بررسي اثر افزايش و کاهش نسبي اسيد آسکوربيک در ناحيه CA1 هيپوکامپ بر يادگيري و حافظه فضايي موش هاي صحرايي نر

                                              

                                               فهرست مطالب

عنوان                                                                                                          صفحه

 

فصل اول: کليات ومروري برمطالعات گذشته

1–1–يادگيري و حافظه………………………. 2

1-1-1 – مراحل تشکيل حافظه…………………. 3

1-2-فراموشي……………………………… 3

1-3- مراكز عصبي مربوط به حافظه و يادگيري……. 4

1-3-1- هيپوکامپ………………………….. 4

1-3-1-1-ناحيه CA1…………………………… 6

1-3-1-1-1-مهارپس خور……………………… 6

1-3-1-1-2-مهار پيش خور……………………. 6

1-3-1-2-هيپوکامپ و نقش آن در يادگيري و حافظه… 7

1-4- تقويت طولاني مدت (LTP)………………… 8

1-5- تضعيف طولاني مدت (LTD)……………….. 11

1-6-يادگيري فضايي……………………….. 12

1-7-اسيد آسكوربيك……………………….. 15

1-7-1-منابع غذايي اسيد آسکوربيک…………… 16

1-7-2- نقش بيوشيميايي و فيزيولوژيك اسيد آسكوربيك 16

1- 7-3-انتقال و جذب اسيدآسکوربيک………….. 16

1-7-3-1- ناقلين اسيد آسکوربيک…………….. 17

1-7-3-1-1- SVCT در مغز…………………… 17

1-7-3-1-2- اثر متقابل نوروترانسميترها و SVCT ها 19

1-7- 4- نقش اسيدآسكوربيك در سيستم عصبي مركزي.. 19

1-7-5- اسيدآسکوربيک و ارتباط آن با يادگيري و حافظه 22

1-8- آسكوربات اكسيداز……………………. 24

1-8-1- فعاليت آسکوربات اکسيداز……………. 25

1-9- ارتباط دوپامين با حافظه و يادگيري…….. 26

1-10- هدف از مطالعه……………………… 28

فصل دوم: مواد و روش ها

 

2-1- موادمورد استفاده…………………….. 30

2-2- دستگاه ها و وسايل……………………. 30

2-3- حيوانات مورد استفاده…………………. 31

2-3-1- گروه هاي مورد آزمايش………………… 32

2-4- روش ها……………………………… 34

2-4-1- روش جراحي و کانول­گذاري دوطرفه ……….. 34

2-4-2- نحوه انجام تزريقات…………………. 38

2-4-2-1-تزريق داخل هيپوکامپي داروها………… 38

2-5-داروها………………………………. 39

2-5-1- اسيدآسكوربيك………………………. 39

2-5-2- آسكوربات اكسيداز…………………… 39

2-6- آزمايشات رفتاري……………………… 40

2-6- 1- آشنائي با سيستم اجرائي…………….. 40

2-6-1-1- ويژگي هاي بخش سخت افزاري………….. 40

2-6-1-2- ويژگي هاي بخش نرم افزاري………….. 40

2-6-2- آشنايي با حوضچه و نحوه انجام آزمايش….. 41

2-6-3- آزمون بلوک چهارم…………………… 42

2-6-4-مقايسه ماز آبي موريس( (MWMبا مازهاي ديگر.. 43

2-7-آزمايشات مربوط به سنجش غلظت اسيد اسکوربيک در هيپوکامپ         44

2-7-1- رسم منحني استاندارد………………… 44

2-7-2- اندازه گيري غلظت اسيد اسکوربيک در هيپوکامپ       44

2-8- روش تجزيه و تحليل داده ها…………….. 45

فصل سوم: نتايج

3-1- بررسي اثر تزريق اسيد آسكوربيك در ناحيه CA1هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس…………… 49

3-1-1- بررسي اثر تزريق اسيد آسكوربيك در ناحيه CA1 هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس در ميانگين بلوک هاييک،دو و سه آزمايش…………………………………. 49

3-1-2- بررسي اثر تزريق اسيدآسكوربيك در ناحيه CA1 هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس در بلوک چهارم آزمايش 55

3-2- بررسي اثر تزريق آسکوربات اکسيداز در ناحيه CA1 هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس…………… 60

3-2-1- بررسي اثر تزريق آسکوربات اکسيداز در ناحيه CA1 هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس در ميانگين بلوک هاي يک، دو و سه آزمايش…………………………………. 60

3-2-2-بررسي اثر تزريق آسکوربات اکسيداز در ناحيه CA1 هيپوكامپ بر پارامترهاي يادگيري

 و حافظه فضايي در ماز آبي موريس در بلوک چهارم آزمايش 64

3-3 -3- بررسي ميزان غلظت اسيدآسکوربيک در هيپوکامپ    69

3-3-1- منحني استاندارد غلظت اسيدآسکوربيک…… 69

3-3-2- بررسيغلظت اسيد اسکوربيک در هيپوکامپ گروه هاي مورد آزمايش…………………………………………………………………………………………. 69

 

فصل چهارم: بحث و نتيجه گيري

4-1- اثرات  اسيد­اسکوربيک بريادگيري و حافظه فضايي 72

4-2- اثر  آسکوربات اكسيداز بريادگيري و حافظه فضايي  78

پيشنهادات………………………………. 81

 

 

 

 

فصل پنجم:

منابع

منابع فارسي…………………………….. 82

منابع انگليسي…………………………… 83

.Abstract……………………………………… 94

فهرست شکل ها

شکل1-2- ساختار هيپوکامپ…………………… 5

شکل1-3- گيرنده ها ي گلوتاماتي در هيپوکامپ…… 9

شکل1-5- مکانيسم فاز اوليه و تأخيري LTP………. 11

شکل1-6- مراحل سنتز اسيد اسکوربيک از گلوکز ……………. 15

شکل1-7- ساختار اسيد آسکوربيک و دهيدرواسيد اسکوربيک  15

شکل1- 8-جذب و متابوليسم آسكوربات در سيستم عصبي مركزي 18

شكل1-9- ساختار سه بعدي آسکوربات اکسيداز……. 24

شكل1- 9  – تاثير دما بر عملAAO…………….. 25

شكل2-1- دستگاه استريو تاکس……………….. 34

شكل 2-2- نحوه تزريق داخل صفاقي……………. 34

شكل 2-3- مراحل مختلف كانول گذاري……………. 36

شكل 2-4-محل CA1 بر اساس اطلس پاكسينوس…………………………. 37

شکل2-5- وسايل تزريق درون مغزي………………………………… 37

شكل 2-6- نحوه انجام تزريقات………………. 38

شكل 2-7- وسايل تنظيم ماز آبي موريس………… 39

شکل 2-7- موش روي سکوي مخفي……………….. 41

شکل2-8-نرم افزارردياب…………………….. 43

شکل2-9- دستگاه ويبريواسلايس…………………. 44

شكل 2-10- موقعيت كانول ها در داخل مغز………….. 45

شكل2-1- محل كانول ها در سطح مغز………………. 45

شکل2-12-محل کانول ها در برش هاي مغزي………. 45

شکل2-13- محل CA1 بر اساس اطلس پاكسينوس…………. 46

فهرست جدول ها و نمودارها

 

جدول 2-1- گروه هاي مورد آزمايش…………….. 33

نمودار 3-1- مقايسه ميانگين مسافت طي شده براي يافتن سكو در ميانگين سه بلوک اول آزمايش

 در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي g/rat)µ 24 و12) اسيدآسكوربيك.   50

نمودار 3-2- نمودار 3-2:مقايسه ميانگين زمان طي شده براي يافتن سكو در ميانگين
سه بلوک اول آزمايش در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي
متفاوتg/rat)µ24 و 12) اسيدآسكوربيك………….. 51

نمودار 3-3: مقايسه ميانگين درصد مسافت طي شده در ربع هدف در ميانگين سه بلوک

  اول آزمايش در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي متفاوتg/rat)µ24 و12) اسيدآسکوربيک…………………………….. 52

نمودار 3-4- نمودار 3-4: مقايسه ميانگين درصد زمان  طي شده در ربع هدف در ميانگين سه بلوک اول آزمايش  در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي g/rat)µ24 و 12) اسيدآسكوربيك………………… 53

نمودار 3-5: مقايسه ميانگين سرعت  طي شده براي يافتن سكو در ميانگين سه بلوک اول آزمايش

 در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي متفاوتg/rat)µ24 و 12) 54

نمودار 3-6- مقايسه ميانگين مسافت طي شده در بلوک چهارم آزمايش در گروه هاي

 شاهد(sham) و دوزهاي g/rat)µ24 و 12) اسيدآسكوربيك 56

نمودار 3-7- مقايسه ميانگين درصد مسافت طي شده در ربع هدف در بلوک چهارم آزمايش

 در گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي متفاوتg/rat)µ24و 12) اسيدآسكوربيك……………………………………….. 57

نمودار 3-8-مقايسه ميانگين درصد زمان طي شده در ربع هدف در بلوک چهارم آزمايش در

 گروه هاي شاهد(sham) و دوزهاي g/rat)µ24 و 12) اسيدآسكوربيك 58

نمودار 3-9- مقايسه ميانگين سرعت طي شده در بلوک چهارم آزمايش در گروه هاي

شاهد(sham) و دوزهاي متفاوتg/rat)µ 24 و 12) اسيدآسكوربيك    59

نمودار3-10-مقايسه ميانگين مسافت طي شده براي يافتن سكو در ميانگين سه بلوک  در

 گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO) و دوزهاي

g/rat)µ0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز……………… 60

نمودار3-11- مقايسه ميانگين زمان طي شده براي يافتن سكو در ميانگين سه بلوک  در

گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO) و دوزهاي

g/rat)µ0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز……………… 61

نمودار 3-12: مقايسه ميانگين درصد مسافت طي شده در ربع هدف براي يافتن سكو در

 ميانگين سه بلوک  در گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال   (I-AO)و

 دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز……….. 62

نمودار 3-13: مقايسه ميانگين درصد زمان طي شده در ربع هدف براي يافتن سكو در ميانگين سه بلوک  در گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO) و دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز  63

نمودار 3-14: مقايسه ميانگين سرعت طي شده در ميانگين سه بلوک  در گروه هايشاهد(sham)،

آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO )و دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز…………………………………. 64

نمودار 3-15: مقايسه ميانگين مسافت طي شده در ميانگين سه بلوک  در گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO )و دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز………………….. 65

نمودار 3-16: مقايسه ميانگين مسافت طي شده در ميانگين سه بلوک  در گروه هاي  شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO )و دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2)

آسکوربات اکسيداز…………………………. 66

نمودار 3-17: مقايسه ميانگين درصد زمان طي شده در ميانگين سه بلوک  در گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال((I-AOو دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز…………………… 67

نمودار 3-18: مقايسه ميانگين درصد زمان طي شده در ميانگين سه بلوک  در گروه هاي شاهد(sham)، آسکوربات اکسيداز غيرفعال(I-AO)و دوزهاي g/rat)µ 0.4 و0.2) آسکوربات اکسيداز…………………… 68

نمودار 3-19: منحني استاندارد غلظت اسيد اسکوربيک 69

نمودار 3-20: مقايسه غلظت اسيد آسکوربيک در هيپوکامپ در گروه هاي کنترلCON))، شاهد(SHAM )، دوزهاي (µg/rat24/0 و 12/0) اسيد آسکوربيک، آسکوربات اکسيداز غيرفعال (I-AO) و آسکوربات اکسيداز با دوزهاي µg/rat)24و12)   70