تعیین ژنوتیپ های واریانت OCT3-564G>A و ارتباط آن با هموگلوبین گلیکوزیله در بیماران مبتلا به دیابت نوع 2

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                                               صفحه

چکیده فارسی………………………………………………………………………………………………………………………..1

فصل اول: (مقدمه و اهداف تحقیق)

1-1-مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………..2

1-2-اهداف تحقیق…………………………………………………………………………………………………………………………..4

1-3- فرضیه تحقیق………………………………………………………………………………………………………………………….4

1-4-1- دیابت ملیتوس……………………………………………………………………………………………………………………5

1-4-1-1-انواع دیابت ملیتوس…………………………………………………………………………………………………………6 1-4-1-2-دیابت نوع اول……………………………………………………………………………………………………………………..7  1-4-1-3- دیابت نوع دوم………………………………………………………………………………………………………………8

1-4-2- هموگلوبین گلیکوزیله…………………………………………………………………………………………………………9

1-4-3- دیابت نوع 2 و متفورمین…………………………………………………………………………………………………..10

1-4-4- متفورمین…………………………………………………………………………………………………………………………11

1-4-4-1- تاریخچه متفورمین……………………………………………………………………………………………………….11

1-4-4-2- فارماکوکینتیک متفورمین……………………………………………………………………………………………….13

1-4-4-3- اثرات بالینی متفورمین ………………………………………………………………………………………………….15

1-4-4-4- اثر متفورمین بر متابولیسم پروفایل لیپیدی………………………………………………………………………..16

1-4-4-5- اثر متفورمین بر عملکرد کبدی……………………………………………………………………………………….17

1-4-5- OCTs………………………………………………………………………………………………………………………….20

1-4-5-1- ساختار ژن OCT3……………………………………………………………………………………………………..21

1-4-5-2- توزیع بافتی و نقش فیزیولوژیکیOCT3………………………………………………………………………..21

1-4-5-3- واریانت‌های ژنتیکیOCT3………………………………………………………………………………………….22

1-4-5-4- واریانت OCT3-564G>A……………………………………………………………………………………….24

فصل دوم: (مروری بر تحقیقات انجام شده)

2-1- مروری بر تحقیقات انجام شده………………………………………………………………………………………25

فصل سوم: (مواد و روش‌ها)

3-1-روش پژوهش……………………………………………………………………………………………………………………….33

3-2- جامعه آماری…………………………..……………………………………………………………………………………………33

3-3- حجم نمونه و روش محاسبه…………………………………………………………………………………………………..33

3-4- ابزار گردآوری اطلاعات…………………………………………………………………………………………………………34

3-5- معیارهای ورود وخروج…………………………………………………………………………………………………………34

3-6- روش اجرا و مواد لازم………………………………………………………………………………………………………….35

3-6-1- سنجش پارامترهای بیوشیمیایی…………………………………………………………………………………………..35

3-6-2- استخراج DNA به روش Nucleon TM BACC II………………………………………………………35

3-6-2-1- مواد مورد استفاده…………………………………………………………………………………………………………35

3-6-2-2- طرز تهیه بافر لیزکنندهΙ(Lysis Buffer Ι)…………………………………………………………………….36

3-6-2-3- طرز تهیه بافر لیز کنندهΙΙ (Lysis Buffer ΙΙ)……………………………………………………………….37

3-6-2-4- طرز تهیه سدیم پرکلرات 5 مولار(Naclo₄)……………………………………………………………………36

3-6-2-5- روش انجام استخراج DNA…………………………………………………………………………………………36

3-6-2-6- بررسي کمی و کیفی DNA استخراج شده……………………………………………………………………….37

3-6-3- روش انجام PCR…………………………………………………………………………………………………………… 40

3-6-3-1- مرحله اماده‌سازی یا قبل PCR (Pre-PCR)……………………………………………………………….. 39

3-6-3-2- مرحله PCR………………………………………………………………………………………………………………40

3-6-3-3- مرحله POST-PCR………………………………………………………………………………………………….45

3-6-3-4- روش RFLP……………………………………………………………………………………………………………..49

3-7- آنالیز آماری…………………………………………………………………………………………………………………………50

3-8- ملاحظات اخلاقی………………………………………………………………………………………………………………..50

فصل چهارم : (نتایج)

4-1- نتایج PCR………………………………………………………………………………………………………………………….51

4-2- نتایج RFLP……………………………………………………………………………………………………………………….52

4-3- توزیع ژنوتیپی و آللی…………………………………………………………………………………………………………….53

4-3-1- ارزیابی واریانت OCT3-564G>A در گروه بیمار و کنترل………………………………………………..53 4-3-2- ارزیابی واریانت OCT3-564G>A به تفکیک جنس در گروه بیمار و کنترل………………………..54 4-4- بررسی شاخص‌های بیوشیمیایی………………………………………………………………………………………………56 4-4-1- مقایسه مشخصات عمومی وپارامترهای بالینی بین گروه بیمار و کنترل……………………………………..56 4-4-2- بررسی تغییرات HbA1c در ژنوتیپ‌های واریانت OCT3-564G>A………………………………..58

فصل پنجم (نتیجه گیری)

5-1- بحث…………………………………………………………………………………………………………………………………. 59

5-2-نتیجه‌گیری………………………………………………………………………………………………………………………….. 62

5-3- پیشنهادات……………………………………………………………………………………………………………………………62

منابع و ماخذ………………………………………………………………………………………………………………………………….63

پیوست…………………………………………………………………………………………………………………………………………..69

چکیده انگلیسی……………………………………………………………………………………………………………………………..70