مطالعه تغييرات آپوپتوتيك سلول هاي سرطاني سينه موش هاي صحرايي ماده تحت تاثير عصاره هيدروالكلي مريم گلي

مطالب فهرست

عنوان                                                                                                              صفحه

فصل 1: مقدمه                                                                                                        1    1   1 – 1 – مفهوم سرطان……………………………………………………………………………………………………………2             2– 2 – آمار سرطان…………………………………………………………………………………………………………………3                                         1 – 3 – سرطان پستان…………………………………………………………………………………………………………..4                                             1 – 4 – گیاهان دارویی و سرطان………………………………………………………………………………………….5                                                    1 – 4 – 1 – گیاه مریم گلی…………………………………………………………………………………………………..5                                              1 – 4 – 2 – مشخصات گیاه شناسی…………………………………………………………………………………….6                                         1 – 4 – 3 – خواص و کاربرد گیاه مریم گلی………………………………………………………………………..7                                      1 – 4 – 4 – ترکیبات شیمیایی…………………………………………………………………………………………….8                                                    1 – 5 – اهداف تحقیق……………………………………………………………………………………………………………9

فصل 2: مروری بر تحقیقات پیشین                                                                        10                                                  2- 1 – برخی از تحقیقات صورت گرفته بر مریم گلی…………………………………………………………11                                                2 – 2 – اثرات آپوپتوزی مریم گلی………………………………………………………………………………………11                                                     2 – 3 – اثرات ضد جهش زایی مریم گلی……………………………………………………………………………12                                                2 – 4 – اثرات ضد رگ زایی مریم گلی………………………………………………………………………………..12                                           2 – 5 – اثرات ضد سرطان مریم گلی………………………………………………………………………………….13

فصل 3: وسایل، مواد و روش کار                                                                           15                                                  3 – 1 – مواد………………………………………………………………………………………………………………………..16                                                 3 – 2 – وسایل…………………………………………………………………………………………………………………….17                                                 3 – 3 – روش کار………………………………………………………………………………………………………………..19                                                 3 – 3 – 1 – حیوانات مورد آزمایش…………………………………………………………………………………..19                                          3 – 3 – 2 – گروه بندی حیوانات……………………………………………………………………………………..20                                            3 – 3 – 3 – تهیه داروی سرطان زا………………………………………………………………………………….21                                            3 – 3 – 4 – تهیه گیاه مریم گلی…………………………………………………………………………………….23                                            3 – 3 – 5 – روش تجویز عصاره………………………………………………………………………………………26                                             3 – 3 – 6 – تهیه گسترش از کل غده پستانی……………………………………………………………….27                                           3 – 3 – 7 – تهیه مقاطع بافتی………………………………………………………………………………………32                                               3 – 3 – 8 – مراحل آماده سازی نمونه ها جهت روش TUNEL (Terminal   deoxynucleotidyl transferase x-dUTP nick end labeling)…………………………………..35                                           3 – 3 – 9 – تجزیه و تحلیل داده ها………………………………………………………………………………39

فصل 4:                                                                                                             40                                                   4 – 1 – درصد بقا و مرگ و میر موش های صحرایی تیمار شده با DMBA……………….41                                            4 – 2 – بررسی تومور های ایجاد شده در موش های صحرایی تیمار شده با DMBA                                                        ……………………………………………………………………………………………………………………………………………42                                                 4 – 3 – بررسی تغییرات وزنی حیوانات…………………………………………………………………………..44                                           4 – 4 – مقایسه گسترش های غده پستان در گروه تیمار با عصاره هیدروالکلی مریم                                                               گلی……………………………………………………………………………………………………………………………………..46                                             4 – 5 – مقایسه گسترش های غده پستان در گروه القا سرطان پستان با DMBA..                                                                               ……………………………………………………………………………………………………………………………………………48                                                             4 – 6 – مقایسه گسترش های غده پستان در گروه کنترل القا سرطان پستان با                                                                            DMBA و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی………………………….52                                                  4 – 7 – مقایسه گروه تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی باگروه القا سرطان                              تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی………………………………………………………………………56                4 – 8 – بررسی نتایج حاصل از روش رنگ آمیزی با TUNEL (Terminal       deoxynucleotidyl transferase x- dutp nick end labeling)…………………………………..60

فصل 5 : بحث و نتیجه گیری                                                                             62                                               5 – 1 – تفسیر نتایج حاصل از گسترش کل غده پستانی در گروه تیمار با عصاره                      هیدروالکلی مریم گلی……………………………………………………………………………………………………….63                                           5 – 2 –  تفسیر نتایج حاصل از گسترش کل غده پستانی در گروه های القا سرطان                         با DMBA…………………………………………………………………………………………………………………………65                                                    5 – 3 – تفسیر نتایج حاصل از گسترش غده پستانی در گروه کنترل القا سرطان                         با DMBA و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی…………………….66                            5 – 4 – تفسیر نتایج حاصل از گسترش کل غده پستانی گروه تیمار شده با عصاره                     هیدروالکلی مریم گلی با گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی                                             …………………………………………………………………………………………………………………………………………..67                                            5 – 5 – تفسیر نتایج حاصل از مشاهده سلول های آپوپتوتیک در تومورهای پستان                  در موش های سرطانی گروه کنترل و تیمار با عصاره………………………………………………………68                                        5 – 6 – نتیجه گیری………………………………………………………………………………………………………70                                        5 – 7 – پیشنهادات برای مطالعات آینده……………………………………………………………………….71                                                      5 – 8 – فهرست منابع و ماخذ……………………………………………………………………………………….72

فهرست اشکال

عنوان                                                                                                    صفحه

شکل (1 – 3) گیاه مریم گلی……………………………………………………………………………………..7                                                                              شکل (3 –1)  (A اتاق حیوانات  B ) غذای موش صحرایی…………………………………..20                                          شکل (3 – 2) داروی سرطان زا و حلال آن……………………………………………………………..22                                                     شکل (3 – 3) 7 و 12 دي متيل بنز آنتراسین…………………………………………………………23                                                            شکل (3 – 4) برگ های خشک گیاه مریم گلی……………………………………………………….24                                                                          شکل (3- 5) دستگاه های عصاره گیری…………………………………………………………………..25                                                           شکل (3 – 6) عصاره هیدروالکلی مریم گلی……………………………………………………………26                                                            شکل (3 – 7) روش تجویز عصاره…………………………………………………………………………….27                                               شکل (3 – 8) تشریح موش صحرایی برای تهیه گسترش کل غده پستانی B )                  گسترش کل غده پستانی بر روی لام………………………………………………………………………..28                                               شکل (3 – 9) مراحل رنگ آمیزی گسترش کل غده پستانی………………………………….29                                                                     شکل (3 – 10) گسترش کل غده پستانی موش های صحرایی زیر میکروسکوپ                            نوری………………………………………………………………………………………………………………………….31                                                شکل (4 – 1) درصد بقا و مرگ و میر موش های صحرایی تیمار شده با DMBA..41                                                  شکل (4 – 2) تومور خارجی در ناحیه بازویی موش صحرایی………………………………..42                                                شکل (4 – 3) مقاطع توموری رنگ آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین……………43                                           شکل (4 – 4) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گسترش کل غده پستان در گروه تیمارشده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی در               مقایسه با گروه کنترل……………………………………………………………………………………………..47                                           شکل (4 – 5) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه کنترل القا سرطان با DMBA و آب مقطر………………………………………………..51                                           شکل (4 – 6) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه کنترل القا سرطان با DMBA و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدرو                                           الکلی مریم گلی………………………………………………………………………………………………………..55                                         شکل (4 – 7) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه تیمار با عصاره هیدروالکلی مریم گلی و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره                                          هیدروالکلی مریم گلی………………………………………………………………………………………………59                                         شکل (4 – 8) مقایسه شدت رنگ پذیری سلول های توموری پستان موش های                       صحرایی در روش رنگ آمیزی TUNEL…………………………………………………………………60                                          شکل (4 – 9) مقایسه شدت رنگ پذیری سلول های توموری پستان موش های                       صحرایی در روش رنگ آمیزی TUNEL………………………………………………………………….61                                           شکل (4 – 10) مقایسه شدت رنگ پذیری سلول های توموری پستان موش های                       صحرایی در روش رنگ آمیزی TUNEL………………………………………………………………….61

فهرست جداول

عنوان و شماره                                                                              صفحه

جدول (4 – 1) میانگین وزن و اختلاف وزن ابتدا و انتهای آزمایش در گروه های                  کنترل و تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی…………………………………………………44                                           جدول (4 – 2) میانگین وزن و اختلاف وزن ابتدا و انتهای آزمایش در گروه کنترل                                              القا سرطان با DMBA و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی                                           …………………………………………………………………………………………………………………………………….45                                          جدول (4 – 3) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گسترش کل غده پستان در گروه تیمارشده با عصاره هیدروالکلی مریم گلی در               مقایسه با گروه کنترل…………………………………………………………………………………………………47                                         جدول (4 – 4) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه کنترل القا سرطان با DMBA و آب مقطر………………………………………………….50                                          جدول (4 – 5) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه کنترل القا سرطان با DMBA و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره هیدرو                                           الکلی مریم گلی………………………………………………………………………………………………………….54                                         جدول (4 – 6) مقایسه میزان تغییرات جوانه های آلوئولی و لوبول های غده پستانی                                            در گروه تیمار با عصاره هیدروالکلی مریم گلی و گروه القا سرطان تیمار شده با عصاره                                          هیدروالکلی مریم گلی………………………………………………………………………………………………..58