%34تخفیف

لگوی نواری آنزیم­های پراکسیداز و کاتالاز در ژنوتیپ­های لوبیا تحت تنش کمبود آب و رابطه آن با برخی صفات کیفی و فیزیولوژیکی

تعداد 115صفحه در فایل word

گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی

کارشناسی ارشد در رشته اصلاح نباتات

الگوی نواری آنزیم­های پراکسیداز و کاتالاز در ژنوتیپ­های لوبیا

تحت تنش کمبود آب و رابطه آن با برخی صفات کیفی و فیزیولوژیکی

چکيده:

به منظور ارزیابی تنش کمبود آب در فعالیت آنزیم­های آنتی­اکسیدان و برخی صفات کیفی و فیزیولوژیکی، دو آزمایش جداگانه در سال زراعی 1391 بر پایه طرح بلوک­های کامل تصادفی در 3 تکرار اجرا شد. یک آزمایش با آبیاری عادی (هر 5 روز یکبار) و آزمایش دیگر در شرایط کمبود آب (هر 10 روز یکبار) پیاده شد. در هر دو آزمایش 11 ژنوتیپ از هرکدام از سه نوع لوبیا یعنی سفید، چیتی و قرمز به همراه سه رقم اصلاح شده اختر، دهقان و D81083 مورد مطالعه قرار گرفت. صفات کیفی مورد مطالعه عبارت بود از: تیپ رشدی، خوابیدگی بوته، رنگ کلروفیل برگ، پایایی برگ، محل نیام در بوته و شکل دانه ( بر اساس دستورالعمل IPGRI). صفات فیزیولوژیک شامل: درصد آب نسبی (RWC) و مقاومت روزنه بود که در همه واحدهای آزمایشی مورد مطالعه قرار گرفتند. همچنین، فعالیت آنزیم­های آنتی­اکسیدان کاتالاز (CAT) و پراکسیداز (POX) در نمونه برگی حداقل سه گیاه از مزرعه جمع­آوری و با الکتروفورز با ژل آکریل­آمید افقی 8% مورد مطالعه قرار گرفت. برای صفات کیفی تنوع درون ژنوتیپی مشاهده نشد. برای آنزیم آنتی­اکسیدان پراکسیداز سه ایزوزیم بدون ابهام و برای آنزیم CAT یک فرم مونومرف مشاهده شد. تجزیه واریانس داده­های مربوط به RWC و مقاومت روزنه و نیز برای فعالیت ایزوزیم­های مورد مطالعه بین ژنوتیپ­های درون هر رنگ از لوبیاها و در کل ژنوتیپ­ها در هر دو شرایط آبیاری عادی و تحت تنش کمبود آب اختلاف معنی­دار مشاهده شد ( 1%< P) که بیانگر وجود تنوع ژنتیکی بالا در لوبیا می­باشد.  ژنوتيپ­های لوبیا سفید و چیتی در شرایط کمبود آب مناسبتر از لوبیا قرمز تشخیص داده شدند. ژنوتیپ­های 24و 25 بیشترین فعالیت دانسیومتریک CAT، ژنوتیپ­­ 7 و 10 برای فعاليت ایزوزیم­ POX1 ، ژنوتیپ 27و 28 برای POX2 و ژنوتیپ 30و 35 برای POX3 از میانگین بالاتری برخوردار بودند. در هر دو  شرايط آبیاری آنزیم CAT با ایزوزیم POX1 همبستگی مثبت و معنی­دار نشان داد. در شرایط آبیاری عادی بیشترین ضریب همبستگی  مثبت و معنی­دار،  POX1با POX2، و در بین صفات کیفی به خوابیدگی بوته با تیپ رشدی و رنگ دانه و در تحت تنش کمبود آب به ایزوزیم POX2 با POX3، تیپ رشدی با پایایی برگ و خوابیدگی، مربوط بود. در هر دو شرایط مقاومت روزنه با RWC همبستگی مثبت و معنی­داری نشان داد. در شرایط آبیاری عادی آنزیم CAT و POX3 با مقاومت روزنه همبستگی منفی و معنی­دار و در شرایط تحت تنش کمبود آب فعالیت آنزیم CAT با RWC همبستگی منفی و معنی­دار و ایزوزیم POX1 با RWC همبستگی معنی­دار نشان داد. نتایج خوشه بندی ژنوتیپ­های مورد مطالعه براساس صفات فیزیولوژیک و کیفی و فعالیت­های آنریم­های آنتی­اکسیدان با همدیگر هماهنگی نشان نداند.

کلمات کليدي: لوبيا، تنش خشکي، پراکسيداز، کاتالاز، الکتروفورز

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                           صفحه

مقدمه ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

3

فصل اول: بررسی منابع

1-1 تاریخچه ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..        7

2-1 گیاه شناسی ………………………………………………………………………………………………………………………………………….        7

3-1 خشکی ………………………………………………………………………………………………………………………………………………         8

1-3-1 مفهوم خشکی …………………………………………………………………………………………………………………………………         8

2-3-1 مفهوم مقاومت به خشکی ………………………………………………………………………………………………………………….        9

4-1 تنش …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..       10

1-4-1 مفهوم تنش …………………………………………………………………………………………………………………………………….       10

2-4-1 تنش خشکی …………………………………………………………………………………………………………………………………..       11

5-1 ویژگی­های فیزیولوژیکی و صفات کیفی …………………………………………………………………………………………………       12

1-5-1  مقدار آب نسبی برگ  ……………………………………………………………………………………………………………………        12

2-5-1 مقاومت روزنه …………………………………………………………………………………………………………………………………       12

3-5-1 شکل دانه ………………………………………………………………………………………………………………………………………..      14

4-5-1 عادت رشدی …………………………………………………………………………………………………………………………………..      14

6-1 ایزوزیم­ها …………………………………………………………………………………………………………………………………………….      15

7-1 گونه­های فعال اکسیژن……………………………………………………………………………………………………………………………      15

8-1 تولید گونه­های فعال اکسیژن تحت تنش خشکی …………………………………………………………………………………………    16

9-1 مروری بر تحقیقات گذشته ……………………………………………………………………………………………………………………..     17

10-1 اهداف پژوهش ……………………………………………………………………………………………………………………………………     19

عنوان                                                                                                                           صفحه

فصل دوم: مواد و روش‌ها

1-2 مواد گیاهی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..   21

2-2 آزمایش مزرعه­ای ……………………………………………………………………………………………………………………………………..   22

1-2-2 صفات کیفی مورد اندازه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………..   22

2-2-2  صفات فیزیولوژیکی …………………………………………………………………………………………………………………………..    23

1-2-2-2 درصد آب نسبی برگ………………………………………………………………………………………………………………………..   23

2-2-2-2 مقاومت روزنه­ای …………………………………………………………………………………………………………………………….    24

3-2 تجزیه­های آنزیمی ………………………………………………………………………………………………………………………………….     24

1-3-2  بافت مورد استفاده برای بررسی آنزیم­ها ……………………………………………………………………………………………..      24

2-3-2 استخراج آنزیم ………………………………………………………………………………………………………………………………..       24

3-3-2 تهیه ژل­های افقی 8 درصد ………………………………………………………………………………………………………………………       25

4-3-2 الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………………………………      25

4-2 رنگ­آمیزی آنزیم­ها ………………………………………………………………………………………………………………………………..      27

1-4-2 رنگ آميزي پراكسيداز ………….………………………………………………………………………………………………………….       28

2-4-2 رنگ آميزي كاتالاز …………………………………………………………………………………………………………………………        28

5-2 کمی­ سازی فعالیت آنزیم­های آنتی اکسیدان و نامگذاری ایزوزیم­ها …………………………………………………………..        28

6-2 تجزیه و تحلیل داده­ها­ …………………………………………………………………………………………………………………………        29

فصل سوم: نتايج و بحث

1-3 تجزیه واریانس و مقایسه میانگین صفات فیزیولوژیکی و کیفی …………………………………………………………………..      32

1-1-3 تجزیه واریانس و مقایسه میانگین صفات فیزیولوژیکی در شرایط آبیاری عادی در کل ژنوتیپ­ها………………..       32

2-1-3 تجزیه واریانس و مقایسه میانگین صفات فیزیولوژیکی در شرایط کمبود آب در کل ژنوتیپ­ها………………….        33

2-3 همبستگی ساده صفات کیفی و صفات فیزیولوژیکی در شرایط آبیاری عادی در کل ژنوتیپ­ها………………………..       39

3-3 همبستگی ساده صفات کیفی و صفات فیزیولوژیکی در شرایط کمبود آب در کل ژنوتیپ­ها…………………………..       39

4-3 تجزیه خوشه­ای بر اساس صفات فیزیولوژیکی ………………………………………………………………………………………..       41

1-4-3 تجزیه خوشه­ای تحت شرایط آبیاری عادی ………………………………………………………………………………………..        41

2-4-3 تجزیه خوشه­ای تحت شرایط تنش کمبود آب …………………………………………………………………………………..         42

5-3 درصد افزایش یا کاهش صفات فیزیولوژیکی تحت تنش کمبود آب به تفکیک رنگ …………………………………          45

6-3 درصد افزایش یا کاهش صفات فیزیولوژیکی تحت تنش کمبود آب در 36 ژنوتیپ لوبیا …………………………..          46

7-3 بررسی میزان تنوع صفات کیفی ………………………………………………………………………………………………………….          48

8-3 بررسی میزان تنوع صفات کیفی در 36 ژنوتیپ ………………………………………………………………………………………        48

9-3 تجزیه واریانس و مقایسه میانگین فعالیت آنزیم­های آنتی­اکسیدان در 36 ژنوتیپ در شرایط آبیاری عادی………..        49

10-3 تجزیه واریانس و مقایسه میانگین فعالیت آنزیم­های آنتی­اکسیدان در 36 ژنوتیپ در تنش کمبود آب …………….       54

11-3 همبستگی آنزیم­ها در 36 ژنوتیپ در شرایط آبیاری عادی ………………………………………………………………………..      57

12-3 همبستگی آنزیم­ها در 36ژنوتیپ در شرایط تحت تنش کمبود آب ……………………………………………………………       57

13-3 ارتباط آنزیم­های آنتی­اکسیدان در ژنوتیپ­های لوبیا با صفات فیزیولوژیکی درشرایط آبیاری عادی…………………       58

14-3 ارتباط آنزیم­های آنتی­اکسیدان در ژنوتیپ­های لوبیا با صفات فیزیولوژیکی تحت تنش کمبود……………………..         59

15-3 تجزیه خوشه­ای فعالیت آنریم­های آنتی اکسیدان در 36 ژنوتیپ لوبیا در شرایط آبیاری عادی………………………        64

16-3 تجزیه خوشه­ای فعالیت آنریم­های آنتی اکسیدان در 36 ژنوتیپ لوبیا در تنش کمبود آب……………………………..       65

17-3 درصد افزایش یا کاهش فعالیت آنزیمی تحت تنش کمبود آب به تفکیک رنگ ………………………………………          69

18-3 درصد افزایش یا کاهش فعالیت آنزیمی در 36 ژنوتیپ ………………………………………………………………………           70

19-3 نتیجه گیری کلی …………………………………………………………………………………………………………………………….          78

پیشنهادات ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….         81

منابع مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………………………………………….         83

عنوان                                                                                                                           صفحه

ضمیمه ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….        97

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo