%53تخفیف

شناسایی مولکولی سویه های سارکوسیستیس درگوسفند، بابل، ایران

تعداد 70صفحه در فایل word

چکیده

مقدمه: سارکوسیستیس از انگل های مشترک انسان و دام می باشد. از آنجا که مطالعات مولکولی محدودی از این انگل در ایران انجام شده، این بررسی در گوسفند های منطقه بابل انجام گردید.

مواد روش ها: 150 لاشه گوسفند، جهت تعیین آلودگی به ماکروکیست، مورد بررسی قرار گرفت. از نمونه گوشت عضلات مورب داخلی شکمی و عضله دیافراگم گوسفند آلوده به ماکروکیست سارکوسیستیس استفاده گردید. از همه نمونه های گوشت 2 عدد کیست به صورت تصادفی جدا گردید. از محتویات کیست ها گسترش مرطوب و اسمیر جهت رنگ آمیزی گیمسا و بررسی اتوفلورسنس تهیه گردید. برای مطالعه مولکولی، از تمام نمونه ها DNA به روش جوشاندن استخراج شد. با استفاده از تکنیک PCR، قطعه ژن 18S rRNA با پرایمرهای طراحی شده شناسایی گردید. بعد از تعیین توالی محصول PCR، شناسایی گونه ها با نرم افزارهای BLAST و MEGA6 صورت پذیرفت.

یافته ها: با بررسی ماکروسکوپیک، 50 لاشه دارای کیست انگل بودند. بررسی میکروسکوپیک محتویات کیست، زوایت های هلالی شکل و سفید رنگ را نشان داد. در بررسی اتوفلورسنس زوایت های سارکوسیستیس، تمام نمونه ها از خود فلورسنت سبز ساطع نمودند. نتایج تعیین توالی نشان داد 20 نمونه با سارکوسیستیس ژیگانته آ، 6 نمونه با سارکوسیستیس مولئی و 4 نمونه با sarcosystis specie شباهت بیش از 98% داشتند. 1 مورد سارکوسیستیس مولئی و 3 مورد سارکوسیستیس ژیگانتهآ حاصل از این پژوهش، به ترتیب با شمارههای KP053891، KP053892، KP053893، KP053894 در پایگاه GenBank ثبت شد.

نتیجه گیری: توالی ژن های سارکوسیستیس مولئی و سارکوسیستیس ژیگانته آ در این مطالعه با چند توالی ژن سارکوسیتیس مولئی و سارکوسیتیس ژیگانتهآ بسیار نزدیک به هم بودند لذا با بررسی های مولکولی بخش بیشتر یا تمام ژن 18S rRNA و یا مطالعه ژن های دیگری در این انگل، میتوان به شباهتها و تفاوتهای قطعی آنها پی برد.

واژه های کلیدی: سارکوسیستیس، 18S rRNA، PCR، سارکوسیتیس ژیگانته آ، سارکوسیستیس مولئی

دسته: زیست شناسی, علوم تجربی برچسب: 18S rRNA, PCR, سارکوسیتیس ژیگانته آ, سارکوسیستیس مولئی, واژه های کلیدی: سارکوسیستیس

توضیحات

فهرست مطالب

عنوان صفحه

چکیده. 1

فصل اول کلیات تحقیق

1-1- تاریخچه. 3

1-2- طبقه بندی سارکوسیستیس… 3

1-3- سارکوسیستیس… 4

1-4- همه گیری شناسی.. 4

1-5- چرخه زندگی.. 5

1-6- میزبان ها 8

1-6-1- گونه های آلوده کننده در گاو. 11

1-6-2- گونه های آلوده کننده در بز. 11

1-6-3- گونه های آلوده کننده در گوسفند. 12

1-6-3-1- سارکوسیستیس تنلا و سارکوسیستیس آریتیکانیس… 12

1-6-3-2- سارکوسیستیس ژیگانته آ و سارکوسیستیس مدوزیفورمیس… 13

1-6-4- گونه آلوده کننده در انسان. 14

1-6-4-1- سارکوسیستیس لیندمانی.. 14

1-7- روش انتقال. 15

1-8- یافته های بالینی.. 15

1-8-1- سارکوسیستوزیس در گاو. 15

1-8-2- سارکوسیستوزیس در گوسفند. 16

1-8-3- نشانه های بالینی در انسان. 16

1-9- تشخیص سارکوسیستیس… 17

1-9-1- روش ماکروسکوپی.. 17

1-9-2- روش میکروسکوپی 18

1-9-2-1- روش هضمی.. 18

1-9-2-2- روش گسترش بافتی.. 19

1-9-2-3- روش هیستوپاتولوژیکی 19

1-9-3- تشخیص سرولوژیکی.. 19

1-9-4- روش مولکولی ……………………………………………………………………………… 20

1-10- کنترل بیماری.. 20

1-11- پیشگیری از بیماری.. 21

1-12- دلایل تحقیق. 21

فصل دوم مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- سابقه و پیشینه تحقیق در دیگر کشورها 23

2-2- سابقه و پیشینه تحقیق در ایران. 24

فصل سوم مواد و روش ها

3-1- نمونه برداری.. 29

3-2- جداسازی ماکروکیست.. 29

3-3- جداسازی تروفوزوایت.. 29

3-4- تهیه گسترش مرطوب.. 29

3-5- تهیه لام برای رنگ آمیزی برادی زوایت سارکوسیستیس با گیمسا 30

3-6- تهیه لام برای بررسی اتوفلورسنس برادی زویت سارکوسیستیس 30

3-7- دستورالعمل ساخت محلول ها 30

3- 7-1- PBS. 30

3-7-2- کوتینگ بافر. 31

3-8- روشهای مولکولی.. 31

3-8-1- استخراج DNA.. 31

3-8-2- بررسی کیفی استخراج DNA.. 31

3-8-3- واکنش زنجیره ای پلی مراز 32

3-8-4- روش کار PCR.. 33

3-8-5- انجام PCR.. 34

3-9- الکتروفورز. 34

3-9-1- مواد و وسایل مورد نیاز جهت الکتروفورز. 34

3-9-2- طرز تهیه بافر TBE 10x. 35

3-9-3- لودینگ بافر. 35

3-9-4- طرز تهیه آگارز 1%. 35

3-10- تعیین توالی و رسم فیلوژنی تری.. 36

فصل چهارم نتایج

4-1- نتایج آزمون ماکروسکوپی.. 38

4-2- بررسی کیست با رنگ آمیزی گیمسا 39

4-3- بررسی کیست با میکروسکوپ فلورسانس… 39

4-4- آلودگی به سارکوسیستیس در دام های کشتار شده بر اساس سن و محل پرورش دام. 40

4-5- نتایج حاصل از استخراج DNA.. 40

4-6- نتایج حاصل از PCR. 41

4-7- تعیین توالی.. 41

4-8- فیلوژنی تری.. 42

4-9- بررسی هم ترازی توالی ها 43

فصل پنجم بحث

بحث.. 51

نتیجه گیری.. 55

پیشنهادات.. 56

منابع. 57

چکیده انگلیسی. 62

امتیاز 0 از 5 از 0 دیدگاه

قیمت اصلی 45,000 تومان بود.قیمت فعلی 21,000 تومان است.

تاریخ ایجاد مهر 29, 1399
تاریخ بروزرسانی اسفند 13, 1401
فروش 0
دیدگاه 0

شرایط استفاده از محصول

تمام محصولات به ازای پرداخت پروژه تنها قابل استفاده می باشند. این بدین معنی است که برای استفاده از یک یا چند محصول ، لازم به خرید آن محصول است.

مزایای خرید این محصول:

دسترسی به فایل به صورت همیشگی
پشتیبانی رایگان
پشتیبانی 24 ساعته محصول
بازگشت وجه در صورت عدم رضایت مشتری

مشاهده قوانین سایت