فهرست مطالب
عنوان صفحه
فصل اول: مقدمه
1-1- پیوندکلیه ………………………………………………………………………………………………………………. |
2 |
1-2- رد پیوند ………………………………………………………………………………………………………………… |
3 |
1-2-1- رد فوق حاد ……………………………………………………………………………………………………… |
3 |
1-2-2- رد حاد …………………………………………………………………………………………………………….. |
4 |
1-2-3- رد مزمن …………………………………………………………………………………………………………… |
4 |
1-3- پیشگیری از رد آلوگرافت ……………………………………………………………………………………… |
5 |
1-4- استرس اکسیداتیو …………………………………………………………………………………………………. |
7 |
1-5- گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) ………………………………………………………………………….. |
8 |
1-6- سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) ……………………………………………………………………………. |
9 |
1-7- هدف ……………………………………………………………………………………………………………………… |
11 |
1-8- فرضیه ……………………………………………………………………………………………………………………. |
11 |
فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده
2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 pro198leu و ارتباط آن با بیماریهای گوناگون …………………………………………………………………………………………………………… |
13 |
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری های گوناگون……………………………………………………………………………………………………………………….. |
14 |
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………….. |
15 |
فصل سوم: مواد و روش انجام کار
3-1- نمونهگیری ………………………………………………………………………………………………………………… |
18 |
3-2- وسایل مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………. |
19 |
3-3- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………….. |
19 |
3-3-1- محلولهای لازم جهت استخراج ……………………………………………………………………… |
19 |
3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ………………………………………………………………. |
20 |
3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ……………………………………………………….. |
20 |
3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده ………………………………….. |
20 |
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ………………. |
21 |
3-4-1- ساخت محلولهای مورد نیاز جهت استخراج ………………………………………………….. |
21 |
3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن …………………………………………………………………. |
21 |
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش PCR-RFLP ……………………………………………………………………… |
21 |
3-5-1- PCR ………………………………………………………………………………………………………………… |
21 |
3-5-2- پرایمرهای مورد استفاده ………………………………………………………………………………….. |
22 |
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ……………………………………………….. |
23 |
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G …………………………………………………….. |
24 |
3-8- الکتروفورز …………………………………………………………………………………………………………………. |
25 |
3-9- رنگآمیزی ژل ………………………………………………………………………………………………………….. |
26 |
3-10- تحلیل آماری ………………………………………………………………………………………………………….. |
27 |
فصل چهارم: نتایج
4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش ………………………………………………………… |
29 |
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه …………………………………………………… |
29 |
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد سالم و بیماران ………………………. |
31 |
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه …………………………………………………………………………………………………………………… |
33 |
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران …………………………….. |
36 |
4-6- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه …………………………………………………………………………………………………………………………… |
38 |
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلیهای GPX1 pro198leu و SOD1 A251G …………. |
40 |
فصل پنجم: بحث و نتیجهگیری
5-1- بحث و نتیجهگیری ……………………………………………………………………………………………………. |
43 |
5-2- پیشنهادات …………………………………………………………………………………………………………………. |
47 |
فهرست منابع ……………………………………………………………………………………………………………………. |
48 |
فهرست جدولها
عنوان صفحه
جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه …………………………………………………………………………….. |
18 |
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ………………………………………………………………………. |
22 |
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ………………………. |
23 |
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ……………………………………………………………………………………………………………….. |
24 |
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ………………………. |
24 |
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G …………………………………………………………………………………………………………………….. |
25 |
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند ………………………………………………………………………… |
30 |
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند …………………………………………………………… |
30 |
جدول 4-3: ارتباط سن در رد پیوند کلیه …………………………………………………………………………. |
31 |
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد سالم و بیمار ……………………………………………………………………………………………………………………………………… |
32 |
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………….. |
32 |
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………. |
33 |
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………… |
34 |
جدول 4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 …………………………….. |
35 |
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار .. |
36 |
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………….. |
37 |
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………… |
38 |
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………….. |
39 |
جدول 4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 …………………………… |
40 |
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در افراد سالم و بیمار …………. |
41 |
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در بیماران دارا و فاقد رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………………………….. |
41 |
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیتهای متفاوت ………………………………………………………………. |
45 |
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیتهای متفاوت ……………………………………………………………. |
46 |
فهرست شکلها
عنوان صفحه
شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیونپراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ……………………………………………………………………………………………………………… |
9 |
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G |
10 |
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز …………………………………………………………………………………………………………………………….. |
26 |
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز …………………………………………………………………………………………………………………………….. |
27 |
