بررسی میزان ابتلا به بیماری آنمی همولیتیک خود ایمن در سگهای ارجاعی به کلینیک دانشکده دامپزشکی کرمان

 

فهرست مطالب

 

عنوان                                                                               صفحه

فصل اول:مقدمه و هدف

مقدمه وهدف……………………………………………………………………………………………………………………………2

فصل دوم:کليات

1-2- پادتنها – گیرنده های محلول سول لها ی B……………………………………………………………………………4

1-1-2- ماهیت پادتنها ………………………………………………………………………………………………………………4

2-2-  ایزوتیپهای  ایمنوگلوبولین ها  …………………………………………………………………………………………….6

1-2-2- ایمنوگلوبولین G…………………………………………………………………………………………………………..6

2-2-2- ایمنوگلوبولین M. ………………………………………………………………………………………………………..6

 3-2-2- ایمنوگلوبولین A  ………………………………………………………………………………………………………..7

4-2-2- ایمنوگلوبولین E. …………………………………………………………………………………………………………7

5-2-2-  ایمنوگلوبولین D………………………………………………………………………………………………………..8

3-2- تغییرات  ایمنوگلوبولین ……………………………………………………………………………………………………8

1-3-2- کلاس ( ایزوتیپ)   …………………………………………………………………………………………………….8

2-3-2- آلوتیپ …………………………………………………………………………………………………………………….9

3-3-2- ایدیوتیپ ………………………………………………………………………………………………………………….9

4-2- ایمونوگلوبولین های  سگ و گربه …………………………………………………………………………………….9

5-2-سیستم  مکمل …………………………………………………………………………………………………………………10

1-5-2- مکمل ………………………………………………………………………………………………………………………11

2-5-2-  اجزای  مکمل …………………………………………………………………………………………………………..12

3-5-2- وظایف مکمل  …………………………………………………………………………………………………………..13

4-5-2- نقش مکمل در  تنظیم ایمنی  ………………………………………………………………………………………..13

5-5-2- نقش مکمل در شیمیوتاکسی …………………………………………………………………………………………13

6-5-2-  نقش مکمل  در التهاب ……………………………………………………………………………………………….13

6-2- مجموعه اصلی سازگار تسجی (MHC) ………………………………………………………………………………14

1-6-2- MHC در سگ ………………………………………………………………………………………………………….15

7-2- تنظیم سیستم ایمنی  …………………………………………………………………………………………………………16

8-2-تولرانس ………………………………………………………………………………………………………………………..16

1-8-2-  مکانیسم های تولرانس سلول های T………………………………………………………………………………17

2-8-2- تولرانس سلولهای B ……………………………………………………………………………………………………18

3-8-2-  دوام تولرانس  …………………………………………………………………………………………………………..18

9-2-  خود ایمنی ……………………………………………………………………………………………………………………19

1-9-2- خود ایمنی فیزیولوژیک ………………………………………………………………………………………………20

2-9-2- القای خود ایمنی ………………………………………………………………………………………………………..20

 10-2- نمایان شدن پادگن های مخفی ……………………………………………………………………………………….20

1-10-2- پادگن هایی که در درون یاخته ها یا بافت ها مخفی هستند ……………………………………………….21

2-10-2- پادگن هایی که در اثر تغییر مولکولی ایجاد می شوند ………………………………………………………21

11-2- شباهت مولکولی ………………………………………………………………………………………………………….21

12-2- اختلال در آماده سازی پادگن …………………………………………………………………………………………21

13-2- اختلال در تنظیم …………………………………………………………………………………………………………..22

14-2- ژنتیک بیماری های خود ایمنی ……………………………………………………………………………………….22

15-2- مکانیسم های ایمونولوژیک در بیماریهای با واسطه ایمنی …………………………………………………….23

1-15-2-  افزایش حساسی  تیپ I……………………………………………………………………………………………..24

2-15-2-  افزایش حساسی  تیپ II…………………………………………………………………………………………….25

3-15-2-  افزایش حساسی  تیپ III. …………………………………………………………………………………………26

4-15-2-  افزایش حساسی  تیپ IV…………………………………………………………………………………………..27

16-2- آنتی ژن های  گلبول قرمز ………………………………………………………………………………………………28

17-2- انتقال خون  و موارد ناسازگاری آن ………………………………………………………………………………….29

18-2- بیماری همولیتیک نوزاد …………………………………………………………………………………………………31

19-2- آنتی ژن های گلبول قرمز سگ ……………………………………………………………………………………….32

20-2- آنمی و انواع آن  ………………………………………………………………………………………………………….33

1-20-2-  آنمی حاصل از دست دادن حاد خون (خونریزی) ………………………………………………………….35

2-20-2- آنمی همولیتیک ایجاد شده با عوامل  ریکتزایی و تک یاخته ای خون ………………………………..35

