%46تخفیف

تشخیص مولکولی باکتری ارلیشیا در کنه های جدا شده از سگ های شهر کرمان

تعداد78صفحه در فایل word

دكتراي حرفه اي دامپزشكي

شخیص مولکولی باکتری ارلیشیا در کنه های جدا شده از سگ های شهر کرمان

چکيده
مقدمه:ارليشيوز بيماري مشترک نوپديد کنه زادي است که توسط خانواده آناپلاسماتاسه ايجاد مي گردد. اخيراً گزارشاتي مربوط به وقوع همه گيري ارليشيايي در جمعيت انساني ايران در استان مازندران منتشر گشته است. علاوه بر این ، گزارشاتي مبني بر وجود علائم سرولوژي ارليشياي منوسيتيک سگ سانان ناشي از ارليشيا کنيس در جنوب شرقي ايران گزارش شده است، اما اپيدميولوژي اين بيماري در ايران تاکنون مشخص نگرديده است. لذا جهت تکميل مطالعات قبلي و تعيين وضعيت قطعي آلودگي به گونه هاي مختلف ارليشيا، درتحقيق حاضر از روش واکنش زنجيره پليمراز در سگ هاي آلوده به کن ه درکرمان استفاده گرديد.
روش کار: از بدن 50 قلاده سگ آلوده به کنه که در خارج از منزل نگهداری می شدند بدون توجه به سن، نژاد و جنس، نمونه گیری انجام شد. سپس کنه ها براساس گونه دسته بندی شده و درظرف حاوی الکل 70 درصد و در دمای 4 درجه سانتی گراد قرار گرفتند ( 50 پول تهیه گردید وبه طور متوسط در هر پول 7 کنه گذاشته شد). در مرحله بعدي، جداسازي DNA و انجام PCR باکيت تجاري صورت پذيرفت.
نتايج: براساس نتايج آزمون PCR مشخص گشت که 3 نمونه از 50 نمونه مورد مطالعه (6%) از نظرگونه هاي ارليشيا مثبت بودند. در تحقیق حاضر هر 3 قلاده سگ آلوده، دارای کنه ریپی سفالوس سنگوئینوس بودند.
نتيجه گيري: باتوجه به نتايج حاصل ازاين تحقيق ارليشيوز را ميتوان به عنوان يک بيماري مشترک نو پديد در ايران در نظر گرفت.
تعيين پراکندگي جغرافيايي اين بيماري در جمعيت انساني، دامي وکنه ها به عنوان مخزن اصلي بيماري به همراه تعيين گونه هاي مسبب اين بيماري در ايران، جهت تعيين اهميت بهداشت عمومي و ابداع روشهاي کنترل وپيشگيري بيماري الزامي است.

کلمات کليدي: ارليشيا، سگ، واکنش زنجيره اي پليمراز، بيماري مشترک نوپديد.

 

 

فهرست مطالب

فصل اول– مقدمه و هدف……………………………………………………………………………………………………………………1

فصل دوم–کليات وبررسي منابع موجود ………………………………………………………………………………………………….4

1-2-تاريخچه بيماري ارليشيوز،سبب شناسي وهمه­گيرشناسي……………………………………………………………………..5

2-2- بيماريزايي………………………………………………………………………………………………………………………………..8

3-2-يافته هاي باليني………………………………………………………………………………………………………………………...10

1-3-2- علائم درگيري چند سيستمي………………………………………………………………………………………………….12

2-3-2-علائم چشمي ……………………………………………………………………………………………………………12

3-3-2-علائم عضلاني– عصبي ………………………………………………………………………………………………..12

4-3-2-درگيري مفاصل …………………………………………………………………………………………………………13

4-2-تشخيص ………………………………………………………………………………………………………………………………….14

1-4-2-هماتولوژي ……………………………………………………………………………………………………….14

2-4-2-آزمايش هاي بيوشيميايي………………………………………………………………………………………………………..15

3-5-2- سرم شناسي…………………………………………………………………………………………………………………………17

4-5-2 –ايمنوبلاتينگ و واكنش زنجيره اي پليمراز ……………………………………………………………………….19

5-5-2-معرفي روش واکنش زنجيره اي پليمراز ……………………………………………………………………..20

6-2-يافته هاي پاتولوژي ……………………………………………………………………………………………………………………21

7-2-درمان …………………………………………………………………………………………………………………………22

8-2-پيشگيري ………………………………………………………………………………………………………………………….26

9-2-مخاطرات بهداشت عمومي…………………………………………………………………………………………………………26

10-2-انواع کنه های مطرح در انتقال ارلیشیوز……………………………………………………………………………………….28

فصل سوم– مواد و روش کار ………………………………………………………………………………….. ………………………..33

1-3-انتخاب جمعيت نمونه برداري……………………………………………………………………………………………………..34

2-3-روش کار: ………………………………………………………………………………………………………………………..36

1-2-3-نمونه گيري :……………………………………………………………………………………………………………………….6 3

2-2-3-جداسازيDNA:……………………………………………………………………………………………………………………36

4-2-3-روش انجامPCR:…………………………………………………………………………………………………………………… 39

5-2-3-مراحل انجام الکتروفورز:………………………………………………………………………………………………. 40

1-5-2-3-مرحله اول: آماده سازي بافرTBE…………………………………………………………………………………………..40

2-5-2-3-مرحله دوم: آماده کردن ژل آگارز……………………………………………………………………………………….41

3-5-2-3-مرحله سوم: بارگذاري نمونه‌ها، حرکت روي ژل و الکتروفورز ………………………………………….42

3-3 روش محاسبات آماري:………………………………………………………………………………………………………………43

فصــل چهارم –  نتــايج ……………………………………………………………………………………………………………………..44

فصــل پنجم – بحث و نتيجه گيري……………………………………………………………………………………………………..49

پيشنهادات:…………………………………………………………………………………………………………………………………….. 62

منابع:……………………………………………………………………………………………………………………………………………..63

خلاصه انگلیسی……………………………………………………………………………………………………………………………… 68

فهرست جداول

جدول 1-2-گونه هاي مسبب ارليشيوز در انسان، حيوانات اهلي وآزمايشگاهي …………………………………………….7

جدول2-2- مقايسه علايم باليني در سگهاي آلوده به گونه هاي مختلف ارليشيا……………………………………………11

جدول 1-3 – پرسشنامه جمع آوري اطلاعات از جمعيت مورد نمونه گيري………………………………………………..35

جدول2-3- انجام مراحلPCR توسط دستگاه ترمال سايکلر……………………………………………………………………40

 

فهرست تصاوير ونمودارها

تصوير 1-2-روندبيماريزاييارليشياکنيسدرسگها…………………………………………………………………………. 11

تصوير2-2-مورولايارليشيا……………………………………………………………………………………………………. 18

تصوير3- 2-مورولايارليشيا……………………………………………………………………………………………………..19

تصوير1-3- کيتجداسازيDNA…………………………………………………………………………………………….41

نمودار 1-4-توزيعفراوانيجنسدرسگهاموردبررسي  ………………………………………………………………….48

نمودار2-4-توزيعفراوانيسندرسگهايموردبررسي  ………………………………………………………………….49

نمودار3-4-توزیع فراوانی نژاد در سگ های مورد بررسی…………………………………………………………….50

نمودار4-4-توزیع فراوانی آلودگی در کنه های مورد بررسی ……………………………………………………….51

تصویر1-4-بارگذاری نمونه های مثبت……………………………………………………………………………………52

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo