%41تخفیف

دانلود پروژه:مورفولوژی و هیستو شیمی کرک های غده ای در شنبلیله

تعداد164صفحه در فایل word

 

گروه علوم گیاهی

 

پايان نامة دورة كارشناسي ارشد

 علوم گياهي

 گرایش زیست شناسی تکوینی

مورفولوژی و هیستو شیمی کرک های غده ای در شنبلیله

چکیده

شنبلیله(Trigonella  foenum-graecum)  گیاهی علفی از تیره باقلائیان (Fabaceae) است که به دلیل دارا بودن متابولیت های ارزشمندی مانند تریگونلین و دیوسژنین،  به عنوان یک گیاه داروئی دارای اهمیت فراوان می باشد. تنوعی از ترکیبات شیمیایی مهم توسط سلول های ترشحی تخصصی در قالب کرک های غده ای با عملکرد های متفاوت در گیاهان تولید می شود . شناسائی این ترکیبات در کرک های ترشحی برای بهره برداری بهینه از این منابع ذخیره ای خارجی در دسترس، و همچنین تبیین پروتکل های مورد نیاز برای جداسازی آنها حائز اهمیت است. مورفولوژی و هیستوشیمی کرک های اپیدرمی ساقه و برگ شنبلیله با استفاده از میکروسکوپ نوری و الکترونی نگاره (SEM)  و تست های اختصاصی بر روی برش های دستی و تازه انجام شد. با بررسی های صورت گرفته مشخص گردید که کرک ها در ساقه و برگ مشابه بوده، شامل یک نوع کرک پوششی و دو نوع کرک ترشحی می باشند. کرک های پوششی از نوع یک ردیفی (Uniseriate)  با پایه برجسته و کرک های غده ای از نوع سرسان  (Capitate)  با سر خاجی شکل  (Clavate)  و یا طویل (Elongated) هستند. ترکیبات ترشحی در هر دو نوع از کرک های غده ای محتوی آلکالوئید ها بوده که به نظر می رسد تنها جایگاه ذخیره این ترکیبات در اندام های مورد مطالعه باشند. همچنین شامل پلی ساکارید ها، ترکیبات پکتیکی، آمینو اسید ها، لیپید ها و ترکیبات فنلی بوده اما  فاقد قند های احیاء کننده، پروتئین و ترپنوئیدها می باشند. مطالعه مراحل تکوینی نشان داد که که وجود این ترکیبات به سن اندام بستگی نداشته و به مراحل تکوین کرک بستگی دارد.

کلمات کلیدی: شنبلیله، کرک های غده ای، مورفولوژی، هیستو شیمی، ترکیبات ترشحی.

                                    (Trigonella  foenum-graecum L.)

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                                             صفحه

فصل اول: کلیات   

1-1. مقدمه ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..2

1-2. مواد موثره گیاهی…………………… …………………………………………………………………………………………………………………….3

        1-2-1. تقسیم بندی مواد موثره گیاهی…………………………………………………………………………………………………………………4

           1-2-1-1. ترپن ها   ………………………………………………………………………………………………………………………………………….4

        1-2-1-2. ترکیبا ت فنولی……………………………………………………………………… ………………………………………………………..5

1-2-1-3. ترکیبات ازت دار…………………………. ……………………………………………………………………………………………6

        1-2-2.  توزیع مواد موثره در داخل گیاه ………………… .. …………………………………………………………………………………….7

1-3. شنبلیله…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..8

        1-3-1. تاریخچه و منشا پیدایش شنبلیله…………………………………………………………………………………………………………8

1-3-2. اسامی گیاه……………………………………………………………………………………………………………………………………………9

1-3-3. مشخصات گیاه شناسی……………………………………………………………………………………………………………………..10

1-3-4. پراکنش………… ………………………………………………………………………………………………………………………………….14

1-3-5. اکولوژی……… …………………………………………………………………………………………………………………………………..14

1-3-6. شیمی گیاه………………………………………………………………………………………………………………………………………….16

1-3-6-1. تریگونلین………………….. ……………………………………………………………………………………………………………..20

1-3-6-2. دیوسژنین……………………………………………………………………………………………………………………………………21

       1-3-7. موارد استفاده گیاه…………………………………………………………………………………………………………………………………….22

       1-3-8. استفاده در طب سنتی ایران…………………………………………………………………………………………………………………….23

       1-3-9. استفاده در طب سنتی ملل………………………………………………………………………………………………………………………23

       1-3-10.کاربرد های دارویی………………………………………………………………………………………………………………………………….24

    1-4. کرک ها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..25

        1-4-1. کرک های ساده یا غیر غده ای……………………………………………………………………………………………………………….26

        1-4-2. کرک های غده ای…………………………………………………………………………………………………………………………………..27

    1-5. هیستو شیمی (شیمی بافتی)……………………………………………………………………………………………………………………………29

    1-6. مروری بر پژوهش های پیشین…………………………………………………………………………………………………………………………31

       1-6-1. مطالعات انجام شده بر روی شنبلیله………………………………………………………………………………………………………..31

       1-6-2. مطالعات انجام شده بر روی کرک ها……………………………………………………………………………………………………….33

    1-7. اهداف پژوهش…………………………………………………………………………………………………………………………………………………..37

فصل دوم: مواد و روش ها

    2-1. کاشت بذر…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..39

    2-2. تعیین pH خاک…………………………………………………………………………………………………………………………………………………39

    2-3. انتخاب نمونه………………………………………………………………………………………………………………………………………………………41

    2-4. آماده سازی نمونه ها جهت مطالعات میکروسکوپی………………………………………………………………………………………….42

       2-4-1. میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM)…………………………………………………………………………………42

       2-4-2. میکروسکوپ نوری (LM)………………………………………………………………………………………………………………………….42

          2-4-2-1. مورفولوژی کرک ها…………………………………………………………………………………………………………………………..42

          2-4-2-2. ساختار کرک ……………………………………………………………………………………………………………………………………43

             2-4-2-2-1. رنگ آمیزی هسته………………………………………………………………….. ………………………………………………43

             2-4-2-2-2. دیواره های سلولزی………………………………………………………………………………………………………………….43

             2-4-2-2-3. دیواره های چوبی……………………………………………………………………………………………………………………..43

             2-4-2-2-4. دیواره های کوتینی و چوب پنبه ای…………………… …………………………………………………………………43

          2-4-2-3. تکوین و توزیع کرک ها…………………………………………………………………………………………………………… ……..44

          2-4-2-4. مطالعات تشریحی (آناتومی)……………………………………………………………………………………………………. ……..44

          2-4-2-5. هیستو شیمی کرک های غده ای……………………………………………………………………………………………. ……..45

             2-4-2-5-1. تعیین حضور کربو هیدرات ها………………………………………………………………………………………………….45

             2-4-2-5-2. تعیین حضور لیپید ها………………………………………………………………………………………………………………46

             2-4-2-5-3. تعیین حضور ترکیبات پپتیدی………………………………………………………………………………………………..46

             2-4-2-5-4. تعیین حضور ترپن ها………………………………………………………………………………………………………………47

             2-4-2-5-5. تعیین حضور آلکالوئید ها………………………………………………………………………………………………………..47

             2-4-2-5-6. تعیین حضور ترکیبات فنولی…………………………………………………………………………………………………..48

فصل سوم: نتایج

    3-1. ویژگی های مورفولوژیکی و تشریحی………………………………………………………………………………………………………………..50

       3-1-1. ساقه…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..50

       3-1-2. برگ…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..51

       3-1-3. کرک………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….52

          3-1-3-1. رنگ آمیزی هسته…………………………………………………………………………………………………………………………….54

          3-1-3-2. دیواره های سلولزی………………………………………………………………………………………………………………………….54

          3-1-3-3. دیواره های چوبی……………………………………………………………………………………………………………………………..54

          3-1-3-4. دیواره های کوتینی و چوب پنبه ای………………………………………………………………………………………………..54

    3-2. تکوین کرک……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….55

       3-2-1.کرک های غده ای………………………………………………………………………………………………………………………………………55

       3-2-2. کرک های غیر غده ای……………………. ………………………………………………………………………………………………………56                                                         3-3. توزیع و تراکم کرک ها………………………………………………………………………………………………………………………………………57

    3-4. هیستو شیمی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………….82

       3-4-1. کربو هیدرات ها………………………………………………………………………………………………………………………………………..82

       3-4-2. لیپید ها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..83

       3-4-3. ترکیبات پپتیدی……………………………………………………………………………………………………………………………………….85

       3-4-4. ترپن ها………………………………………………………………………………………………………………………………………………………86

       3-4-5. آلکالوئید ها………………………………………………………………………………………………………………………………………………..87

       3-4-6. ترکیبات فنولی…………………………………………………………………………………………………………………………………………..87

فصل چهارم: بحث و نتیجه گیری

    4-1. مورفولوژی و ساختار کرک………………………………………………………………………………………………………………………………113

    4-2. تکوین کرک…………………………………………………………………………………………………………………………………………………….116

    4-3. توزیع و تراکم کرک ها……………………………………………………………………………………………………………………………………119

    4-4. هیستو شیمی کرک ها……………………………………………………………………………………………………………………………………120

پیشنهادات پژوهشی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….126

منابع……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….127

فهرست شکل ها

 عنوان                                                                                                                            صفحه

شکل 1-1. گیاه شنبلیله………………………………………………………………………………………………………………………………………………….11

شکل 1-2. ریشه شنبلیله همراه با گرهک………………………………………………………………………………………………………………………12

شکل 1-3. دانه شنبلیله…………………………………………………………………………………………………………………………………………………..12

شکل 1-4. ساختار 4- هیدروکسی ایزو لوسین………………………………………………………………………………………………………………17

شکل 1-5. اسکلت پایه فلاونوئید…………………………………………………………………………………………………………………………………….18

شکل 1-6. ساختار شیمیایی stolon و anethol …………………………………………………………………………………………………………….19

شکل 1-7. ساختار شیمیایی تریگونلین………………………………………………………………………………………………………………………….21

شکل 1-8. ساختار شیمیایی دیوسژنین………………………………………………………………………………………………………………………….22

شکل 1-9. برخی داروهای فرموله شده شنبلیله…………………………………………………………………………………………………………….24

شکل 1-10. تصویر SEM از کرک های ساده و غده ای………………………………………………………………………………………………..25

شکل 1-11. تصویر SEM از کرک ساده در آرابیدوپسیس…………………………………………………………………………………………….26

شکل 1-12. تصاویر انواعی از کرک های ساده……………………………………………………………………………………………………………….27

شکل 1-13. تصاویر میکروسکوپ نوری از کرک های سپری و سرسان…………………………………………………………………………28

شکل 1-14. Frencois Vincent Raspail …………………………………………………………………………………………………………………….30

شکل 2-1. گیاه شنبلیله در مراحل مختلف رشد……………………………………………………………………………………………………………40

شکل 2-2. گیاه شنبلیله در مرحله جمع آوری………………………………………………………………………………………………………………41

شکل 3-1. مورفولوژی برگ و ساقه شنبلیله…………………………………………………………………………………………………………………..58

شکل 3-2. ساختار ساقه با رنگ آمیزی مضاعف……………………………………………………………………………………………………………..59

شکل 3-3. جزئیات ساختاری ساقه…………………………………………………………………………………………………………………………………60

شکل 3-4. ساختار تشریحی برگ……………………………………………………………………………………………………………………………………61

شکل 3-5. نمای سطحی سلول های اپیدرم و روزنه در برگ…………………………………………………………………………………………62

شکل 3-6. مورفولوژی کرک پوششی (غیر غده ای)……………………………………………………………………………………………………….63

شکل 3-7. تصاویر SEM از کرک پوششی……………………………………………………………………………………………………………………..64

شکل 3-8. مورفولوژی کرک های ترشحی (غده ای)……………………………………………………………………………………………………..65

شکل 3-9. تصاویر SEM از کرک ترشحی………………………………………………………………………………………………………………………66

شکل 3-10. ساختار کرک پوششی…………………………………………………………………………………………………………………………………67

شکل 3-11. ساختار کرک ترشحی…………………………………………………………………………………………………………………………………68

شکل 3-12. نحوه آرایش سلول های ترشحی ……………………………………………………………………………………………………………….69

شکل 3-13. سر ترشحی در نمای سطحی……………………………………………………………………………………………………………………..70

شکل 3-14. رنگ آمیزی هسته………………………………………………………………………………………………………………………………………71

شکل 3-15. معرف ید- اسید سولفوریک برای دیواره سلولزی………………………………………………………………………………………72

شکل 3-16. معرف فلوروگلوسینول برای دیواره های چوبی…………………………………………………………………………………………..73

شکل 3-17. سودان IV برای دیواره های کوتینی و چوب پنبه ای……………………………………………………………………………….74

شکل 3-18. تکوین کرک ترشحی…………………………………………………………………………………………………………………………………..75

شکل 3-19. تصاویر مختلف از تکوین کرک ترشحی……………………………………………………………………………………………………..76

شکل 3-20. حالات مختلف ترشح………………………………………………………………………………………………………………………………….77

شکل 3-21. تزئینات ترشحی حاصل از ساختار های لوله مانند…………………………………………………………………………………….78

شکل 3-22. تکوین کرک پوششی…………………………………………………………………………………………………………………………………..79

شکل 3-23. تصاویر SEM از توزیع و تراکم کرک ها در برگ………………………………………………………………………………………………………….80

شکل 3-24. توزیع و تراکم کرک ها در ساقه………………………………………………………………………………………………………………….81

شکل 3-27. معرف PAS برای پلی ساکارید ها………………………………………………………………………………………………………………90

شکل 3-28. کنترل منفی PAS …………………………………………………………………………………………………………………………………….91

شکل 3-29. هماتوکسیلین و سافرانین برای ترکیبات پکتیکی………………………………………………………………………………………92

شکل 3-30. معرف فهلینگ برای قند های احیاء کننده………………………………………………………………………………………………..93

شکل 3-31. سودان سیاه B برای کل لیپید ها………………………………………………………………………………………………………………94

شکل 3-32. کنترل منفی سودان سیاه B………………………………………………………………………………………………………………………95

شکل 3-33. نیل بلو برای تشخیص افتراقی لیپید ها……………………………………………………………………………………………………..96

شکل 3-34. کنترل منفی نیل بلو…………………………………………………………………………………………………………………………………..97

شکل 3-35. سودان قرمز 7B برای لیپید های خنثی…………………………………………………………………………………………………….98

شکل 3-36. استون نیل بلو برای فسفو لیپید ها…………………………………………………………………………………………………………….99

شکل 3-37. آبی کوماسی برای پروتئین ها………………………………………………………………………………………………………………….100

شکل 3-38. نین هیدرین برای آمینو اسید ها……………………………………………………………………………………………………………..101

شکل 3-39. معرف Nadi برای اسانس ………………………………………………………………………………………………………………………102

شکل 3-40. آنتیموان تری کلراید برای استروئید ها……………………………………………………………………………………………………103

شکل 3-41. اسید سولفوریک برای سزکوئی ترپن ها…………………………………………………………………………………………………..104

شکل 3-42. معرف واگنر برای آلکالوئید ها………………………………………………………………………………………………………………….105

شکل 3-43. معرف واگنر در برش عرضی ساقه……………………………………………………………………………………………………………106

شکل 3-44. معرف دراژندورف برای آلکالوئید ها…………………………………………………………………………………………………………107

شکل 3-45. کنترل منفی الکالوئید ها………………………………………………………………………………………………………………………….108

شکل 3-46. کلرید فریک برای ترکیبات فنولی…………… ……………………………………………………………………………………………..109

شکل 3-47. دی کرومات پتاسیم برای ترکیبات فنو لی………………………………………………………………………………………………110

شکل 3-48. معرف Neu,s برای فلاونوئید ها……………………………………………………………………………………………………………..111

 

فهرست جدول ها

عنوان                                                                                                             صفحه

جدول 1-1. ویژگی های مورفولوژیک گیاه شنبلیله………………………………………………………………………………………………………..13

جدول 1-2. پراکنش برخی گونه های جنس Trigonella………………………………………………………………………………………….14

جدول 1-3. عوامل اکولوژیک موثر بر رشد شنبلیله………………………………………………………………………………………………………..15

جدول 1-4. اسید های آمینه موجود در دانه های شنبلیله…………………………………………………………………………………………….16

جدول 3-1. نتایج تست های هیستو شیمیایی کرک های غده ای ساقه و برگ……………………………………………………………89

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo