%34تخفیف

جداسازی وشناسایی سلولهای بنیادی مزانشیمی جدا شده از مغز استخوان سگ

جداسازی وشناسایی سلولهای بنیادی مزانشیمی جدا شده از مغز استخوان سگ

تعداد113صفحه در فایل word

دكتراي عمومي دامپزشكي از دانشگاه شيراز

جداسازی وشناسایی سلولهای بنیادی مزانشیمی جدا شده از مغز استخوان سگ

سلولهای بنیادی مزانشیمی، سلولهایی هستند که از منابع مختلفی از جمله مغز استخوان گرفته شده و قابلیت تمایز به بافتهای مختلفی از جمله استخوان، غضروف و چربی را دارند. همچنین دارای توانایی خود نوزایی و تنظیم کنندگی سیستم ایمنی نیز میباشند. در این مطالعه جداسازی، کشت و شناسایی سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان سگ مورد ارزیابی قرار گرفت. دو سگ سالم بزرگ با سن یک و سه سال از نژاد مخلوط استفاده گردید. پس از آرام بخشی و القای بیهوشی عمومی، حدود 20 میلیلیتر مغز استخوان از استخوان بازوی حیوان گرفته شده، کشت و پاساژ داده شدند. سلولها تقریباً به تعداد 10⁵×5/0 در 2 پليت 12 چاهکي ریخته و براي 9 روز متوالي شمارش شد. همچنین مورفولوژی، منحنی رشد و زمان دو برابر شدن جمعیت(PDT) سلولهای پاساژ چهار و پنج و هشت سگ مسنتر و پاساژ هشت سگ جوانتر مورد بررسی قرار گرفت. کاریوتایپ سلولهای پاساژهای یک و هشت سگ سه ساله از نظر تعداد کروموزومها و درصد دیپلوئیدی بررسی شد. همچنین میزان زنده مانی سلولها پس از انجماد مورد ارزیابی قرار گرفت. سلولهای بنیادی مزانشیمی در تمامی پاساژها فیبروبلاستی شکل و PDT پاساژ هشت سگ جوانتر 1/41 و پاساژهای چهار، پنج و هشت سگ مسنتر به ترتیب 8/65، 3/55 و 90 ساعت بود. تکثیر این سلولها در سگ جوانتر سریعتر از مسنتر بود. زمان دو برابر شدن جمعیت سلولی با افزایش سن افزایش یافت. تعداد کروموزومهای آنها 2n=78 و از نظر دیپلوئیدی کاملاً نرمال بود. میزان زنده مانی سلولها در سگ یکساله در پاساژ سه 57/81% و در سگ سه ساله در پاساژ یک 6/86% بود. با توجه به مطلوب بدن نتایج کاریوتایپینگ، این سلولها میتوانند به منظور ترمیم و بازسازی بافتی در اکثر ارگانها، در موارد پزشکی و دامپزشکی مورد استفاده قرار گیرند.

کلمات کلیدی: سلولهای بنیادی مزانشیمی، مغز استخوان، منحنی رشد، کاریوتایپ، سگ

دسته: فنی و مهندسی, کشاورزی و منابع طبیعی برچسب: سگ, کاریوتایپ, کلمات کلیدی: سلولهای بنیادی مزانشیمی, مغز استخوان, منحنی رشد

توضیحات

فهرست

1- مقدمه و هدف. 2

2- کليات. 5

2-1- مغز استخوان. 5

2-2- انواع مغز استخوان. 5

2-2-1- مغز استخوان استخوان ساز. 5

2-2-2- مغز استخوان قرمز. 5

2-2-3- مغز استخوان زرد. 6

2-2-4- مغز استخوان خاکستری. 6

2-3- نمونه گیری مغز استخوان. 6

2-3-1- اصول نمونه گیری از مغز استخوان. 7

2-4- سلول های بنیادی مزانشیمی. 8

2-4-1- منابع سلول های بنیادی مزانشیمی. 10

2-4-2- پتانسیل تمایزی سلول های بنیادی مزانشیمی. 11

2-4-3- خود نوزایی سلول های بنیادی مزانشیمی. 12

2-4-4- ویژگی های تنظیم کنندگی ایمنی سلول های بنیادی مزانشیمی 13

2-5- کاربردهای کلینیکی سلول های بنیادی مزانشیمی. 15

2-5-1- بیماری های کبدی. 15

2-5-2- دیابت. 16

2-5-3- بیماری قلبی. 18

2-5-4- بیماری های استخوانی. 18

2-5-5- بیماری کلیه. 20

2-5-6- زخم های مزمن. 20

2-5-7- بیماری پیوند علیه میزبان. 21

2-5-8- بیماری های عصبی. 22

2-6- جداسازی در شرایط آزمایشگاهی/ توسعه و بررسی خواص سلول های بنیادی مزانشیمی. 26

2-6-1- اصول جداسازی. 27

2-6-2- روش استاندارد توصیه شده جداسازی. 28

2-6-3- آماده سازی نمونه. 29

2-6-4- اصول روش جداسازی سلول های تک هسته ای. 29

2-6-5- فیکول پاک. 31

2-7- کشت سلول. 32

2-7-1- محيط هاي پايه کشت. 32

2-7-2- محتويات محيط کشت. 33

2-7-3- معيارهاي انتخاب محيط کشت. 36

2-7-4- آنزيم تريپسين (Trypsin enzyme). 36

2-7-5- محلول بافر شستشو. 37

2-8- ارزيابي سلول هاي بنیادی مزانشیمی. 37

2-8-1- شمارش سلولي و تعيين درصد زنده بودن سلول ها. 37

2-8-2- نمودار رشد. 39

2-8-3- زمان دو برابر شدن سلول ها (PDT) 40

2-8-4- کاريوتايپ. 40

3- فصل سوم: مواد و روش ها. 44

3-1- انتخاب حیوان آزمایشگاهی. 44

3-2- روش نمونه گيري. 44

3-3- روش جداسازی. 46

3-4- تعویض محیط. 47

3-5- نحوه ساخت محيط کشت کامل. 47

3-6- پاساژ. 47

3-6-1- روش پاساژ. 47

3-6-2- مراحل پاساژ نمونه ها. 48

3-7- نحوه شمارش سلولي. 49

3-8- روش انجماد سلول ها. 49

3-8-1- مراحل از انجماد درآوردن سلول. 50

3-9- مراحل انجام منحنی رشد. 50

3-10- روش انجام آناليز کاريوتايپ. 51

3-11- روش بررسی میزان زنده مانی سلول ها. 53

3-12- ارزيابي آماري. 53

4- فصل چهارم: نتایج. 55

4-1- کشت سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان سگ. 55

4-2- پاساژ. 59

4-3- جداول رشد سلول ها در پاساژهای مختلف. 60

4-4- منحنی رشد سلول ها در پاساژهای مختلف. 65

4-5- آنالیز کاریوتایپ. 70

4-6- قابلیت زیستن سلول. 71

5- فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری. 73

6- منابع. 80

امتیاز 0 از 5 از 0 دیدگاه

قیمت اصلی: 35,000 تومان بود.قیمت فعلی: 23,000 تومان.

تاریخ ایجاد دی 18, 1399
تاریخ بروزرسانی اسفند 13, 1401
فروش 0
دیدگاه 0

شرایط استفاده از محصول

تمام محصولات به ازای پرداخت پروژه تنها قابل استفاده می باشند. این بدین معنی است که برای استفاده از یک یا چند محصول ، لازم به خرید آن محصول است.

مزایای خرید این محصول:

دسترسی به فایل به صورت همیشگی
پشتیبانی رایگان
پشتیبانی 24 ساعته محصول
بازگشت وجه در صورت عدم رضایت مشتری

مشاهده قوانین سایت