%41تخفیف

تاثیر عصاره معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی (Mentha piperita) بر شاخص های ایمنی، رشد و بازماندگی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) در مواجهه با باکتری یرسینیا راکری (Yersinia ruckeri)

تعداد 23صفحه در فایل word

بهداشت آبزیان

تاثیر عصاره معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی (Mentha piperita) بر شاخص های ایمنی، رشد و بازماندگی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) در مواجهه با باکتری یرسینیا راکری (Yersinia ruckeri)

چکیده

افزايش روز افزون مقاومت­هاي باکتریایی نسبت به آنتی بیوتیک­های تجاری، گرایش به استفاده از گیاهان دارویی به منظور بهبود شاخص­های رشد و تحریک سیستم ایمنی را افزایش داده است. در این مطالعه تاثیر جیره­های غذایی حاوی سطوح مختلف عصاره الکلی و انکپسوله نعناع فلفلی ((Mentha piperita بر شاخص­های رشد، خون، بیوشیمی، ایمنی و میزان بازماندگی ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) در مواجهه با باکتری یرسینیا راکری (Yersinia ruckeri) مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور ماهیان با میانگین وزنی 12/0±2/32 گرم در حوضچه­های فایبرگلاس 1800 لیتری با تراکم 80 عدد ماهی توزیع و طی مدت 8 هفته، تیمارهای مختلف در3 تکرار شامل غذای حاوی سطوح 0، 1، 2 و 3 درصد عصاره الکلی و شکل انکپسوله نعناع فلفلی تغذیه شدند. در انتهای دوره شاخص­های رشد و بازماندگی ماهیان محاسبه شد و از ماهیان خونگیری و شاخص­های خونی، بیوشیمیایی و ایمنی تیمارها مورد مقایسه آماری قرار گرفت. نتایج نشان داد که ماهیان تغذیه شده با سطح 3 درصد شکل انکپسوله نعناع فلفلی، از شاخص­های رشد بهتر و درصد بازماندگی بیشتری در مواجهه با باکتری یرسینیا راکری نسبت به سایر تیمارها برخوردار بودند (05/0P<). نتایج بدست آمده نشان داد که در تعداد گلبول­های سفید و قرمز خون، درصد نوتروفیل و لنفوسیت، میزان هماتوکریت، هموگلوبین، پروتئین تام سرم، Ig تام، میزان فعالیت لایزوزیم سرم و تولید رادیکال آزاد اکسیژن ماهیان تغذیه شده با جیره حاوی عصاره 3% و بویژه در شکل انکپسوله نعناع فلفلی تفاوت معناداری با سایر تیمارها بویژه با تیمار شاهد مشاهده شد. نتایج حاصله مبین آن است که گیاه نعناع فلفلی بویژه در شکل انکپسوله و در غلظت­های بالاتر (2 و 3%)، دارای اثرات تقویت کننده رشد و تحریک کننده سیستم ایمنی غیر اختصاصی در ماهی قزل آلای رنگین کمان بوده است. بنابراین، استفاده از عصاره این گیاه در شکل انکپسوله و با غلظت 3% به عنوان محرک رشد و ایمنی در جیره ماهی قزل آلای رنگین کمان و به منظور افزایش مقاومت ماهیان در برابر باکتری یرسینیا راکری توصیه می­شود.

کلمات کلیدی: قزل آلای رنگین کمان، نعناع فلفلی، عصاره الکلی، شکل انکپسوله، شاخص­های رشد، خونی، بیوشیمیایی، ایمنی، یرسینیا راکری.

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                     صفحه

1-1- مقدمه. 1

1-2- فرضیات پژوهش…. 3

1-3- اهداف پژوهش…. 4

فصل اول: کلیات.. 5

1-4- قزل‌آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) 6

1-4-1-  جایگاه قزل‌آلای رنگین کمان در طبقه بندی علمی 6

1-4-2- ویژگی ظاهری 6

1-4- 3- پراکنش و زیستگاه 7

1-4- 4- دامنه تحمل زیستی.. 7

1-4-5- تاریخچه ورود به ایران.. 7

1-5-  سيستم ايمني در ماهي 8

1-5-1- فاگوسيتوز (Phagocytosis) 9

1-5-2- مونوسيت- ماكروفاژ (لکوسیتهای بیگانه خوار  تک هسته ای) 10

1-5-3- لوكوسيتهاي دانه‌دار 10

1-5-4- ایمونوگلوبولین­ها 11

1-5-5- ليزوزيم. 11

1-5-6- سيستم کمپلمان 12

1-5-7- پروتيين فاز حاد 13

1-6- خون شناسی.. 13

1-6-1- خون.. 14

1-6-2- فیزیولوژی خون 14

1-6-3- مواد متشکله بافت خون.. 15

1-6-4- ترکیبات شیمیایی خون.. 15

1-6-5- شاخص­های سلولی خون 16

1-6-5-1- گلبول­های قرمز. 16

1-6-5-2- هموگلوبولین.. 16

1-6-5-3- گلبول­های سفید. 17

1-6-5-4- لنفوسیت­ها 18

1-6-5-5- مونوسیت­ها 18

1-6-5-6- ائوزینوفیل­ها 19

1-6-5-7- بازوفیل­ها 20

1-6-5-8- نوتروفیل­ها 20

1-6-5-9- انفجار تنفسی.. 21

1-7- سرم خون ماهی و برخی از اجزا و شاخص­های بیوشیمیایی آن.. 22

1-7-1- سرم. 22

1-7-2- پروتئین­های سرم. 23

1-7-3- پروتئین تام. 23

1-7-4- آلبومین.. 23

1-7-5-  گلوبولین.. 24

1-8- محركهاي سيستم ايمني (Immunostomolant) 24

1-8-1- تقويت سيستم دفاعي ماهي با استفاده از محرك­هاي ايمني 25

1-8- 2- مكانيسم عمل محركهاي ايمني.. 26

1-8-3- نحوه و ميزان استفاده از محركهاي ايمني 26

1-8-3- 1- روش تغذيه‌‌اي.. 27

1-8-3- 2- روش تزریق.. 28

1-9- داروهای گیاهی.. 28

1-10-  معرفی گیاه نعناع فلفلی (Mentha piperita) 29

2-10-1- جایگاه نعناع فلفلی در طبقه بندی علمی.. 29

1-10- 2- خصوصیات نعناع فلفلی.. 31

1-11- یرسینیوزیس…. 32

1-11- 1- عامل بیماری.. 32

1-11- 2- میزبانان حساس و مخازن   33

1-11-3- خواص آنتی ژنیكی وسرولوژیكی 33

1-11- 4- علائم كلینیكی.. 34

1-12- کپسوله کردن.. 35

1-12-1- تعاریف و فواید کپسوله کردن در محصولات غذایی.. 35

1-12- 2- مزایای و معایب انکپسوله کردن   36

1-12-3- فرآیندهای کپسوله کردن 36

1-12- 4- پوشش در کپسولاسیون.. 37

1-12-5- ترکیبات کپسوله شده 37

1-12- 6- مورفولوژی (شکل ظاهری) میکروکپسول‌ها 37

1-12- 7- فرایندهای میکروانکپسولاسیون   38

1-12-7- 1- خشک کردن پاششی  38

1-12-7-2-  سرد کردن پاششی و خنک کردن پاششی   39

1-12-7-3- به دام انداختن در لیپوزوم 39

1-12- 7-4-  توده­سازی.. 40

1-12- 7-5- اکستروژن 40

1-12- 7- 6- پوشش­دهی با بستر سیال 41

1-12- 7- 7- خشک کردن انجمادی و خشک کردن با خلاء    42

1-12-8- نانو ذرات 42

1-12- 8-1-  سیستم­های انکپسوله شده بر پایه لیپید 43

1-12- 8-2- انکپسول­هایی بر پایه پروتئین 43

1-12-8-3- انکپسول‌هایی بر پایه مواد معدنی 43

1-12- 8-9-  مکانیسم­های رهایش ساز و کار 43

1-12- 10- معرفي انواع پوشش­هاي مورد استفاده جهت انكپسولاسيون 45

1-12-11- معیارهای انتخاب یک فن آوری کپسول کردن صحیح 46

فصل دوم: پیشینه تحقیق.. 47

2-1- مطالعات انجام شده در ایران.. 48

2-2- مطالعات انجام شده در خارج از ایران.. 54

فصل سوم: مواد و روش­ها 58

3-1- تجهیزات، لوازم مورد نیاز و مواد مصرفی 59

3-2- مکان اجرای آزمایش 59

3-3- وضعیت سالن پرورش  60

3-4- حوضچه­های پرورش 60

3-5- اندازه گیری فاکتورهای فیزیکی و شیمیایی آب.. 61

3-6- ماهی قزل‌آلای رنگین کمان.. 61

3-7- تهیه عصاره الکلی گیاه نعناع فلفلی 61

3-8- انکپسوله کردن عصاره الکلی نعناع فلفلی 62

3-9- تیماربندی.. 63

3-10- تهیه جیره‌های آزمایش 64

3-11- آناليز تقريبي جیره غذایی 66

3-12- دوره پرورش ماهیان 67

3-13- نحوه زیست سنجی 68

3-14- اندازه گیری شاخص­های خونی 69

3-15- اندازه گیری رادیکال آزاد اکسیژن 70

3-16- فاکتورهاي بيوشيميايي خون 71

3-17- اندازه­گيري فعاليت ليزوزيم در سرم خون 72

3-18- مواجهه سازی با باکتری (Challenge) 73

3-19- تجزیه وتحلیل آماری.. 74

فصل چهارم: نتایج.. 75

4-1- تایید شکل انکپسوله نعناع فلفلی.. 76

4-1- 1- تعیین اندازه ذرات توسط دستگاه تعیین کننده اندازه ذرات.. 76

4-1- 2- عکس­برداری از ذرات انکپسوله شده بوسیله میکروسکوپ الکترونی نگاره 77

4-2- نتایج حاصل از بررسی فاکتورهای رشد و بازماندگی 79

4-3- نتایج حاصل از بررسی شاخص­های خونی 80

4-3-1- ماه اول آزمایش 80

4-3-2- انتهای دوره (روز 60) 83

4-4- نتایج مربوط به شاخص­های بیوشیمیایی سرم ماهی قزل آلای رنگین کمان 85

4-4-1- ماه اول آزمایش   85

4-4- 2- انتهای دوره (روز 60) 86

4-5- نتایج مربوط به شاخص­های ایمنی سرم ماهی قزل آلای رنگین کمان.. 87

4-5-1- ماه اول آزمایش 87

4-5-2- انتهای دوره (روز 60) 88

4- 6- نتایج آزمایشات مواجه با باکتری یرسینیا راکری 92

4-7- تایید تشخيص بيماري در ماهیان واجد علائم بالینی یرسینیوزیس 94

فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری                                                                                         96

5-1- تاثیر شکل معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی بر شاخص­های رشد و بازماندگی قزل آلای رنگین کمان  98

5-2- تاثیر شکل معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی بر شاخص­های خونی ماهی قزل آلای رنگین کمان       100

5-3- تاثیر شکل معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی بر شاخص­های بیوشیمیایی   قزل آلای رنگین کمان      102

5-4- تاثیر شکل معمولی و انکپسوله گیاه نعناع فلفلی بر شاخص­های ایمنی ماهی قزل آلای رنگین کمان       104

5-5- نتایج آزمایشات مواجهه ماهیان با باکتری یرسینیا راکری                                                           106

5-6- نتیجه گیری نهایی..                                                                                                         107

5-7- پیشنهاد­های اجرایی..                                                                                                        107                                                                                                                  

5-8- پیشنهاد­های تحقیقاتی..                                                                                                     108                                                                                                                                                       مراجع..                                                                                                                           109

فهرست جدول­ها

عنوان                                                                                                                    صفحه

جدول 1-3- درصد اجزاي تشکيل دهنده و ترکيبات مورد استفاده در جيره­هاي آزمايشي (بر حسب درصد)            65

جدول 2-3- روش انجام کار و دستگاه­هاي مورد استفاده براي آناليز جيره­ي غذايي                              67

جدول 4-1- میانگین شاخص­های رشد و بازماندگی ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای دوره    80

جدول 4-2- میانگین شاخص­های خونی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای روز 30                                                                                                                                                  82

جدول 4-3- میانگین شاخص­های خونی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای دوره    84

جدول 4-4- میانگین شاخص­های بیوشیمیایی ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای روز 30                                                                                                                                85

جدول 4-5- میانگین شاخص­های بیوشیمیایی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای دوره                                                                                                                                            86

جدول 4-6- میانگین شاخص­های ایمنی ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای روز 30                                                                                                                                         88

 جدول 4-7- میانگین شاخص­های ایمنی ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف نعناع فلفلی در انتهای دوره                                                                                                                                      89

جدول 4-8- نتایج رنگ آمیزی و آزمایش­های بیوشیمیایی در باکتری یرسینیا راکری جداسازی شده از ماهیان بیمار  95                                                                                             

فهرست شکل­ها

عنوان                                                                                                                           صفحه

شکل 1-1- ماهی قزل آلای رنگین کمان.. 6

شکل 1-2- گیاه نعناع فلفلی.. 30

شکل 1-3- خونریزی در محوطه دهانی ماهی قزل الای رنگین کمان مبتلا به یرسینیوزیس…. 34

شکل1-4- عوامل فعال در نوع ماتریکس…. 36

شکل 1-5- دستگاه خشک کن پاششی با جریان همسو. 39

شکل 1-6- پوشش دهی با بستر سیال.. 41

شکل 3-1- نمایی از مکان پرورش ماهی (سالن پرورش) 60

شکل 3-2- نمایی از دستگاه تقطیر در خلاء دوار مورد استفاده در این مطالعه. 62

شکل 3-3- غذای تهیه شده جهت پرورش ­ماهی قزل آلای رنگین کمان.. 66

شکل 3-4- خونگیری از ورید ساقه دمی با استفاده از سرنگ استریل 69

شکل 3-5- دستگاه اتوآنالايزر مورد استفاده برای اندازه­گيری شاخص­های بيوشيميايی.. 72

شکل 3-6- مواد شیمیایی مورد استفاده جهت اندازه گیری فعالیت لیزوزیم سرم 73

شکل 3-7- نمایی از سالن مواجهه سازی ماهی قزل آلای رنگین کمان با باکتری یرسینیا راکری.. 74

شکل 4-1- تعیین اندازه ذرات انکپسوله شده نعناع فلفلی (نانومتر) توسط دستگاه تعیین کننده اندازه ذرات  76

شکل 4-2- شکل ظاهری ذرات انکپسوله شده نعناع فلفلی.. 77

شکل 4-3- عکس تهیه شده  از ذرات انکپسوله شده نعناع فلفلی بوسیله میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM)     78

شکل 4-4- میانگین تولید رادیکال آزاد اکسیژن ماهی قزل آلای رنگین کمان (RLU/s) در تیمارهای مختلف از عصاره معمولی و انکپسوله نعناع فلفلی در پایان روزهای 30 و 60 آزمایش…. 90

شکل 4-5- میانگین فعالیت لایزوزیم سرم (میلی گرم در دسی لیتر) ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف از عصاره معمولی و انکپسوله نعناع فلفلی در پایان روزهای 30 و 60 آزمایش 91

شکل 4-6- میانگین ایمونوگلوبولین تام (Ig) (مکیرو گرم در میلی لیتر) ماهی قزل آلای رنگین کمان در تیمارهای مختلف از عصاره معمولی و انکپسوله نعناع فلفلی در پایان روز های30 و 60 آزمایش…. 92

شکل 4-7- میزان مرگ و میر تجمعی (%) ماهی قزل آلای رنگین کمان در گروه­های مختلف آزمایشی تا چهارده روز پس از مواجه با باکتری یرسینیا راکری..    93

شکل 4-8- خونریزی در محوطه دهانی و اطراف فک در ماهی قزل آلای رنگین کمان مواجه شده با باکتری یرسینیا راکری در انتهای دوره     93

شکل 4-9- بیرون زدگی چشم و خونریزی داخل آن در ماهی قزل آلای رنگین کمان مواجه شده با باکتری یرسینیا راکری در انتهای دوره 94

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo