بررسی کمی و کیفی متابولیتهای ثانویه با ساختار فنلی در اندامهای Astragalus compactus با تاکید بر مراحل تکوینی

مطالب

فصل اول: بررسی منابع

1-1-كلياتي درباره جنس گون …………………………………………………………………………………………………………..1

1-1-1-جايگاه گون در تيره فاباسه …………………………………………………………………………………………………..1

1-1-2-گیاه‌شناسی جنس گون ………………………………………………………………………………………………………….2

1-1-3- معرفي گونه A. compactus …………………………………………………………………………………………..3

1-1-3-1- جايگاه سيستماتيكي ……………………………………………………………………………………………………….3

1-1-3-2-گیاه‌شناسی ………………………………………………………………………………………………………………………..5

1-1-4-اهميت اقتصادي و دارويي گون‌ها ……………………………………………………………………………………….6

1-2- فيتوشيمي جنس گون ………………………………………………………………………………………………………………7

1-2-1- ساپونین­ها و ساپوژنین­های ترپنوئیدی ……………………………………………………………………………..7

1-2-1-1-جداسازی و تخلیص …………………………………………………………………………………………………….16

1-2-1-2- سایر ترکیبات ترپنوئیدی ……………………………………………………………………………………………..17

1-2-1-3- فعالیت زیستی ……………………………………………………………………………………………………………..19

1-2-2-ترکیبات فنلی …………………………………………………………………………………………………………………….20

1-2-2-1- فلاونوئیدها ………………………………………………………………………………………………………………….21

1-2-2-2- سایر ترکیبات فنلی …………………………………………………………………………………………………….28

1-2-2-3- فعالیت زيستي …………………………………………………………………………………………………………..29

1-2-3- پلی­ساکاریدها ……………………………………………………………………………………………………………….30

1-2-3-1- فعالیت زيستي …………………………………………………………………………………………………………31

1-2-4- آلکالوئیدها …………………………………………………………………………………………………………………..32

1-2-5- ترکیبات نیترو ………………………………………………………………………………………………………………35

1-2-6- متابولیتهای سلنیم ………………………………………………………………………………………………………………35

1-3-  متابوليتهاي ثانويه و عوامل موثر بر توليد آنها  ……………………………………………………………………36

1-3-1-  عوامل فیزیولوژیک ………………………………………………………………………………………………………….39

1-3-1-1- نوع اندام گیاهی ………………………………………………………………………………………………/…………..39

1-3-1-2- مرحله نموی گیاه و اندام ……………………………………………………………………………………………..40

1-3-1-3- آسیبهای مکانیکی و شیمیایی ……………………………………………………………………………………….43

1-3-2- فاکتورهای محیطی …………………………………………………………………………………………………………….44

1-3-2-1- آب و هوا ……………………………………………………………………………………………………………………..44

1-3-2-2- موقعيت جغرافیایی ………………………………………………………………………………………………………45

1-3-2-3- آلودگی هوا …………………………………………………………………………………………………………………..45

1-3-3- فاکتورهای ژنتیکی …………………………………………………………………………………………………………..46

فصل دوم: مواد و روش‌ها

۲-1-تجهیزات آزمایشگاهی ……………………………………………………………………………………………………………48

۲-1-1- دستگاههای مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………..48

۲-١-2- مواد و حلال‌های مصرفی …………………………………………………………………………………………………49

2–۲ روش کار ……………………………………………………………………………………………………………………………..51

۲-۲-1- جمع آوری نمونه  ………………………………………………………………………………………………………….51

2–۲-۲ آماده سازی نمونه ……………………………………………………………………………………………………………52

۲-۲-3- عصاره گیری ………………………………………………………………………………………………………………….52

۲-۲-4- مطالعه كلي عصاره‌ها با تكنيك TLC ………………………………………………………………………….53

2-2-4-1 بررسی ترکیبات عصاره‌های غیر قطبی n–هگزاني به کمک دستگاه GC-MS…………54

۲-۲-4-1-1- فراکسیونه کردن عصاره‌ی n–هگزانی به روش VLC ………………………………………..55

۲-۲-4-1-2- بررسی فراکسیونهای حاصل از عصاره‌ی n-هگزانی …………………………………………….56

2-2-4-2- فراکسیونه نمودن عصاره‌های متانولی………………………………………………………………………….57

۲-۲-4-3- جداسازی با استفاده از HPLC ……………………………………………………………………………….57

۲-۲-4-3-1-HPLC  آنالیتیکال ……………………………………………………………………………………………….57

۲-۲-4-3-2- HPLC پره پاراتیو ……………………………………………………………………………………………..62

2-۲-4-4-  شناسایی ترکیبات ……………………………………………………………………………………………………64

2-2-4-5- بررسی فعالیت آنتی اکسیدانتی ………………………………………………………………………………..65

2-2-5- تعيين محتواي فنل كل  ……………………………………………………………………………………………….66

فصل سوم: نتایج و بحث

3-1- شناسایی ترکیبات فرار …………………………………………………………………………………………………….67

3-1-1- ترکیبات فرار ریشه …………………………………………………………………………………………………….67

3-1-1-1- مرحله رويشي ……………………………………………………………………………………………………….68

3-1-1-2- مرحله گلدهی ………………………………………………………………………………………………………71

3-1-1-3- مرحله تولید بذر …………………………………………………………………………………………………..75

3-1-2- شناسايي تركيبات فرار برگ ………………………………………………………………………………………83

3-1-2-1- مرحله رويشي ………………………………………………………………………………………………………83

3-1-2-2- مرحله گلدهي ………………………………………………………………………………………………………86

3-1-2-3- مرحله توليد بذر …………………………………………………………………………………………………..89

3-1-3- تركيب فرار گل …………………………………………………………………………………………………………94

۳-2-شناسایی متابولیتهای ثانویه فنلی …………………………………………………………………………………….99

3-2-1- استخراج و شناسایی ترکیبات عصاره متانولی ریشه ………………………………………………..99

3-2-1-1-ترکیبات حاصل از فراکسیون 6۰٪ عصاره متانولی …………………………………………….104

3-2-1-2- شناسایی و تعیین ساختمان ترکیبات …………………………………………………………………105

3-2-1-2-1-ترکیب شماره 1 ……………………………………………………………………………………………..105

3-2-1-2-2-ترکیب شماره 2 …………………………………………………………………………………………….107

3-2-2- استخراج و شناسایی ترکیبات عصاره متانولی  برگ ……………………………………………109

۳-2-2-1-ترکیبات حاصل از فراکسیون ۴۰٪ عصاره متانولی ……………………………………….112

۳-2-2-2-شناسایی و تعیین ساختمان ترکیبات ……………………………………………………………..113

3-2-2-2-1-ترکیب شماره 3  ……………………………………………………………………………………….113

۳-2-2-3- ترکیبات حاصل از فراکسیون 6۰٪ عصاره متانولی …………………………………….116

۳-2-2-4-شناسایی و تعیین ساختمان ترکیبات ……………………………………………………………117

3-2-2-4-1-ترکیب شماره 4 ……………………………………………………………………………………….117

3-2-2-4-2-ترکیب شماره 5 ……………………………………………………………………………………….119

3-3- سنجش  ميزان فنل كل…………………………………………………………………………………………..122

3-3- سنجش خاصيت آنتي اكسيدانتي …………………………………………………………………………..124

3-4- نتیجه گیری و پیشنهادات ……………………………………………………………………………………..128