%31تخفیف

بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده

Name: بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلولهای رده سلولی سرطان معده
SKU: 24739
Price: 250000 IRR
Availability: InStock

تعداد 82صفحه در فایل word

کارشناسی ارشد

دانشکده علوم و فناوری‌های نوین گروه بیوتکنولوژی

**بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده**

چکیده:

سرطان معده چهارمین سرطان رایج و دومین علت مرگ‌ومیر مرتبط با سرطان در جهان شناخته‌شده است. آنتی‌اکسیدان‌ها از تخریب سلول‌ها و DNA جلوگیری می‌کنند. بنابراین برای جلوگیری از امراض زیادی از قبیل سرطان، بیماری‌های قلبی، آلزایمر، پیری، پارکینسون و غیره مورد استفاده قرار میگیرند. تحقیقات فیتوشیمیایی نشان می‌دهد که گیاه دارویی کلپوره، دارای ترکیبات مختلفی ازجمله iridoids ، ترپنوئیدها و فلاونوئیدها هستند. این ترکیبات دارای طیف گسترده‌ای از اثرات دارویی ازجمله خواص آنتی‌اکسیدانی و ضد سرطانی هستد. در این مطالعه اثر غلظتهای مختلف عصارهها و اسانس کلپوره، روی سلول‌های سرطانی معده (AGS) مورد بررسی قرار گرفت. از سلول‌های فیبروبلاست (HSkMC) به‌عنوان سلول‌های کنترل و از داروی ضد تکثیر 5FU به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. میزان سمیت سلولی غلظت‌های مختلف عصارههای الکلی و اسانس گیاه کلپوره با استفاده از روش MTT در 24، 48 و 72 ساعت پس از تیمار سلولها، مورد بررسی قرار گرفت. علاوه بر این، اثر عصارهها و اسانس گیاه کلپوره بر توزیع چرخه سلولی با روش فلوسایتومتری بررسی شد. غیر از این، خاصیت آنتی‌اکسیدانی اسانس و عصاره‌های الکلی گیاه کلپوره با روش DPPH و FRAP مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت، ترکیبات موجود در اسانس کلپوره با استفاده از تجزیه و تحلیل GC-MS مشخص شد. نتایج ما نشان داد که، اسانس و عصاره‌های الکلی کلپوره میتواند رشد سلولهای سرطان معده را مهار کند. IC₅₀ اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی کلپوره بعد از 72 ساعت تیمار روی سلولهای سرطانی معده به ترتیب 84/55، 06/74، 61/75 میکروگرم در میلی لیتر تعیین شد. علاوه بر این، تجزیه و تحلیل چرخه سلولی نشان داد که چرخه سلولی سلولهای سرطانی معده در فاز G₁ پس از تیمار توسط اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی کلپوره متوقف میشود. روش آنتی‌اکسیدانی نشان داد که عصاره اتانولی در مقایسه با عصاره متانولی و اسانس کلپوره دارای فعالیت آنتیاکسیدانی بهتری می‌باشد. در نهایت نتایج تجزیه و تحلیل GC-MS نشان داد که اسانس کلپوره دارای ترکیبات زیستی فعال مختلفی است که دارای خواص آنتی اکسیدانی و ضد تکثیر میباشند. در مجموع دادههای ما نشان داد که اسانس و عصارههای الکلی کلپوره دارای خواص ضد سرطانی و آنتی اکسیدانی میباشد و میتواند بهعنوان منبع مهمی برای کشف داروی ضد سرطان استفاده شود.

کلمات کلیدی: گیاه دارویی – کلپوره- ضد سرطان – آنتی‌اکسیدان‌ها – سرطان معده

دسته: زیست شناسی, علوم تجربی برچسب: کلمات کلیدی: گیاه دارویی – کلپوره- ضد سرطان - آنتی‌اکسیدان‌ها - سرطان معده

توضیحات
نظرات (0)

فهرست مطالب

عنوان صفحه

فصل اول………………………………………………………………………………………………………………….1

1-1- مقدمه ……………………………………………………………………………………………………………………………………….2

1-2- گیاهان دارویی…………………………………………………………………………………………………………………………. 3

1-3- تفاوت گیاهان دارویی و داروهای گیاهی………………………………………………………………………………….3

1-4- مواد مؤثره گیاهان دارویی…………………………………………………………………………………………………………4

1-4-1- ترکیب‌های ثانویه……………………………………………………………………………………………………………….4

1-4-1-1- اسانسها ……………………………………………………………………………………………………………………..4

1-4-1-1-1- ترپنها……………………………………………………………………………………………………………………..5

1-4-1-2- ترکیبهای فنولی…………………………………………………………………………………………………………6

1-4-1-2-1- فلاونوئیدها……………………………………………………………………………………………………………….6

1-4-1-3- ترکیبات نیتروژندار……………………………………………………………………………………………………..7

1-4-1-3-1- نقش آلکالوئیدها در گیاه…………………………………………………………………………………………7

1-5- عصاره گیاهی…………………………………………………………………………………………………………………………….8

1-6- رادیکالهای آزاد ………………………………………………………………………………………………………………………9

1-7- آنتی اکسیدان‌ها…………………………………………………………………………………………………………………………9

1-7-1- روش‌های تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی……………………………………………………………………….10

1-7-1-1- روش DPPH …………………………………………………………………………………………………………..10

1-7-1-2- روش FRAP ……………………………………………………………………………………………………………10

1-8- سرطان…………………………………………………………………………………………………………………………………….11

1-8-1- عوامل دخیل در رخدادهای سرطان………………………………………………………………………………12

1-8-2- دسته‌بندی سرطان…………………………………………………………………………………………………………12

1-8-2-1- کارسینوما …………………………………………………………………………………………………………………..12

1-8-2-2- سارکوما………………………………………………………………………………………………………………………13

1-8-2-3- میلوما ………………………………………………………………………………………………………………………..13

1-8-2-4- لوکمیا ………………………………………………………………………………………………………………………..13

1-8-2-5- لیمفوما ……………………………………………………………………………………………………………………..14

1-9- سرطان معده ………………………………………………………………………………………………………………………….14

1-10- روش‌های درمان سرطان …………………………………………………………………………………………………….. 15

1-10-1- شیمی‌درمانی ………………………………………………………………………………………………………………15

1-11- اهمیت و نقش گیاهان در درمان سرطان ……………………………………………………………………………16

1-12- ارزیابی اثرات ضد سرطانی داروها در in vitro ………………………………………………………………….17

1-12-1- روش‌های مولکولی ……………………………………………………………………………………………………..18

1-12-2- روش‌های سلولی………………………………………………………………………………………………………….18

1-13- انواع روش‌های بررسی زنده مانی سلولی …………………………………………………………………………….18

1-13-1- بررسی تمامیت غشا ……………………………………………………………………………………………………18

1-13-2- تشکیل رادیو ایزوتوپ …………………………………………………………………………………………………19

1-13-3- تنفس سلولی و گلیکولیز ……………………………………………………………………………………………19

1-13-4- روش‌های رنگ سنجی ……………………………………………………………………………………………….19

1-14- طرح کلی از این تحقیق ………………………………………………………………………………………………………20

1-15- فرضیات و اهداف تحقیق …………………………………………………………………………………………………….20

فصل دوم ……………………………………………………………………………………………………………..22

2-1- گیاهان خانواده نعناعیان ……………………………………………………………………………………………………….23

2-2- گیاه کلپوره …………………………………………………………………………………………………………………………….23

2-2-1- ویژگی گیاه‌شناسی ………………………………………………………………………………………………………..23

2-2-2- مصارف دارویی ………………………………………………………………………………………………………………23

2-2-3- تحقیقات انجام شده برای خاصیت ضد سرطانی گیاه کلپوره ………………………………………25

2-2-4- تحقیقات انجام شده برای خاصیت ضد اکسیدانی گیاه کلپوره ……………………………………25

فصل سوم ……………………………………………………………………………………………………………27

3-1- مواد مصرفی …………………………………………………………………………………………………………………………..28

3-2- وسایل و دستگاه‌های مورد استفاده ……………………………………………………………………………………….29

3-3- روش‌ها …………………………………………………………………………………………………………………………………..30

3-3-1- عصاره‌گیری با روش سوکسله ……………………………………………………………………………………….30

3-3-2- اسانس گیری با دستگاه کلونجر ……………………………………………………………………………………31

3-3-3- تهیه محیط کشت RPMI برای کشت سلول ……………………………………………………………..31

3-3-4- تهیه محلول بافر فسفات سالین ……………………………………………………………………………………31

3-3-5- تهیه محلول تریپسین-EDTA ……………………………………………………………………………………32

3-3-6- دفریز کردن سلول …………………………………………………………………………………………………………32

3-3-7- فریز کردن سلول …………………………………………………………………………………………………………..32

3-3-8- واکشت سلول‌ها درون میکروپلیت 96 خانه‌ای …………………………………………………………….33

3-3-9- تهیه غلظت‌های موردنیاز از عصاره و اسانس ………………………………………………………………..34

3-3-10- مجاور سازی سلول‌ها با اسانس و عصاره‌های دارویی مورد آزمایش ………………………….35

3-3-11- ارزیابی سمیت سلولی اسانس و عصاره‌ها با استفاده از روش MTT ………………………..35

3-3-12- رنگ‌آمیزی سلول‌ها با هماتوکسیلین …………………………………………………………………………36

3-3-13- بررسی چرخه سلولی و مرگ سلولی با روش فلوسایتومتری و رنگ‌آمیزی PI …………37

3-3-14- فعالیت به دام اندازی رادیکال DPPH ……………………………………………………………………..38

3-3-15- اندازه‌گیری فعالیت آنتی‌اکسیدانی به روش FRAP ………………………………………………….39

3-3-16- جداسازی و شناسایی ترکیبات موجود در اسانس گیاه کلپوره ………………………………….39

3-3-17- آنالیز آماری ………………………………………………………………………………………………………………..40

فصل چهارم ………………………………………………………………………………………………………….41

4-1- نتایج سمیت سلولی اسانس و عصاره‌های گیاه کلپوره با استفاده از روش MTT ……………….42

4-1-1- مهار سلولهای رده‌های سلولی AGS و HSkMC توسط عصاره اتانولی گیاه کلپوره…42

4-1-2- مهار سلولهای رده‌های سلولی AGS و HSkMC توسط عصاره متانولی گیاه کلپوره… ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………44

4-1-3- مهار سلولهای رده‌های سلولی AGS و HSkMC توسط اسانس گیاه کلپوره …………..47

4-1-4- آنالیز آماری …………………………………………………………………………………………………………………..49

4-1-5- IC₅₀ سمیت سلولی عصاره‌ها و اسانس گیاه کلپوره ……………………………………………………52

4-1-6- مرفولوژی سلول‌های AGS و HSkMC قبل و بعد از تیمار با غلظت‌های IC50 عصارهها و اسانس گیاه کلپور………………………………………………………………………………………………………..53

4-2- تأثیر اسانس و عصاره‌های گیاه کلپوره بر توزیع چرخه سلولی سلول‌های AGS ………………..55

4-3- نتایج خاصیت آنتی‌اکسیدانی اسانس و عصاره‌های گیاه کلپوره ……………………………………………56

4-3-1- نتایج خاصیت آنتی‌اکسیدانی از روش DPPH …………………………………………………………….56

4-3-2- IC₅₀ مهار رادیکال آزاد DPPH ، عصاره‌ها و اسانس گیاه کلپوره ………………………………58

4-3-3- نتایج خاصیت آنتی‌اکسیدانی از روش FRAP …………………………………………………………….59

4-3-4- نتایج آنالیز GC-M………………………………………………………………………………………………………..60

فصل پنجم …………………………………………………………………………………………………………..65

5-1- بحث ……………………………………………………………………………………………………………………………………….66

5-2- نتیجهگیری …………………………………………………………………………………………………………………………..71

5-3- پیشنهادها ……………………………………………………………………………………………………………………………..72

پیوست‌ها………………………………………………………………………………………………………………80

فهرست نمودارها

عنوان صفحه

نمودار ‏4‑1. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره اتانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 24 ساعت…………………………………………………………………………………………………….43

نمودار ‏4‑2. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره اتانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 48 ساعت. ………………………………………………………………………………………………….43

نمودار ‏4‑3. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره اتانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 72 ساعت. ………………………………………………………………………………………………….44

نمودار ‏4‑4. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره متانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 24 ساعت. ………………………………………………………………………………………..45

نمودار ‏4‑5. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره متانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 48 ساعت. ……………………………………………………………………………………….46

نمودار ‏4‑6. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به عصاره متانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 72 ساعت. …………………………………………………………………………………………………..46

نمودار ‏4‑7. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به اسانس گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 24 ساعت. ……………………………………………………………………………………………………..47

نمودار ‏4‑8. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به اسانس گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت‌زمان تیمار 48 ساعت. ………………………………………………………………………………………………………48

نمودار ‏4‑9. درصد مهار رشد در غلظت مربوط به اسانس گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS و HSkMC در مدت زمان تیمار 72 ساعت.. …………………………………………………………………………………………………….48

نمودار ‏4‑10. مقایسه میانگین درصد کشندگی اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی گیاه کلپوره روی سلول‌های AGS در مدت زمان 24 ساعت با روش دانکن. ………………………………………………………………………………50

نمودار ‏4‑11. مقایسه میانگین درصد کشندگی اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی گیاه کلپوره روی سلول‌های AGS در مدت زمان 48 ساعت با روش دانکن. ………………………………………………………………………………50

نمودار ‏4‑12. مقایسه میانگین درصد کشندگی اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی گیاه کلپوره روی سلول‌های AGS در مدت زمان 72 ساعت با روش دانکن. ………………………………………………………………………………51

نمودار ‏4‑13. فعالیت مهار رادیکال آزاد DPPH، توسط غلظت‌های مختلف عصاره اتانولی و متانولی گیاه کلپوره. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….57

نمودار ‏4‑14. فعالیت مهار رادیکال آزاد DPPH، توسط غلظت‌های مختلف اسانس گیاه کلپوره…….57

نمودار ‏4‑15. تعیین قدرت آنتی اکسیدانی کاهش آهن، توسط غلظت‌های مختلف عصاره اتانولی و متانولی گیاه کلپوره…………………………………………………………………………………………………………………………………………….59

نمودار ‏4‑16. تعیین قدرت آنتی اکسیدانی کاهش آهن، توسط غلظت‌های مختلف اسانس گیاه کلپوره…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..60

فهرست جدول‌ها

عنوان صفحه

جدول ‏3‑1. مواد مورد نیاز برای این تحقیق………………………………………………………………………………………28

جدول ‏3‑2. وسایل و دستگاه‌های مورد نیاز برای این تحقیق……………………………………………………………..29

جدول ‏3‑3. شرایط بهینه دستگاه GC-MS برای حداکثر جداسازی ترکیبات موجود در اسانس گیاه کلپوره. ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..40

جدول ‏4‑1. جدول تجزیه واریانس اسانس و عصارههای اتانولی و متانولی گیاه کلپوره در مدت زمان تیمار 24 ساعت برای رده سلولی AGS . ………………………………………………………………………………………………………49

جدول ‏4‑2. جدول تجزیه واریانس اسانس و عصارههای اتانولی و متانولی گیاه کلپوره در مدت زمان تیمار 48 ساعت برای رده سلولی AGS . ………………………………………………………………………………………………………49

جدول ‏4‑3. جدول تجزیه واریانس اسانس و عصارههای اتانولی و متانولی گیاه کلپوره در مدت زمان تیمار 72 ساعت برای رده سلولی AGS . ………………………………………………………………………………………………………49

جدول ‏4‑4. IC₅₀ سمیت سلولی اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی AGS در مدت‌زمان تیمار 24، 48، 72. …………………………………………………………………………………………………………52

جدول ‏4‑5. IC₅₀ سمیت سلولی اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی گیاه کلپوره بر روی رده سلولی HSkMC در مدت‌زمان تیمار 24، 48، 72. ……………………………………………………………………………………………………52

جدول ‏4‑6. IC₅₀ مهار رادیکال آزاد DPPH ، توسط عصاره اتانولی، عصاره متانولی، اسانس گیاه کلپوره و آسکوربیک اسید به‌عنوان کنترل مثبت. …………………………………………………………………………………………….58

جدول ‏4‑7. ترکیبات مؤثر شناسایی‌شده در آنالیز GC-MS اسانس گیاه کلپوره……………………………..60

فهرست شکل‌ها

عنوان صفحه

شکل ‏1‑1. واحد ایزوپرن……………………………………………………………………………………………………………………….5

شکل ‏1‑2. ساختار عمومی فلاونوئید…………………………………………………………………………………………………….7

شکل ‏2‑1. بوته گیاه کلپوره………………………………………………………………………………………………………………..24

شکل ‏2‑2. برگ بدون دمبرگ گیاه کلپوره………………………………………………………………………………………….24

شکل ‏2‑3. گل سفید رنگ گیاه کلپوره………………………………………………………………………………………………..24

شکل ‏4‑1. تأثیر اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی کلپوره بر مورفولوژی سلول‌های AGS………53

شکل ‏4‑2. تأثیر اسانس و عصاره‌های اتانولی و متانولی کلپوره بر مورفولوژی سلول‌های HSkMC…54

شکل ‏4‑3. تأثیر عصاره‌های اتانولی و متانولی و اسانس گیاه کلپوره به ترتیب با غلظت 74، 75 و 55 میکروگرم در میلی‌لیتر بر روی توزیع چرخه سلولی در رده سلولی سرطان معده (AGS) …………………………….56

شکل 4-4. طیف ترکیبات بدست آمده از اسانس گیاه کلپوره با روش GC-MS ………………………………64

نقد و بررسی‌ها

هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.

اولین کسی باشید که دیدگاهی می نویسد “بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده ”

بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده

تعداد 82صفحه در فایل word

کارشناسی ارشد

دانشکده علوم و فناوری‌های نوین گروه بیوتکنولوژی

بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده

چکیده:

کلمات کلیدی: گیاه دارویی – کلپوره- ضد سرطان – آنتی‌اکسیدان‌ها – سرطان معده

فهرست مطالب

عنوان صفحه

1-4-1-1- اسانس­ها ……………………………………………………………………………………………………………………..4

1-4-1-1-1- ترپن­ها……………………………………………………………………………………………………………………..5

1-4-1-2- ترکیب­های فنولی…………………………………………………………………………………………………………6

1-4-1-2-1- فلاونوئید­ها……………………………………………………………………………………………………………….6

1-4-1-3- ترکیبات نیتروژن­دار……………………………………………………………………………………………………..7

1-4-1-3-1- نقش آلکالوئید­ها در گیاه…………………………………………………………………………………………7

1-6- رادیکال­های آزاد ………………………………………………………………………………………………………………………9

1-7-1-1- روش DPPH …………………………………………………………………………………………………………..10

1-7-1-2- روش FRAP ……………………………………………………………………………………………………………10

1-8-2-1- کارسینوما …………………………………………………………………………………………………………………..12

1-8-2-3- میلوما ………………………………………………………………………………………………………………………..13

1-8-2-5- لیمفوما ……………………………………………………………………………………………………………………..14

1-10- روش‌های درمان سرطان …………………………………………………………………………………………………….. 15

2-2-4- تحقیقات انجام شده برای خاصیت ضد اکسیدانی گیاه کلپوره ……………………………………25

5-2- نتیجه­گیری …………………………………………………………………………………………………………………………..71

5-3- پیشنهادها ……………………………………………………………………………………………………………………………..72

فهرست نمودارها

عنوان صفحه

فهرست جدول‌ها

عنوان صفحه

فهرست شکل‌ها

عنوان صفحه

**بررسی اثر اسانس و عصارهTeucrium polium، بر روند رشد و تکثیر سلول‌های رده سلولی سرطان معده**

1-4-1-1- اسانسها ……………………………………………………………………………………………………………………..4

1-4-1-1-1- ترپنها……………………………………………………………………………………………………………………..5

1-4-1-2- ترکیبهای فنولی…………………………………………………………………………………………………………6

1-4-1-2-1- فلاونوئیدها……………………………………………………………………………………………………………….6

1-4-1-3- ترکیبات نیتروژندار……………………………………………………………………………………………………..7

1-4-1-3-1- نقش آلکالوئیدها در گیاه…………………………………………………………………………………………7

1-6- رادیکالهای آزاد ………………………………………………………………………………………………………………………9

5-2- نتیجهگیری …………………………………………………………………………………………………………………………..71