غربالگری نمونه¬های خاک از نظر اکتینومیست ¬های تولید کننده¬ی آنتی ¬بیوتیک در استان ایلام

تعداد 60صفحه در فایل word

چکیده

زمینه و هدف: مقاومت سریع باکتری­های بیماری زا به آنتی بیوتیک ها، بخصوص مقاومت باکتری ها نسبت به چندین آنتی بیوتیک باعث شده که این مواد از حیطه درمان خارج شوند، که جهت فائق آمدن به این مقاومت نیاز به آنتی بیوتیک­های جدید است. اکتینومیست­ها همواره به عنوان یک منبع اصلی تولید کننده آنتی بیوتیک­های جدید و متابولیت­های ثانویه متنوع، در داروسازی مورد توجه بوده اند. هدف از این تحقیق جداسازی اکتینومیست­های تولید کننده آنتی بیوتیک از خاک­های استان ایلام و بررسی خاصیت ضد میکروبی آن­ها می باشد.

مواد و روش ها: 20 نمونه خاک از عمق 6 تا 02 سانتی متری زمین از مناطق مختلف استان ایلام جمع آوری شدند. نمونه­ها رقیق شدند و برای جداسازی اکتینومیست­ها در محیط کشت استارچ کازئین آگار (SCA) کشت داده شدند. سپس توسط روش­های مورفولوژی، بیوشیمیایی و میکروسکوپی، شناسایی شدند. غربالگری اولیه جهت یافتن جدایه­های فعال با روش Cross streak انجام شد. متابولیت­های تولید شده، استخراج شدند و بررسی فعالیت آن­ها علیه باکتری­های بیماری­زای استافیلوکوکوس اورئوس، کلبسیلا پنومونیه، اشریشیا کلای، پسودوموناس آئروژینوزا با استفاده از روش انتشار در دیسک انجام شد. برای ایزوله­ای که بهترین اثر ضد باکتریایی را داشت PCR با استفاده از پرایمر SrDNA16  انجام شد.

یافته ها: از بین 20 نمونه خاک، تعداد 56 ایزوله اکتینومیست جداسازی و شناسایی شدند. در غربالگری اولیه 4 ایزوله فعالیت ضد باکتریایی  نشان دادند که از این تعداد 1 ایزوله  در غربالگری ثانویه فعال بود. نتایج مرحله دوم غربالگری نشان داد که ایزوله فعال به دست آمده بر علیه باکتری­های استافیلوکوکوس اورئوس، اشریشیاکلای و کلبسیلا پنومونیه با ناحیه بازدارندگی بیش­تر از 10 میلی متر فعالیت قوی داشته است.

نتیجه: نتایج این تحقیق نشان می­دهد خاک­های مناطق مختلف ایلام غنی از اکتینومیست­های فعال تولید کننده ترکیبات ضد باکتریایی جدید است، که نیازمند شناسایی و خالص سازی آن می باشد.

 واژگان کلیدی: اکتینومیست­ها، خاک، فعالیت ضد میکروبی