3-20-2- آنمی همراه با عفونت های ویروسی و باکتریایی  ……………………………………………………………36

4-20-2- آنمی همراه با هینزبادی ……………………………………………………………………………………………..37

5-20-2- آنمی همراه با داروها و مواد شیمیایی  …………………………………………………………………………..38

6-20-2- مواد فقر غذایی  ……………………………………………………………………………………………………….39

7-20-2- آنمی در اثر بیمارهای التهابی  ……………………………………………………………………………………..40

8-20-2- آنمی آپلاستیک ………………………………………………………………………………………………………40

9-20-2- آپلازی خالص اریتروئیدی (PRCA) …………………………………………………………………………..41

10-20-2- آنمی همراه با پاسخ های ایمنی  …………………………………………………………………………………41

11-20-2- آنمی همولتیک وابسته به ایمنی (IMHA) …………………………………………………………………..42

21-2- پاتوفیثزیولوژی و ایمنوپاتوژنز  ………………………………………………………………………………………..43

22-2- نشانه های درمانگاهی   …………………………………………………………………………………………………..46

23-2- تشخیص  …………………………………………………………………………………………………………………….47

24-2- آزمایش کومبز …………………………………………………………………………………………………………….47

25-2- درمان  ………………………………………………………………………………………………………………………..48

فصل سوم: مواد و روش کار

 1-3-  مواد و وسایل لازم…………………………………………………………………………………………………………51

1-1-3- جهت خون گیری ………………………………………………………………………………………………………51

2-1-3- جهت آزمایش CBC  ………………………………………………………………………………………………..51

3-1-3- جهت آزمایش بیوشیمیای …………………………………………………………………………………………….51

4-1-3- جهت آزمایش کومبز  …………………………………………………………………………………………………51

2-3- روش خالص سازی ایمنوگلوبولین های سگ ………………………………………………………………………52

1-2-3- اجزای کیت خالص سازی ……………………………………………………………………………………………52

2-2-3- روش انجام خالص سازی  با کیت ………………………………………………………………………………….52

3-3- تهیه بافر فسفات نمکی  (PBS) …………………………………………………………………………………………54

4-3- اندازه گیری غلظت پروتئین با استفاده از دستگاه بیوفتومتر………………………………………………………54

5-3- تهیه آنتی  گلوبولین سگ در خرگوش………………………………………………………………………………..54

1-5-3- ایمن سازی ………………………………………………………………………………………………………………..54

2-5-3- ارزیابی  تیتر سرم با روش الایزا………………………………………………………………………………………55

6-3-  تهیه سوسپانسیون گلبول قرمز  1%  …………………………………………………………………………………….57

7-3- تعیین تیترCut Off ………………………………………………………………………………………………………….57

8-3-  انجام آزمایش کومبز مستقیم  …………………………………………………………………………………………..57

9-3- نمونه گیری……………………………………………………………………………………………………………………58

10-3- آزمایش CBC……………………………………………………………………………………………………………..58

1-10-3- اندازه گیری هموگلوبین (Hb)……………………………………………………………………………………..59

2-10-3- شمارش گلبول های قرمز  (RBC)………………………………………………………………………………..59

3-10-3- شمارش گلبول های سفید  (WBC) …………………………………………………………………………….59

4-10-3-  شمارش تفکیکی گلبول های سفید و بررسی شکل ظاهری گلبول های قرمز ……………………….60

11-3- آزمایش بیوشیمیایی  ……………………………………………………………………………………………………..61

12-3- آنالیز آماری  ……………………………………………………………………………………………………………….61

فصل چهارم:نتايج

1-4- ایمن سازی خرگوش با ایمنوگلوبولین های سگ ………………………………………………………………….63

2-4- نتایج آزمایش کومبز  ………………………………………………………………………………………………………64

3-4- مقایسه پارامترهای خونی ………………………………………………………………………………………………….64

فصل پنجم:بحث ونتيجه گيري

بحث …………………………………………………………………………………………………………………………………….71

 منابع …………………………………………………………………………………………………………………………………….76

فهرست جداول و نمودارها

عنوان                                                                            صفحه

جدول شماره1-2: میزان  ایمنوگلوبولین های سرمس انسان و حیوانات  ……………………………………………….5

نمودار 2-14-2: شکل ساده شده ای از طرز ایجاد بیماریهای خود ایمنی  …………………………………………..23

نمودار1-4: ارزیابی تیتر سرم در محله نهایی خون گیری خرگوش  …………………………………………………..63

نمودار2-4:  مقایسه پارامترهای دو گروه با تست کومبز مثبت و منفی   ………………………………………………64

جدول 1-4: اطلاعات مربوط به سن، جنس، نژاد و عیار پادتنی در 21 بیمار مبتلا  آنمی همولیتیک وابسته  به ایمنی ……………………………………………………………………………………………………………………………………66

جدول 2-4: مقادیر پارامترهای هماتولوژی و بیوشیمیایی اندازه گیری شده مربوط به سگهای مبتلا به آنمی همولیتیک ……………………………………………………………………………………………………………………………..67

جدول3-4: مقایسه فاکتورهای بالینی و کلینیکال پاتولوژی بین دو گروه های کومبز مثبت و منفی……………………………………………………………………………………………………………………………………..69