%31تخفیف

تولید زیستی هیدروژن با استفاده از سویه  Enterobacter aerogenesPTCC1221 به روش تخمیر

تعداد 107صفحه در فایل word

کارشناسی ارشد(M. Sc)

گرایش: میکروبیولوژی عمومی

 

 

تولید زیستی هیدروژن با استفاده از سویه

 Enterobacter aerogenesPTCC1221 به روش تخمیر

 

خلاصه

مقدمه: هیدروژن یک حامل انرژی پاک است که پتانسیل زیادی به عنوان سوخت جایگزین دارد. تولید هیدروژن از زیست توده توسط تخمیر یکی از راههایی است که می تواند به اقتصاد هیدروژنی در آینده کمک کند. تولید تخمیری هیدروژن توسط باکتری های تخمیری از جمله کلستریدیوم ها و انتروباکترها انجام می شود.

هدف: هدف از این مطالعه تولید زیستی هیدروژن به روش تخمیر توسط سویه Enterobacter aerogenes PTCC1221 می باشد.

روش کار:در این تحقیق باکتری انتروباکتر آئروژنز در محیط نوترینت آگار کشت داده شد و برای تهیه مایه تلقیح به محیط پیش کشت تلقیح شد. برای اندازه گیری حجم هیدروژن تولیدی از روش جایگزینی آب (water displacement method) در سیستم تخمیری استفاده شد. حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از سوبستراهای مختلفی از جمله کاه گندم، کاه جو و سورگوم، شیره خرما و شیره انگور و پودر آب پنیر مورد بررسی قرار گرفت. برای آزاد سازی قند موجود در سوبستراهای لیگنوسلولزی از روش تیمار اسیدی استفاده شد و طراحی آزمایشها به منظور بهینه سازی شرایط تولید هیدروژن به روش تاگوچی انجام شد.

نتایج: سویه  Enterobacter aerogenes PTCC1221توانایی استفاده از تمامی سوبستراهای ذکر شده به عنوان منبع کربن در فرایند تولید تخمیری هیدروژن را دارد و حجم های متفاوتی از هیدروژن توسط این سوبستراها بدست آمد و شیره انگور بیشترین حجم تولیدی را نشان داد.

نتیجه گیری نهایی: داده های حاصل از طراحی آزمایشها به روش تاگوچی نشان داد که بهینه شرایط برای تولید حداکثر حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از گلوکز دمای ºC ٣۵، مایه تلقیح ٣٠%،غلظت گلوکز g/l٣٠ و mg/l٣٠٠:Fecl3 و محدوده۵/٦-۵:pH می باشد.

لغات کلیدی: انتروباکترآئروژنز، تولید زیستی هیدروژن، تخمیر، سوبسترا، گلوکز

 

عنوان                                         فهرست مطالب                                        صفحه

 

خلاصه فارسی……………………………………………………………………………………………………………………………. ١

مقدمه…………………………………………………………………………………………………………………………………………..۲

فصل اول: طرح موضوع و بیان مساله

١-١– طرح موضوع و بیان مساله ……………………………………………………………………………………………………٥

١-۲ – فرضیه‌ها و اهداف پژوهش…………………………………………………………………………………………………..٧

فصل دوم: سابقه و پیشینه تحقیق

۲-١ – سابقه و پیشینه تحقیق………………………………………………………………………………………………………… ٩

۲-١-١– تاريخچه بيوگاز در ایران…………………………………………………………………………………………………١٠

۲-١-۲- تاریخچه تولید هیدروژن توسط سویه انتروباکتر آئروژنز………………………………………………………١١

۲-۲- ادبیات ومستندات مربوط به تولید هیدروژن…………………………………………………………………………. ١٤

۲-۲-١- روش هاي توليد هيدروژن…………………………………………………………………………………………….. ١٤

۲-۲-١-١- روش هاي بيولوژيكي توليد هيدروژن………………………………………………………………………… ١٤

۲-۲-١-١-١ سيستمهاي توليد بيو هيدروژن وابسته به نور……………………………………………………………….۱۵

۲-۲-١-١-۲- سيستمهاي توليد بيو هيدروژن غير نوري………………………………………………………………… ۱۵

۲-۲-١-١-١-١- بيو فتوليز مستقيم ……………………………………………………………………………………………. ۱۵

۲-۲-١-١-١-۲-بیوفتولیز غیرمستقیم…………………………………………………………………………………………… ۱٦

۲-۲-١-١-١-۳- تخيمر نوري……………………………………………………………………………………………………. ۱٧

۲-۲-١-١-١-۳-١- راهكارهاي افزايش توليد بيو هيدروژن در سيستم تخمير نوري…………………………. ۱٩

۲-۲-١-١-۲-١- سنتز بيو هيدروژن از طريق واكنشwater gas shift……………………………………………………….۲۰

۲-۲-١-١-۲-۲-تخمير در تاريكي………………………………………………………………………………………………. ۲۰

۲-۲-١-١-۲-۲-١-مسیر بیوشیمیایی تولید هیدروژن……………………………………………………………………… ۲١

۲-۲-١-١-۲-۲-١-١- مسیر متابولیکی سویه انتروباکتر آئروژنز در تولید هیدروژن……………………………. ۲۳

۲-۲-١-١-۲-۲-۲- آنزیم هیدروژناز…………………………………………………………………………………………… ۲٤

۲-۲-١-١-۲-۲-۳-كاهش اثرات باكتري هاي مضردر توليد هيدروژن………………………………………………. ۲٥

۲-۲-١-١-۲-۲-٤- تخمیر میکروبی……………………………………………………………………………………………. ۲٦

۲-۲-١-۲- روش هاي توليد هيدروژن از منابع تجديدپذير……………………………………………………………… ۲٧

۲-۲-١-۲-١- الكتروليز تجديدپذير…………………………………………………………………………………………….. ۲٧

۲-۲-١-۲-۲- روش هاي حرارتي………………………………………………………………………………………………. ۲٨

۲-۲-١-۲-۲-١- گازي سازي زيست توده…………………………………………………………………………………… ۲٨

۲-۲-١-۲-۲-۲- بازآرايي با بخار سوخت مايع تجديدپذير…………………………………………………………….. ۲٨

۲-۲-١-۲-۲-۳- تجزیه آب در دماي بالا…………………………………………………………………………………….. ۲٩

۲-۲-١-۲-۳- روش هاي تجزيه نوري……………………………………………………………………………………….. ۲٩

۲-۲-١-۲-۳-١- تجزيه نوري-زيستي آب…………………………………………………………………………………… ۲٩

۲-۲-١-۲-۳-۲- تجزيه نوري-الكتروشيميايي آب………………………………………………………………………… ۲٩

۲-۲-١-۲-۳-۳- هيدروژن به عنوان محصول جانبي…………………………………………………………………….. ۳٠

۲-۲-۲- دلایل استفاده از هیدروژن به عنوان سوخت…………………………………………………………………….. ۳٠

۲-۲-۲-١- محتوای انرژي…………………………………………………………………………………………………………. ۳٠

۲-۲-۲-۲- فراريت…………………………………………………………………………………………………………………… ۳٠

۲-۲-۲-۳-سمیت……………………………………………………………………………………………………………………… ۳١

۲-۲-۲-٤-رنگ، بو، مزه…………………………………………………………………………………………………………….. ۳١

۲-۲-۲-٥-اشتعال پذیری…………………………………………………………………………………………………………… ۳١

۲-۲-۲-٦-انرژی مورد نیاز برای شروع احتراق…………………………………………………………………………….. ۳۲

۲-۲-۲-٧-سرعت اشتعال…………………………………………………………………………………………………………… ۳۲

۲-۲-۲-٨-نقطه اشتعال………………………………………………………………………………………………………………. ۳۲

۲-۲-۲-٩-دمای احتراق خودبخودی……………………………………………………………………………………………. ۳۲

۲-۲-۲- ١٠-محدوده قابلیت اشتعال……………………………………………………………………………………………. ۳۳

۲-۲-۲-١١-انفجار…………………………………………………………………………………………………………………….. ۳۳

۲-۲-۲-١۲-شعله وتشعشع حرارتی…………………………………………………………………………………………….. ۳۳

۲-۲-۳- سوبستراهای مورد استفاده در تولید هیدروژن…………………………………………………………………… ۳٤

۲-۲-۳-١-غذا و مواد با بنیاد نشاسته ای………………………………………………………………………………………. ۳٤

۲-۲-۳-۲-مواد لیگنوسلولزی……………………………………………………………………………………………………… ۳٦

۲-۲-۳-۲-١-سلولز…………………………………………………………………………………………………………………… ۳٧

۲-۲-۳-۲-۲-همی سلولز…………………………………………………………………………………………………………… ۳٨

۲-۲-۳-۲-۳ -لیگنین………………………………………………………………………………………………………………… ۳٩

۲-۲-۳-۳-ضایعات لبنی…………………………………………………………………………………………………………….. ٤٠

۲-۲-۳-۳-١-پودر آب پنیر………………………………………………………………………………………………………… ٤١

۲-۲-۳-٤- ضایعات کارخانه ی روغن زیتون……………………………………………………………………………….. ٤١

۲-۲-۳-٥-ضایعات گلیسرولی……………………………………………………………………………………………………. ٤١

۲-۲-٤- ظرفیت‌های ایران برای تولید سوخت زیستی……………………………………………………………………. ٤۲

۲-۲-٤-١- گندم……………………………………………………………………………………………………………………….. ٤۲

۲-۲-٤-۲- مركبات…………………………………………………………………………………………………………………… ٤۲

۲-۲-٤-۳- سبزیجات………………………………………………………………………………………………………………… ٤۳

۲-۲-٤-٤- نیشکر…………………………………………………………………………………………………………………….. ٤۳

۲-۲-٤-٥- خرما………………………………………………………………………………………………………………………. ٤۳

۲-۲-٤-٥-١-اتانول…………………………………………………………………………………………………………………… ٤٤

۲-۲-٤-٥-۲-سرکه…………………………………………………………………………………………………………………… ٤٤

۲-۲-٤-٥-۳-اسید سیتریک………………………………………………………………………………………………………… ٤٤

۲-۲-٤-٥-٤-تولید پروتئین تک یاخته…………………………………………………………………………………………. ٤٤

۲-۲-٤-٦-انگور……………………………………………………………………………………………………………………….. ٤۵

۲-۲-٥-طراحی آزمایشها……………………………………………………………………………………………………………. ٤٧

۲-۲-٥-١- روش‌های مختلف طراحی آزمایش‌ها………………………………………………………………………….. ٤٧

فصل سوم: مواد و روشها

۳-١-مواد مورد استفاده در طول تحقیق………………………………………………………………………………………… ٥٠

۳-۲- دستگاه های مورد استفاده در طول تحقیق……………………………………………………………………………. ٥٠

۳-۳- استریل کردن وسایل و مواد……………………………………………………………………………………………….. ٥٠

۳-٤-روش ها…………………………………………………………………………………………………………………………… ٥١

۳-٤-١- میکروارگانیسم مورد استفاده و نحوه نگهداری آن…………………………………………………………….. ٥١

۳-٤-۲- باز کردن آمپول لیوفیلیزه برای کشت……………………………………………………………………………….. ٥١

۳-٤-۳- روش تهیه محیط نوترینت آگارNutrient agar……………………………………………………………… ٥١

۳-٤-٤- روش تهیه محیط پیش کشت ومحیط کشت اصلی……………………………………………………………. ٥۲

۳-٤-٥- بررسی میکروسکوپی سویه انتروباکتر آئروژنز…………………………………………………………………… ٥۲

۳-٤-٦- روش تهیه بافر فسفات سالین…………………………………………………………………………………………. ٥۲

۳-٤-٧-رسم منحنی رشد باکتری………………………………………………………………………………………………… ٥۲

۳-٤-٨- آماده سازی مایه تلقیح…………………………………………………………………………………………………… ٥۳

۳-٤-٩- مطالعات اولیه برای اثبات تولید گاز هیدروژن توسط سویه انتروباکتر آئروژنز……………………….. ٥٤

۳-٤-٩-١- مقایسه میزان گاز تولیدی توسط دو منبع کربنی گلوکز صنعتی ومرک………………………………. ٥٤

۳-٤-١٠- شمارش  تعداد باکتری به روش رقت سریالی………………………………………………………………… ٥٤

۳-٤-١١- ترسیم نمودار استاندارد قندهای احیاء کننده به روش DNS……………………………………………. ٥٥

۳-٤-١١-١-روش ترسیم منحنی استاندارد برای مونو ساکارید ها……………………………………………………. ٥٥

۳-٤-١١-١-١-تهیه معرف DNS………………………………………………………………………………………………. ٥٦

۳-٤-١١-۲- روش ترسیم منحنی استاندارد برای دی ساکارید ها: (ساکارز، مالتوز، لاکتوز)………………… ٥٦

۳-٤-١۲-روش محاسبه بازده و سرعت تولید هیدروژن…………………………………………………………………. ٥٦

۳-٤-١۳- نصب سیستم برای اندازه گیری حجم هیدروژن تولیدی …………………………………………………. ٥٧

۳-٤-١۳-١- بررسی حجم گازهیدروژن با استفاده از گلوکز، زایلوز، ساکارز، گالاکتوز و فروکتوز……….. ٥٨

۳-٤-١٤-بررسي تاثير منابع كربني ارزان قیمت به عنوان سوبسترابرتولید هیدروژن…………………………….. ٥٨

۳-٤-١٤-١-تيمار كاه گندم ، كاه جو ، سورگوم…………………………………………………………………………….. ٥٨

۳-٤-١٤-١-١-مراحل تیمار كاه گندم ، جو و سورگوم…………………………………………………………………… ٥٩

۳-٤-١٤-۲-تیمار آب پنیر………………………………………………………………………………………………………….. ٥٩

۳-٤-١٤-۳- سنجش قند موجود در شیره خرما و انگور…………………………………………………………………. ٥٩

۳-٤-١٤-٤آزمایش برای اطمینان از تولید گاز هیدروژن توسط منابع کربنی ارزان…………………………… ٥٩

۳-٤-١٤-٤-١- بچ های حاوی کاه گندم،کاه جو،سورگوم………………………………………………………………. ٦٠

۳-٤-١٤-٤-۲- بچ های حاوی شیره خرما وانگور………………………………………………………………………… ٦٠

۳-٤-١٤-٤-۳- بچ حاوی پودر آب پنیر………………………………………………………………………………………. ٦٠

۳-٤-١٤-٤-١-١- بررسی حجم گاز تولیدی با استفاده از کاه جو،کاه گندم،سورگوم………………………….. ٦٠

۳-٤-١٤-٤-١-۲- بررسی حجم گاز تولیدی با استفاده ازشیره خرما وانگور……………………………………… ٦١

۳-٤-١٥- بررسی و تعیین میزان تلقیح مناسب برای طراحی تاگوچی و بهینه سازی…………………………… ٦١

۳-٤-١٦- بررسی تاثیر افزودن Fecl3 به محیط کشت روی حجم گاز تولیدی…………………………………. ٦١

۳-٤-١٧- طراحی آزمایشها به منظور بهینه سازی شرایط تولیدبه روش تاگوچی………………………………… ٦۲

فصل چهارم: نتایج

٤-١-نتایج ارزیابی ماکروسکوپی و میکروسکوپی…………………………………………………………………………… ٦٤

٤-۲- نتایج حاصل از شمارش باکتری………………………………………………………………………………………….. ٦٥

٤-۳- منحنی استاندارد مونو ساکاریدها:(گلوکز)…………………………………………………………………………….. ٦٥

٤-٤- منحنی استاندارد برای دی ساکارید ها: (ساکارز، مالتوز، لاکتوز)……………………………………………… ٦٦

٤-٥- نتایج حاصل از مطالعات اولیه برای اثبات تولید گاز توسط سویه انتروباکتر آئروژنز…………………… ٦٧

٤-٥-١- ارزیابی مقایسه میزان گاز تولیدی توسط دو منبع کربنی گلوکز صنعتی ومرک……………………….. ٦٧

٤-٦-ارزیابی حجم گاز هیدروژن با استفاده از گلوکز، زایلوز، ساکارز، گالاکتوز و فروکتوز…………………. ٦٨

٤-٦-١-گلوکز………………………………………………………………………………………………………………………….. ٦٨

٤-٦-۲-زایلوز…………………………………………………………………………………………………………………………… ٦٩

٤-٦-۳-ساکارز…………………………………………………………………………………………………………………………. ٦٩

٤-٦-٤-گالاکتوز……………………………………………………………………………………………………………………….. ٦٩

٤-٦-٥-فروکتوز……………………………………………………………………………………………………………………….. ٦٩

٤-٧-ارزیابی تاثير منابع كربني مختلف به عنوان سوبسترا………………………………………………………………… ٦٩

٤-٨- ارزیابی تاثير منابع كربني ارزان قیمت به عنوان سوبسترا برتولید هیدروژن………………………………… ٦٩

٤-٨-١-شیره خرما…………………………………………………………………………………………………………………….. ٧١

٤-٨-۲- شیره انگور………………………………………………………………………………………………………………….. ٧١

٤-٨-۳- کاه جو………………………………………………………………………………………………………………………… ٧۲

٤-٨-٤- کاه گندم……………………………………………………………………………………………………………………… ٧۳

٤-٨-٥- سورگوم………………………………………………………………………………………………………………………. ٧۳

٤-٩- نتایج حاصل از بررسی میزان تلقیح مناسب برای طراحی تاگوچی و بهینه سازی……………………….. ٧۳

٤-١٠- نتایج حاصل از افزودن Fecl3 به محیط کشت…………………………………………………………………… ٧٤

٤-١١- نتایج بهینه سازی شرایط تولید هیدروژن به روش تاگوچی…………………………………………………… ٧٥

٤-١١-١- بررسی نمودار آثار اصلی……………………………………………………………………………………………… ٧٦

٤-١١-۲- بررسی نمودار اثرات متقابل بین عوامل………………………………………………………………………….. ٧٨

٤-١١-۳- آنالیز واریانس نتایج حاصل از بهینه سازی…………………………………………………………………….. ٧٩

٤-١۲- آنالیز گازهای تولیدی با استفاده از کروماتوگرافی گازی……………………………………………………….. ٨۱

فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری

٥-١-بحث و نتیجه گیری…………………………………………………………………………………………………………… ٨٤

٥-۲-پیشنهادات………………………………………………………………………………………………………………………… ٩٦

منابع………………………………………………………………………………………………………………………………. ٩٨

خلاصه انگلیسی…………………………………………………………………………………………………………….. ۱۰٦

عنوان                                          فهرست جدول                                      صفحه

جدول ۲-١- میکروارگانیسم های تولید کنندهیدروژن……………………………………………………………………. ۱٤

جدول ۲-۲-ویژگی های سوخت های بنزین ،گاز طبیعی وهیدروژن………………………………………………… ۳٤

جدول ۲-۳-فرآیند تولید هیدروژن با استفاده از ضایعات غذایی با بنیاد نشاستها………………………………. ۳٥

جدول ۲-٤-ترکیب اجزای لیگنوسلولزی در گیاهان مختلف……………………………………………………………. ۳٦

جدول ۲-٥-آنالیز مربوط به شیره خرما………………………………………………………………………………………… ٤٥

جدول ۲-٦-آنالیز مربوط به شیره انگور……………………………………………………………………………………….. ٤٦

جدول ۳-١-طراحی آزمایشها به منظور بهینه سازی شرایط تولید هیدروژن به روش تاگوچی………………. ٦۲

جدول٤-١-نتایج حاصل از بهینه سازی به روش تاگوچی……………………………………………………………….. ٧٥

عنوان                                          فهرست نمودار                                      صفحه

نمودار ۳-١-تغییرات کدورت محیط پیش کشت تلقیح شده با باکتری انتروباکتر آئروژنز…………………….. ٥۳

نمودار ٤-١-منحنی استاندارد گلوکز…………………………………………………………………………………………….. ٦٥

نمودار٤-۲-منحنی استاندارد لاکتوز……………………………………………………………………………………………… ٦٦

نمودار ٤-۳-منحنی استاندارد ساکارز……………………………………………………………………………………………. ٦٦

نمودار ٤-٤-منحنی استاندارد مالتوز……………………………………………………………………………………………… ٦٧

نمودار ٤-٥-حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از شیره خرما بر حسب زمان……………………………………… ٧۱

نمودار ٤-٦-حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از شیره انگور بر حسب زمان…………………………………….. ٧۲

نمودار ٤-٧- حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از کاه جو بر حسب زمان…………………………………………. ٧۲

نمودار ٤-٨- حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از کاه گندم بر حسب زمان………………………………………. ٧۳

نمودار ٤-٩- حجم هیدروژن تولیدی با استفاده از سورگوم بر حسب زمان……………………………………….. ٧٤

نمودار ٤-١٠-نمودار آثار اصلی فاکتورها بر روی بهینه سازی تولید هیدروژن به روش تاگوچی………….. ٧٦

نمودار ٤-١١- نمودار آثار اصلی فاکتورها بر روی سرعت تولید هیدروژن به روش تاگوچی……………….. ٧٧

نمودار ٤-١۲- نمودار آثار اصلی فاکتورها بر روی بازده تولید هیدروژن به روش تاگوچی………………….. ٧٧

نمودار ٤-١۳-نمودار اثرات متقابل بین عوامل بر افزایش تولید هیدروژن…………………………………………… ٧٨

نمودار٤-١٤-نمودار آنالیز گازهای تولیدی قبل از جذب دی اکسید کربن…………………………………………. ٨۱

عنوان                                   فهرست شکل‌ها                                            صفحه

شکل ۲-١- شمای فرایند بیوفتولیز غیر مستقیم……………………………………………………………………………… ۱٧

شکل ۲-۲- تولید هیدروژن با روش تخمیر نور…………………………………………………………………………….. ۱٩

شکل ۲-۳- مکانیسم سنتز بیوهیدروژن از طریق تخمیر در تاریکی…………………………………………………… ۲۲

شکل۲-٤- مکانیسم سنتز هیدروژن با استفاده از سویه انتروباکترآئروژنز……………………………………………. ۲۳

شکل ۲-٥- ساختار مولکولی آنزیم هیدروژناز………………………………………………………………………………. ۲٤

شکل۲-٦-ساختار سلولز…………………………………………………………………………………………………………….. ۳٧

شکل۲-٧-ساختار همی سلولز…………………………………………………………………………………………………….. ۳٨

شکل ۲-٨-ساختار لیگنین…………………………………………………………………………………………………………… ۳٩

شکل ۲-٩-شماتیک فرایند تولید هیدروژن از مواد لیگنوسلولزی……………………………………………………… ٤٠

شکل ۳-١-شماتیک اندازه گیری گاز هیدروژن……………………………………………………………………………… ٥٧

شکل ٤-١- تصاویر میکروسکوپی و ماکروسکوپی سویه انتروباکتر آئروژنز……………………………………….. ٦٤

شکل٤-۲-مقایسه اثر گلوکز صنعتی و گلوکز مرک بر تولیدهیدروژن………………………………………………… ٦٨

شکل٤-۳- تولید گاز با استفاده از سوبستراهای مختلف در ساعت ششم…………………………………………… ٧۰

شکل٤-٤-میزان تولید گاز بعد از گذشت ١۲ ساعت با استفاده از منابع کربنی مختلف……………………….. ٧۰

فهرست واژگان اختصاری

BOD

Biochemical oxygen demand

COD

Chemical oxygen demand

SCP

Singel cell protein

TCA

Tricarboxylic acid cycle

ATP

Adenosin triphosphate

PBS

Phosphate-buffered saline

نقد و بررسی‌ها

هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.

اولین کسی باشید که دیدگاهی می نویسد “تولید زیستی هیدروژن با استفاده از سویه  Enterobacter aerogenesPTCC1221 به روش تخمیر”

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo