تخفیف

دانلود :ارزیابی پماد مرهم مفاصل بر بیان سایتوکاین های IL-1β، IL-6 وTNFα در مدل حیوانی آرتریت روماتوئید

تعداد 156صفحه در فایل word

کارشناسی ارشد در رشته ایمنی شناسی پزشکی

ارزیابی پماد مرهم مفاصل بر بیان سایتوکاین های IL-1β، IL-6 وTNFα در مدل حیوانی آرتریت روماتوئید

چکیده

مقدمه و هدف: بیماری آرتریت روماتوئید یک التهاب سیستمیک مزمن با علائم التهاب در لایه‌ی سینوویال مفاصل،تاندون و اجزاء اطراف مفصلی می‌باشد. دو مشخصه‌ی اصلی این بیماری شامل التهاب مزمن و تخریب استخوان می‌باشند. درمان‌های کنونی برای این بیماری عوارض جانبی فراوانی داشته ونیز بسیار گران می‌باشند. امروزه روش‌های درمانی جدید و ارزان همانند داروهای گیاهی بسیار رونق یافته‌اند. مرهم مفاصل که مخلوطی از دو گیاه هواچوبه و بابونه بوده و توسط بخش فارماکولوژی دانشگاه شاهد تولید شده است چندین سال است که جهت درمان بیماران مبتلا به آرتروز  مفصلی در کشور ما مورد استفاده قرار می‌گیرد. بر آن شدیم تا با ایجاد مدل حیوانی آرتریت روماتوئید بخشی از اثرات این دارو را بر روی سیستم ایمنی مورد ارزیابی قرار دهیم.

مواد و روش‌ها: در این تحقیق از 15 سر رت نر Wistar در سه گروه مختلف مرهم مفاصل، پارافین(پایه دارو- کنترل منفی) و پیروکسیکام(کنترل مثبت) استفاده شد. تورم پای رت با اندازه‌گیری تغییرات حجم آب استوانه(یک روز در میان از روز 0 تا 19)، بیان سه ژن TNFα، IL-1β و IL-6 با استفاده از تست ریل تایمPCR و نهایتاً شاخص‌های آسیب شناسی با استفاده از رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین توسط میکروسکوپ نوری مورد ارزیابی قرار گرفتند.

یافته ها: میزان تورم در روز 10 که مهمترین روز در التهاب حاد می‌باشد و نیز روز 19 که روز آغاز التهاب مزمن می‌باشد در دو گروه مرهم مفاصل و پیروکسیکام نسبت به پارافینمعنی‌دار نمی‌باشد. تغییرات بافت‌شناسیتفاوت خاصی را  بین سه گروه نشان نداد. در تست ریل تایم PCR بیان ژن IL-6 در دو نمونه‌ی مرهم مفاصل(P=0.09) و پیروکسیکام(P=0.058) نسبت به پارافین افزایش یافته بود.

نتیجه‌گیری: نتایج نشان داد که مرهم مفاصل به صورت بالقوه قابلیت تاثیرگذاری مثبت بر التهاب ناشی از بیماری آرتریت روماتوئید را دارد اما نیاز به انجام تحقیقات بیشتر در این ضمینه می‌باشد.

واژگان کلیدی: آرتریت روماتوئید، مرهم مفاصل، مدل حیوانی، TNFα، IL-1β، IL-6

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                             صفحه

1-مقدمه و کلیات ……………………………………………………………2

1-1مقدمه. 2

1-2 علت شناسی آرتریت روماتویئد. 3

1-3 تغییرات مفصلی ناشی از التهاب و حضور سلول‌ها 5

1-3-1 عملکرد سلولهای T دربیماری آرتریت روماتوئید. 6

1-3-2 فعالیت سلولهای T در سینوویال و روند تمایز آنها 6

1-3-3 مسیرهای موثر سلولهای T که سبب پیشبرد التهاب سینوویوم می‌شوند. 9

1-3-4 نقش سلولهای B در‌ایجاد و درمان آرتریت روماتوئید. 13

1-3-5  فعالیت موثر لوکوسیت‌ها در سینوویتیس…. 16

1-3-6TNFα، IL-1 و IL-6. 21

1-3-7سایر سایتوکاینها و سلولهای موثر در‌ایمنی ذاتی.. 27

1-3-8 سایتوکاین‌های سرکوب کننده و گیرنده‌ها در سینوویتیس…. 29

1-3-9 کموکاین‌ها در آرتریت روماتوئید. 29

1-4 تخریب مفصل وابسته به بیماری.. 30

1-4-1 آسیب استخوانی.. 30

1-4-2 تخریب استخوان ناشی از التهاب و اوستئوکلاست‌ها 32

1-4-3 نقش فیبروبلاستهای سینوویال در تخریب مفصل.. 35

1-4-4 رگزایی، ‌یک فاکتور اساسی جهت تخریب مفصل.. 36

1-4-5 تخریب غضروف… 36

1-5 مبارزات و‌یافته‌ها 39

1-6 مدل‌های حیوانی بیماری آرتریت روماتوئید. 41

1-6-1 مدل ادجوانتی.. 41

1-6-2 آرتریت کلاژن نوع 2 رتی.. 43

1-6-3 سایر مدل‌ها 43

1-7 روش‌ها و انواع داروها در درمان بیماری آرتریت روماتوئید. 44

1-7-1 پروکسیکام. 54

1-7-2 مرهم مفاصل.. 55

1-8 درمان‌های گیاهی.. 56

1-8-1 TwHF. 57

1-8-2 Phytodelor N.. 57

1-8-3 SKI306X.. 57

1-8-4 Willow bark. 58

1-8-5 Fever few.. 58

1-8-6 RA-I. 59

1-8-7 Boswellia Serrata. 59

1-8-8 Capsaicin-topical 59

1-8-9 Tripterygium Wifordii-topical 60

1-8-10 Ganoderma Lucidum and san Miao san. 60

1-8-11 نتیجه گیری کلی.. 60

1-9 اهداف اصلی.. 63

1-10 اهداف اختصاصی.. 63

1-11 فرضیات پژوهش…. 63

2-مروری بر سایر مطالعات.. ……………………………………………………65

2-1 مطالعات داخل کشور. 65

2-2 مطالعات خارج کشور. 67

3-روش اجرای تحقیق.. ………………………………………………………76

3-1 نوع مطالعه. 76

3-2روش نمونه گیری و حجم نمونه: 76

3-3مواد، وسایل و محلول سازی.. 76

3-3-1 ایجاد بیماری، نگهداری حیوان و سنجش‌ها 76

3-3-2 خونگیری، استخراج بافت مفصلی و نگهداری.. 77

3-3-3 استخراج و انجام ریل تایم PCR.. 78

3-3-4 بررسی‌های پاتولوژیک… 78

3-4روش انجام مطالعه. 80

3-4-1 تهیه حیوان و دارو. 80

3-4-2 ایجاد آرتریت روماتوئید. 80

3-4-3 اندازه‌گیری تورم مفصلی.. 81

3-4-4 بررسی مولکولی.. 82

3-4-5 رنگ‌آمیزی بافتی.. 86

4-نتایج و یافته‌های تحقیق.. ……………………………………………………95

4-1 نتایج تست تورم مفصلی.. 95

4-2 نتایج تست بافت‌شناسی.. 103

4-3 نتایج تست ریل تایم PCR.. 118

5-بحث و پیشنهادات.. ………………………………………………………129

5-1 تحلیل و بررسی نتایج تورم مفصلی.. 129

5-2 تحلیل و بررسی یافته‎های پاتولوژی.. 131

5-3 تحلیل و بررسی یافته‎های ریل تایم PCR.. 134

5-4نتیجه‌گیری.. 136

5-5پیشنهادات… 137

6-منابع……………………………………………………………………………………………………………………………..139

جداول

جدول3-1; پرایمرهای ریل تایم PCR طراحی شده. 83

جدول3-2; درجه بندی تغییرات روی داده شده در محل استخوان و غضروف و نیز تعیین میزان تخریب با توجه به مقیاس‌های بافت‌شناسی. 93

جدول4-1; درجه بندی تغییرات بافت‌شناسی در نمونه‌ها‌ی پارافین، مرهم مفاصل و پیروکسیکام. 114

جدول4-2; درجه بندی تخریب بافت‌شناسی در نمونه‌ها‌ی پارافین، مرهم مفاصل و پیروکسیکام. 115

جدول4-3;نتایج تست آماریKruskal Walisبر روی درجه‌بندی تغییرات بافت‌شناسی بین گروه‌های مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 116

جدول4-4;نتایج تست آماریKruskal Walisبر روی درجه‌بندی تخریب بافت‌شناسی بین گروه‌های مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 117

نمودارها

نمودار‏4‑1;نمودار میانگین ایندکس تورم±SEM در گروه پارافین.. 96

نمودار‏4‑2;نمودار میانگین ایندکس تورم±SEM در گروه مرهم مفاصل. 97

نمودار‏4‑3;نمودار میانگین ایندکس تورم±SEM در گروه پیروکسیکام. 98

نمودار‏4‑4;میانگین ایندکس تورم برای سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام در روزهای مختلف. 99

نمودار‏4‑5;نمودار میانگین ایندکس‌های تورم±SEM برای سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام در روز 10. 100

نمودار‏4‑6;نمودار میانگین ایندکس‌های تورم±SEM برای سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام در روز 19. 101

نمودار‏4‑7;نمودار میانگین ایندکس‌های تورم برای سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام در دو زمان ابتدایی و انتهایی. 102

نمودار‏4‑8;نموداربیان ژن TNF±SEMدر سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 124

نمودار‏4‑9;نموداربیان ژن IL-1β±SEM در سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 125

نمودار‏4‑10;نموداربیان ژن IL-6±SEM در سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 126

نمودار‏4‑11;نمودار ایندکس بیان ژن TNF، IL-1 و IL-6± SEM در سه گروه مرهم مفاصل، پارافین و پیروکسیکام. 127

اشکال

شکل‏1‑1;فرایند کلی آغاز و شکل گیری آرتریت روماتوئید در این شکل به تصویر کشیده شده است. 4

شکل‏1‑2;مسیری که منجر به فعال شدن سلولهای T در بیماری آرتریت روماتوئید خواهد شد در کنار دیگر مسیرهای موثر و کلیدی در این فرایند. 8

شکل‏1‑3;سایتوکاین‌های کلیدی دخیل در پاتوژنز بیماری آرتریت روماتوئید. 19

شکل‏1‑4;تنظیم پاسخ‌های سلولی توسط سایتوکاین‌ها در بیماری آرتریت روماتوئید. 20

شکل‏1‑5;استخوان تالوس در ناحیه‌ی مچ پا 31

شکل‏1‑6;مسیرهای فعال شدن کندروسیت‌ها و در پی آن تخریب غضروف  در بیماری آرتریت روماتوئید. 39

شکل‏1‑7;سایتوکاین‌هایی که هدف درمانی در بیماری آرتریت روماتوئید تلقی می‌شوند. 40

شکل‏1‑8; انواع مدل‌های حیوانی بیماری آرتریت روماتوئید. 44

شکل‏1‑9;فهرستی از داروهای رو به پیشرفت جهت درمان آرتریت روماتوئید. 46

شکل‏1‑10;فهرستی از داروهای رو به پیشرفت جهت درمان آرتریت روماتوئید. 46

شکل‏1‑11;از داروهای رو به پیشرفت جهت درمان آرتریت روماتوئید. 47

شکل‏4‑1;تصویری از Erosionبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی مرهم مفاصل.. 103

شکل‏4‑2;تصویری ازGranulation tissue با بزرگنمایی 400 برابر در نمونه‌ی مرهم مفاصل. 104

شکل‏4‑3;تصویری ازMononuclear cell infilteration & mild cell margination با بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی مرهم مفاصل. رت‌های این گروه با استفاده از ادجوانت کامل فروند دچار التهاب آرتریتی شده و در ادامه به مدت 19 روز تحت درمان با مرهم مفاصل قرار گرفته‌اند. 105

شکل‏4‑4;تصویری از Synovial hyperplasia & pannus formation marhamبا بزرگنمایی 400 برابر در نمونه‌ی مرهم مفاصل. 106

شکل‏4‑5;تصویری از Mild cell migrationبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پارافین. 107

شکل‏4‑6;تصویری از Mononuclear cell infilterationبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پارافین. 108

شکل‏4‑7;تصویری از Synovial hyperplasia &mononuclear cell infilterationبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پارافین. 109

شکل‏4‑8;تصویری از Erosionبا بزرگنمایی 400 برابر در نمونه‌ی پیروکسیکام. 110

شکل‏4‑9;تصویری از Granulation tissueبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پیروکسیکام. 111

شکل‏4‑10;تصویری از Mild cell margination & mononuclear cell infilterationبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پیروکسیکام. 112

شکل‏4‑11;تصویری از Synovial hyoerplasia & pannus formatiomبا بزرگنمایی 200 برابر در نمونه‌ی پیروکسیکام. 113

شکل‏4‑12;نمودار ذوب محصول ریل تایممربوط به ژن Beta actin. 119

شکل‏4‑13;نمودار ذوب محصول ریل تایم مربوط به ژن IL-1β. 120

شکل‏4‑14;نمودار ذوب محصول ریل تایم مربوط به ژن IL-6. 121

شکل‏4‑15;نمودار ذوب محصول ریل تایم مربوط به ژن TNFα. 122

شکل‏4‑16;نمودار4-5- منحنی تکثیر ژن خانه دار در کنار سایر ژنها 123

1 دیدگاه برای دانلود :ارزیابی پماد مرهم مفاصل بر بیان سایتوکاین های IL-1β، IL-6 وTNFα در مدل حیوانی آرتریت روماتوئید

  1. Nsypez

    claritin allergy sinus 12hr costco does allegra require a prescription best prescription allergy pills

دیدگاه خود را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo