%46تخفیف

مقايسه روش هاي هيستوپاتولوژي وواکنش زنجيره اي پليمراز در تشخيص موارد طبيعي آدنوماتوز ريوي گوسفند

تعداد75 صفحه در فایل word

دكتراي حرفه اي دامپزشكي

مقايسه روش هاي هيستوپاتولوژي وواکنش زنجيره اي پليمراز در تشخيص موارد طبيعي آدنوماتوز ريوي گوسفند

چكيده

آدنوکارسينوم ريوي گوسفند يك بيماري عفوني واگير است كه توسط ويروسي از خانواده رتروويريده بنام ويروس جايگزيت گوسفندي ايجاد مي شود.اين مطالعه بر روي 42عدد ريه گوسفند نژاد مخلوط که ازنظر ظاهري مشکوک به آدنوماتوز ريوي گوسفند بودند، صورت گرفت. ريه هاي مشکوک ضبط گرديد و پس از بررسي ماکروسکوپيک، نمونه هاي بافتي جهت بررسي هيستوپاتولوژي وآزمايش PCR به ترتيب در فرمالين  بافر 10%ودر دماي 20- نگهداري شدند.DNA با استفاده از کيت استخراج شد و بعد از تهيه مخلوط اصلي با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي شناسايي شدند،نمونه هايي که باند 176 جفت بازي داشتند مثبت در نظر گرفته شدند.

در اين مطالعه از42 مورد ريه مشکوک، 16 مورد ضايعات ميکروسکوپيک آدنوماتوز را داشتند که در آزمايش PCR همان 16 مورد در نمونه هاي بافتي تازه مثبت شناسايي شده و حاوي باند 176 جفت بازي بود، اما در نمونه هاي بافتي پارافيني 15 مورد مثبت شناسايي گرديد. در مطالعه ميکروسکوپي سلول هاي توموري، مکعبي و استوانه اي ، ساختار پاپيلاريياغده اي در داخل آلوئول و برونشيول ايجاد کرده بودند. تعداد زيادي ماکروفاژ آلوئولي در آلوئول نزديک توده هاي توموري مشاهده شد.

با توجه به نتايج بدست آمده روش PCR بر روي بافت هاي تازه مي تواند به عنوان روشي قابل اعتماد مورد استفاده قرار گيرد و روش PCR بر روي قالب هاي پارافيني در صورتي که نمونه ها مدت زمان زيادي در فرمالين نگهداري نشده باشند نيز نتايج قابل اعتمادي را ايجاد مي کند.

کلمات کليدي : آدنوکارسينوم،بتارتروويروس،جايگزيگت.

 

 

مقدمه وهدف………………………………………………………………………………………………………………………….1

فصل دوم: کليات و مروري بر منابع موجود

1-2- تاريخچه بيماري………………………………………………………………………………………………………..5

2-2- اپيدميولوژي……………………………………………………………………………………………………………12

3-2- سبب شناسي…………………………………………………………………………………………………………….13

1-3-2- ساختمان و خصوصيات رتروويروس…………………………………………………………………………14

2-3-2- ساختار ويروسJSRV و ژنوم ويروس………………………………………………………………………15

3-3-2- تروپيسم JSRV…………………………………………………………………………………………………….17

4-2- بيماريزايي……………………………………………………………………………………………………………….18

5-2- انتقال بيماري……………………………………………………………………………………………………………21

6-2- علائم بيماري……………………………………………………………………………………………………………22

 

فهرست

7-2- هيستوپاتولوژي…………………………………………………………………………………………………………23

8-2- تشخيص بيماري……………………………………………………………………………………………………….24

9-2- درمان­بيماري……………………………………………………………………………………………………………25

10-2- پيشگيري و کنترل…………………………………………………………………………………………………..26

فصل سوم: مواد و روش کار

1-3- مواد ووسايل مورد استفاده………………………………………………………………………………………….28

2-3- روش کار………………………………………………………………………………………………………………..29

1-2-3- جمع آوري نمونه………………………………………………………………………………………………….29

2-2-3- تهيه اسلايدهاي هيستوپاتولوژي……………………………………………………………………………….30

3-2-3- استخراجDNA ……………………………………………………………………………………………………30

4-2-3- آزمايش PCR جهت شناساييDNA رتروويروس……………………………………………………….31

5-2-3- الکتروفورز و آناليز محصولات PCR……………………………………………………………………….33

 

فهرست

 

فصل چهارم: نتايج

1-4- نتايج هيستوپاتولوژي………………………………………………………………………………………………… 37

2-4- نتايج PCR بر روي بافت تازه………………………………………………………………………………………39

3-4- نتايج PCR بر روي قالب هاي پارافيني………………………………………………………………………….40

فصل پنجم: بحث و نتيجه گيري

بحث ………………………………………………………………………………………………………………………………42

نتيجه گيري………………………………………………………………………………………………………………………50

پيشنهادات………………………………………………………………………………………………………………………..51

منابع……………………………………………………………………………………………………………………………….52

چکيده انگليسي………………………………………………………………………………………………………………..61

                                   

 

فهرست جداول

جدول1-3- پرايمرهاي اختصاصي PI  و PII جهت شناسايي ناحيه U3……………………………………….32

جدول1-4- نتايج حاصل از انجام آزمايشات هيستوپاتولوژي و PCR بر روي قالب هاي پارافيني و

بافت تازه  تهيه شده از موارد مشکوک به آدنوماتوز ريوي گوسفند……………………………………………39

 

فهرست تصاوير

تصوير1-2- شکل شماتيک رتروويروس……………………………………………………………………………….15

تصوير2-2- شکل شماتيک ژنوم رتروويروس جايگزيکت گوسفند…………………………………………..16

تصوير1-4- شکل ماکروسکوپيک ريه مبتلا به آدنوکارسينوم ريوي گوسفند……………………………….37

تصوير2-4-الگوي رشد پاپيلاري، رشد سلول هاي توموري استوانه اي در برونشيول (رنگ

آميزي هماتوکسيلين-ائوزين)………………………………………………………………………………………………38

تصوير3-4- نتيجه حاصل از انجام PCR  بر روي  بافت تازه………………………………………………………39

تصوير 4-4-  نتيجه حاصل از انجام PCR بر روي قالب هاي پارافيني………………………………………….40

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo