%37تخفیف

دانلود پروژه:جداسازی و شناسایی آمینو اسیدها و پپتیدها با استفاده از نانوذرات مغناطیسی اکسید آهن

تعداد 101 صفحه این فایل word

چکیده

مطالعه پپتیدها از نمونه‌های زیستی پیچیده، دچار چالش فنی برای ارائه روشی جامع برای تجزیه و تحلیل آن‌ها است.   جداسازی گزینشی به عنوان یک مقوله مهم در سنجش و جداسازی مولکول‌ها و یون‌ها شناخته شده است. وجود جاذبی با ظرفیت جذب بالا و گزینش‌پذیری خوب، نقش مهمی در جداسازی ایفا می‌کند. نانو ذرات مغناطیسی آهن به دلیل جداسازی آسان و قدرت جذب بالا، به عنوان یک جاذب موثر در نظر گرفته شده است.

هدف  از این پروژه، ارائه روشی آسان، سریع و با نیاز کمتر به دستگاه​های پیشرفته برای جداسازی و شناسایی آمینو اسیدها و پپتیدها با استفاده از نانوذرات مغناطیسی اکسید آهن می‌باشد. با توجه به این‌که نانو ذرات در بسیاری از زمینه‌ها کاربرد بسیار پیدا نموده‌اند، در نتیجه استفاده از این نانو ذرات در جداسازی و شناسایی آمینو اسیدها و پپتیدها و پروتئین‌ها می‌تواند کمک به‌سزایی در تشخیص و جداسازی پروتئین‌ها بنماید. برای این منظور، در این پروژه ابتدا نانوذرات مغناطیسی اکسید آهن به روش هم‌رسوبی با اندازه ذرات 11 نانومتر تهیه شد و با استفاده از آنالیزهای FT-IR، XRD و SEM شناسایی گردید. سپس تعدادی آمینو اسیدها نظیر فنیل آلانین و تریپتفان جداسازی شده و با استفاده از جذب UV-Vis شناسایی و اندازه‌گیری گردید. در ادامه، این روش برای پپتید گلوتاتیون گسترش یافت و معلوم شد که برای جداسازی و شناسایی پپتیدها قابل تعمیم است.

کلمات کلیدی: نانو ذرات مغناطیسی، پپتیدها، جداسازی مغناطیسی

 

فصل اول: نانو تکنولوژی و اهمیت آن………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 1

1-1-مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 1

1-1-1-تعریف نانو………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 1

1-1-2-اهمیت فن​آوری نانو………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 2

1-2-خواص نانو مواد………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 3

1-3-انواع نانو مواد………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 4

1-3-1-دسته‌بندی نانو ذرات بر اساس ابعاد………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 4

1-3-1-2-ذرات دو بعدی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 4

1-3-1-3-ذرات سه بعدی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 5

1-3-1-3-1-فلورن​ها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 5

1-3-1-3-2-دندریمرها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 5

1-3-1-3-3-نقاط کوانتومی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 5

1-3-2-دسته‌بندی نانو ذرات بر اساس ترکیبات سازنده………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 6

1-4-روش‌های تهیه نانو مواد……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 6

1-5-نانو ذرات مغناطیسی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 7

1-5-1-مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 7

1-5-2-تعریف نانو ذرات مغناطیسی………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 8

1-5-3-خواص نانو ذرات مغناطیسی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 8

1-5-4-انواع نانو ذرات مغناطیسی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 9

1-6-روش​های تولید نانو ذرات اکسید آهن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 9

1-6-1-روش سل-ژل………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 9

1-6-2-روش مایسل وارونه………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 10

1-6-3-روش تجزیه حرارتی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 11

1-6-4-تهیه هیدروترمال…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 12

1-6-5-روش​های آئروسل/بخار……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 13

1-6-6-واکنش​های دمای بالا…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 13

1-6-7-تهیه در مایعات یونی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 13

1-6-8-هم​رسوبی یا ترسیب شیمیایی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 14

1-7-روش​های شناسایی نانو ساختارها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 16

1-7-1-پراکندگی اشعه ایکس(XRD)……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 16

1-7-2-میکروسکوپ الکترونی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 18

فصل دوم:  آمینو اسیدها وپپتیدها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 19

2-1-آمینو اسیدها………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 19

2-1-1-تعریف آمینو اسید………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 19

2-1-2-تاریخچه آمینو اسیدها………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 21

2-1-3-ساختار عمومی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 22

2-1-3-1-ایزومری…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 23

2-1-3-2-یون دوقطبی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 24

2-1-3-3-نقطه ایزوالکتریک……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 24

2-1-4-دسته‌بندی آمینو اسیدها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 25

2-2-پپتیدها………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 26

2-2-1-دسته​بندی پپتیدها:………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 27

2-2-1-1-پپتید شیر……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 28

2-2-1-2-پپتیدهای ریبوزومی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 28

2-2-1-3-پپتیدهای غیرریبوزومی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 28

2-2-1-4-پپتن……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 29

2-2-1-5-قطعه های پپتیدی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 29

2-2-2-سنتز پپتیدها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 30

2-2-2-1-روش​های سنتز………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 31

2-2-2-1-1-سنتز فاز مایع………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 31

2-2-2-1-2-سنتز فاز جامد………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 31

2-2-2-1-1-1-انواع بسترهای جامد:……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 32

2-2-3-روش​های جداسازی و شناسایی پپتیدها:……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 33

2-2-3-1-روش​های دستگاهی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 33

2-2-3-1-1-کروماتوگرافی جذبی………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 35

2-2-3-1-2-روش​های کروماتوگرافی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 36

2-2-3-1-3-تمرکز ایزوالکتریک…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 36

2-2-3-1-4-انگشت نگاری جرم پپتید……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 37

2-2-3-1-روش​های غیر دستگاهی:………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 39

2-2-3-1-1-جداسازی و شناسایی مغناطیسی پپتیدها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 41

فصل سوم: تجربی و نتایج…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 45

3-1-مقدمه:………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 45

3-2-دستگاه‌ها و مواد شیمیایی مورد استفاده…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 46

3-3-تهیه نانو ذرات مغناطیسی اکسید آهن (Fe3O4)…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 47

3-3-1-روش اول……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 47

3-3-1-1-شناسایی و بررسی مشخصات نانو ذرات اکسید آهن تهیه شده………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 48

3-3-1-2-بررسی اندازه و مورفولوژی نانو ذرات اکسید آهن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 49

3-3-2-3-بررسی خاصیت کریستالی نانو ذرات اکسید آهن……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 49

3-3-2-4-بررسی گروه‌های عاملی بر سطح نانو ذرات اکسید آهن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 51

3-3-2-روش دوم………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 52

3-3-2-1-شناسایی و بررسی مشخصات نانو ذرات اکسید آهن آهن تهیه شده………………………………………………………………………………………………………………………………………… 52

3-3-2-2-بررسی اندازه و مورفولوژی نانو ذرات اکسید آهن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 53

3-3-2-3-بررسی خاصیت کریستالی نانو ذرات اکسید آهن……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 53

3-3-2-4-بررسی گروه‌های عاملی بر سطح نانو ذرات اکسید آهن…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 54

3-3-4-مقایسه روش اول و دوم……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 55

3-4-سنتز مشتقات آمینو اسیدها و پپتید………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 55

3-5-جداسازی و شناسایی آمینو اسیدها و پپتیدها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 56

3-5-1-معرفی ترکیبات استفاده شده……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 57

3-5-1-1-فنیل آلانین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 57

3-5-1-2-تریپتفان……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 58

3-5-1-3-گلایسین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 59

3-5-1-4-سارکوسین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 60

3-5-1-5-پرولین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 60

3-5-1-6-آلانین-فنیل آلانین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 61

3-5-1-7-گلوتاتیون………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 62

3-5-2-بررسی عوامل موثر بر جداسازی………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 63

3-5-2-1-بررسی تاثیر pH محلول بر جداسازی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 65

3-5-2-2-بررسی تاثیر مقدار نانو ذرات مغناطیسی اکسید آهن بر استخراج………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 73

3-5-2-3-بررسی تاثیر حجم محلول نمونه بر استخراج………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 76

3-5-2-4-بررسی تاثیر زمان فرآیند استخراج…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 79

3-6-تحلیل نتایج……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 82

3-7-نتیجه‌گیری…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 84

منابع و مراجع:……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 85

شکل (1-1): نمای کلی مراحل مختلف واکنش سل- ژل………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 10

شکل (1-2): نمونه اطلاعات ثبت شده از پراش یک نمونه در روش پودری………………………………………………………………………………………………………………………….. 17

شکل (1-3): تصاویر SEM (تصاویر A و B) و  TEM ( تصاویر C و D) نانو ذرات اکسید آهن، پوشش​دار شده با کربن……………………………………………. 18

شکل (2-1): ساختار و گروه‌بندی بیست و یک آمینو اسید……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 21

شکل (2-2): شکل کلی اسیدهای آمینه……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 22

شکل (2-4): تهیه نانو ذرات اکسید آهن با پوشش مزوپروس سیلیکا و عامل PMMA………………………………………………………………………………………………………… 42

شکل (2-5): شمای کلی بستر مغناطیسی عامل​دار شده با هیدرازید با ترکیبات حاوی گروه کربونیل………………………………………………………………………………….. 43

شکل (3-1): تهیه به روش هم‌رسوبی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 48

شکل (3-2): تصویر SEM نانو ذرات اکسید آهن تهیه شده به روش هم‌رسوبی…………………………………………………………………………………………………………………… 49

شکل (3-3): طیف XRD نانو ذره مغناطیسی اکسید آهن تهیه شده به روش هم‌رسوبی……………………………………………………………………………………………………….. 50

شکل (3-4): طیف IR نانو ذرات اکسید آهن تهیه شده به روش هم‌رسوبی…………………………………………………………………………………………………………………………… 52

شکل (3-5): تصاویر SEM نانو ذرات اکسید آهن تهیه شده به روش سولوترمال…………………………………………………………………………………………………………………. 53

شکل (3-6): طیف XRD نانو ذره مغناطیسی اکسید آهن تهیه شده به روش سولوترمال………………………………………………………………………………………………………. 54

شکل (3-7): طیف IR نانو ذرات اکسید آهن تهیه شده به روش سولوترمال………………………………………………………………………………………………………………………….. 55

شکل (3-8): ساختار مشتقات آمینو اسید و پپتید سنتز شده (a): گلایسین (b): سارکوسین، (c): پرولین و (d): گلوتاتیون……………………………………………….. 56

شکل (3-9): ساختار فنیل آلانین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 57

شکل (3-10): حالت‌های یونیزاسیون فنیل آلانین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 57

شکل (3-11): ساختار تریپتفان……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 58

شکل (3-12): حالت‌های یونیزاسیون تریپتفان……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 59

شکل (3-13): ساختار گلایسین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 59

شکل (3-15): ساختار سارکوسین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 60

شکل (3-16): حالت‌های یونیزاسیون سارکوسین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 60

شکل (3-17): ساختار پرولین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 61

شکل (3-18): حالت‌های یونیزاسیون پرولین……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 61

شکل (3-20): ساختار گلوتاتیون…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 62

شکل (3-22): شمایی از مراحل استخراج آمینو اسیدها و پپتیدها با استفاده از نانو ذرات مغناطیسی اکسید آهن……………………………………………………………….. 63

شکل (3-23): نمودارهای کاهش جذب ترکیبات……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 64

شکل (3-24): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای فنیل آلانین…………………………………………………………………………………………………………………………………….. 67

شکل (3-25): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای تریپتفان…………………………………………………………………………………………………………………………………………… 67

شکل (3-26): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای گلایسین…………………………………………………………………………………………………………………………………………. 67

شکل (3-27): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای سارکوسین……………………………………………………………………………………………………………………………………… 68

شکل (3-28): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای پرولین…………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 68

شکل (3-29): نمودار درصد استخراج بر حسب pH برای گلوتاتیون……………………………………………………………………………………………………………………………………….. 68

شکل (3-30): نمودار تغییرات جذب بنزوئیک اسید بر حسب pH……………………………………………………………………………………………………………………………………………. 71

شکل (3-31): نمودار تغییرات جذب آنیلین بر حسب pH………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 71

شکل (3-32): تغییرات جذب آلانین-فنیل آلانین بر حسب  pH…………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 73

شکل (3-33): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای فنیل آلانین………………………………………………………………………………………………………. 74

شکل (3-34): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای تریپتفان…………………………………………………………………………………………………………….. 74

شکل (3-35): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای گلایسین…………………………………………………………………………………………………………… 74

شکل (3-36): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای سارکوسین……………………………………………………………………………………………………….. 75

شکل (3-37): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای پرولین………………………………………………………………………………………………………………. 75

شکل (3-38): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب مقدار جاذب برای گلوتاتیون…………………………………………………………………………………………………………. 76

شکل (3-38): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای فنیل آلانین………………………………………………………………………………………………………… 77

شکل (3-40): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای تریپتفان……………………………………………………………………………………………………………….. 77

شکل (3-41): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای گلایسین……………………………………………………………………………………………………………… 77

شکل (3-42): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای سارکوسین…………………………………………………………………………………………………………. 78

شکل (3-43): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای پرولین…………………………………………………………………………………………………………………. 78

شکل (3-44): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب حجم نمونه برای گلوتاتیون…………………………………………………………………………………………………………… 78

شکل (3-45): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای فنیل آلانین……………………………………………………………………………………….. 80

شکل (3-46): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای تریپتفان………………………………………………………………………………………………. 80

شکل (3-47): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای گلایسین…………………………………………………………………………………………….. 80

شکل (3-48): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای سارکوسین………………………………………………………………………………………… 81

شکل (3-49): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای پرولین………………………………………………………………………………………………… 81

شکل (3-50): نمودار تغییرات درصد استخراج بر حسب زمان فرآیند استخراج برای گلوتاتیون………………………………………………………………………………………….. 82

جدول (2-1): دسته‌بندی آمینو اسیدها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 25

جدول (2- 2) برخی روش​های جز به جز کردن بر پایه یک خصوصیت فیزیکی یا شیمیایی برای جداسازی پروتئین​ها و پپتیدها………………………………….. 34

جدول (3-1): دستگاه‌های مورد استفاده……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 47

جدول (3-2): نتایج بهینه‌سازی pH برای فنیل آلانین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 66

جدول (3-3): نتایج بهینه‌سازی pH برای تریپتفان………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 66

جدول (3-4): نتایج بهینه‌سازی pH برای گلایسین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 66

جدول (3-5): نتایج بهینه‌سازی pH برای سارکوسین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 66

جدول (3-6): نتایج بهینه‌سازی pH برای پرولین………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 66

جدول (3-7): نتایج بهینه‌سازی pH برای گلوتاتیون……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 66

جدول (3-8): تغییرات میزان جذب برای بنزوئیک اسید……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 70

جدول (3-9): تغییرات میزان جذب برای آنیلین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 70

جدول (3-10): تغییرات جذب آلانین-فنیل آلانین بر حسب pH…………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 72

جدول (3-11): نتایج بهینه‌سازی مقدار جاذب……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… 73

جدول (3-12): نتایج بهینه‌سازی حجم نمونه برای گلایسین، سارکوسین و پرولین………………………………………………………………………………………………………………… 76

جدول (3-12): نتایج بهینه‌سازی زمان فرآیند استخراج……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 79

جدول (3-13): مقادیر بهینه پارامترها برای آمینو اسیدها و پپتیدها……………………………………………………………………………………………………………………………………………. 82

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo