%46تخفیف

تشخيص مولکولي گونه­هاي ارليشيا در جمعيت سگ­هاي آلوده به کنه شهر کرمان

تعداد85 صفحه در فایل word

دكتراي حرفه اي دامپزشكي

تشخيص مولکولي گونه­هاي ارليشيا در جمعيت سگ­هاي آلوده به کنه شهر کرمان

مقدمه: ارليشيوز بيماري مشترک نوپديد کنه­زادي است که توسط خانواده آناپلاسماتاسه ايجاد مي­گردد. اخيراً گزارشاتي مربوط به وقوع همه­گيري ارليشيايي در جمعيت انساني ايران در استان مازندران منتشر گشته است. علاوه بر اين، گزارشاتي مبني بر وجود علائم سرولوژي ارليشياي منوسيتيک سگ­سانان ناشي از ارليشيا­کنيس در جنوب شرقي ايران گزارش شده­است، اما اپيدميولوژي اين بيماري در ايران تا کنون مشخص نگرديده­ است. لذا جهت تکميل مطالعات قبلي و تعيين وضعيت قطعي آلودگي به گونه­هاي مختلف ارليشيا، در تحقيق حاضر از روش واکنش زنجيره پلي مراز در سگ­هاي آلوده به کنه در کرمان استفاده گرديد.

روش کار: از 50 قلاده سگ آلوده به کنه كه درخارج از محيط منزل نگهداري مي­شدند، بدون توجه به سن، جنس و نژاد، وضعيت باليني خون­گيري شد. خونگيري از وريد سفاليك، به ميزان 5 ميلي ليتر انجام شد و نمونه خون به ظرف نمونه­گيري حاوي ماده ضد انعقاد منتقل گرديد. در بررسي هماتولوژي شمارش كلي وتفريقي لكوسيت­ها، شمارش کلي گلبول­هاي قرمز، اندازه گيري هماتوكريت و شمارش پلاكت­ها طبق روش هاي متداول آزمايشگاهي صورت پذيرفت. در مرحله بعدي، جدا­سازيDNA   و انجام PCR با کيت تجاري صورت پذيرفت.

نتايج: بر اساس نتايج آزمون PCR مشخص گشت که 3 نمونه از 50 نمونه مورد مطالعه (6%) از نظر گونه­هاي ارليشيا مثبت بودند. در تحقيق حاضر از 3 قلاده سگ آلوده، يک  قلاده تنها مبتلا به آنمي، يک قلاده تنها مبتلا به ترومبوسيتوپني و سومين حيوان مبتلا يافته هاي لوکوپني و آنمي را تواماً نشان مي داد.

نتيجه گيري: با توجه به نتايج حاصل از اين تحقيق ارليشيوز را ميتوان به عنوان يک بيماري مشترک نوپديد در ايران در نظر گرفت. تعيين پراکندگي جغرافيايي اين بيماري در جمعيت انساني، دامي و کنه­ها به عنوان مخزن اصلي بيماري به همراه تعيين گونه­هاي مسبب اين بيماري در ايران، جهت تعيين اهميت بهداشت عمومي  و ابداع روش­هاي کنترل و پيشگيري بيماري الزامي است.

کلمات کليدي: ارليشيا، سگ، واکنش زنجيره اي پلي مراز ، بيماري مشترک نوپديد.

چکيده ث‌

فصل اول – مقدمه و هدف 1

فصل دوم – کليات و بررسي منابع موجود 5

1-2-تاريخچه بيماري ارليشيوز، سبب شناسي و همه­گيرشناسي 6

2-2-بيماريزايي 9

3-2-يافته هاي باليني 12

1-3-2- علائم درگيري چند سيستمي 14

2-3-2-علائم چشمي 14

3-3-2-علائم عضلاني– عصبي 14

4-3-2-درگيري مفاصل 15

4-2-تشخيص 16

1-4-2-هماتولوژي 16

2-4-2-آزمايش هاي بيوشيميايي 17

3-5-2- سرم شناسي 19

4-5-2 -ايمنوبلاتينگ و واكنش زنجيره اي پليمراز 21

5-5-2-معرفي روش واکنش زنجيره اي پلي مراز 22

6-2-يافته هاي پاتولوژي 23

7-2-درمان 25

8-2-پيشگيري 29

9-2-مخاطرات بهداشت عمومي 29

فصل سوم – مواد و روش کار 32

1-3-انتخاب جمعيت نمونه برداري 33

2-3-روش کار: 35

1-2-3-خونگيري : 35

2-2-3-بررسي هماتولوژي: 35

3-2-3-جدا سازي DNA: 35

4-2-3-روش انجام PCR: 38

5-2-3-مراحل انجام الکتروفورز: 40

1-5-2-3-مرحله اول: آماده سازي بافر TBE 40

3-5-2-3-مرحله سوم- بار گذاري نمونه‌ها، حرکت روي ژل و الکتروفورز 41

3-3 روش محاسبات آماري: 42

فصــل چهارم –  نتــايج 43

فصــل پنجم – بحث ونتيجه گيري 53

پيشنهادات: 65

منابع: 66

خلاصه انگلیسی 70

فهرست جداول

جدول 1-2-گونه هاي مسبب ارليشيوز در انسان ،حيوانات اهلي و آزمايشگاهي…………………………..8

جدول2-2-مقايسه علايم باليني در سگ هاي آلوده به گونه هاي مختلف ارليشيا…………………………13

جدول 1-3 -پرسشنامه جمع آوري اطلاعات از جمعيت مورد نمونه گيري………………………………..34

جدول2-3-انجام مراحل PCR توسط دستگاه ترمال سايکلر ………………………………………………….39

فهرست تصاوير و نمودارها

تصوير 1-2-روند بيماريزايي ارليشيا کنيس در سگ ها……………………………………………………… 11

تصوير2-2-مورولاي ارليشيا………………………………………………………………………………………… 19

تصوير3- 2-مورولاي ارليشيا…………………………………………………………………………………………19

تصوير 1-3- کيت جدا سازي DNA………………………………………………………………………………..38

نمودار 1-4-توزيع فراواني جنس در سگ ها مورد بررسي    ……………………………………………44

نمودار2-4-توزيع فراواني سن در سگ هاي مورد بررسي    …………………………………………..45

نمودار3-4-توزيع فراواني نژاد در سگ هاي مورد بررسي…………………………………………………46

نمودار4-4-توزيع فراواني آنمي در سگ هاي مورد بررسي………………………………………………47

نمودار5-4-توزيع فراواني تغييرات لکوسيت ها در سگ هاي مورد بررسي…………………………..48

نمودار7-4-توزيع فراواني سطح گلبول­هاي قرمز خون در سگ هاي مورد بررسي…………………49

نمودار7-4-توزيع فراواني سطح گلبولهاي قرمز خون در سگ هاي مورد بررسي…………………..50

نمودار8-4-توزيع فراواني بيماري در سگ هاي مورد بررسي…………………………………………….51

تصوير1-4-بارگذاري نمونه هاي مثبت……..    ……………………………………………………………………………52

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo