عنوان صفحه |
چکیده……………………………………… 1
فصل اول : کلیات
مقدمه……………………………………… 4
سوالات تحقیق………………………………… 8
فرضیه تحقیق………………………………… 8
اهداف تحقیق………………………………… 8
1-1-مشخصات آزاد ماهیان………………………. 9
1-1-1-رده بندی ماهی قزل آلا…………………… 9
1-1-2-برخی ویژگی های مورفولوژیک و بیولوژیک ماهی قزل آلا 10
1-1-2-1-دستگاه گوارش و اندام های مرتبط………… 10
1-1-3-برخی ویژگی های ماهی قزل آلای رنگین کمان…… 11
1-1-4-پراکنش ماهی قزل آلا در جهان و ایران………. 11
1-1-5-بررسی آماری تولیدات پرورشی ماهی قزل آلا…… 12
1-2-پروبیوتیک چیست؟…………………………. 13
1-2-1-ضرورت استفاده از پروبیوتیک در آبزی پروری…. 14
1-2-2-خطرات مصرف آنتی بیوتیک ها………………. 16
1-2-3-نحوه ی عمل پروبیوتیک ها………………… 16
1-2-3-1-تولید ترکیبات ممانعت کننده……………. 16
1-2-3-2-رقابت بر سر مکان های اتصال……………. 17
1-2-3-3-رقابت جهت جذب و مصرف مواد مغذی………… 17
1-2-4-معیارها و روشهای انتخاب پروبیوتیک……….. 18
1-2-4-1-جمع آوری اطلاعات زمینه ایی…………….. 19
1-2-4-2-تهیه پروبیوتیک………………………. 19
1-2-4-3-ارزیابی توان پروبیوتیک در جهت خارج سازی سویه های بیماری زا………………………………………….. 19
1-2-4-4-ارزیابی امکان بیماریزایی پروبیوتیک…….. 19
1-2-4-5-ارزیابی اثر پروبیوتیک بر میزبان……….. 20
1-2-4-6-تولید انبوه ، ارزیابی سود اقتصادی……… 20
1-3- سیستم ایمنی در ماهیان…………………… 21
1-3-1-ایمنی غیر اختصاصی……………………… 21
1-3-1-1-ایمنی غیر اختصاصی (ترکیبات مایع )……… 22
1-3-1-1-1-لیزوزیم…………………………… 23
1-3-1-1-2-سیستم عامل مکمل (کمپلان ) در ماهیان…… 23
1-3-1-2-ایمنی غیر اختصاصی ( سلولی )…………… 23
1-3-1-2-1-لنفوسیت ها………………………… 23
1-3-1-2-2-نوتروفیل ها……………………….. 24
1-3-1-2-3-ائوزینوفیل ها……………………… 24
1-3-1-2-4-مونوسیت ها………………………… 24
1-3-2-ایمنی اختصاصی…………………………. 24
1-3-2-1-ایمنی همورال………………………… 25
1-3-2-1-1-ایمنوگلوبولین M (IgM)………………. 25
1-3-2-2-ایمنی با واسطه ی سلولی ………………. 25
1-4-اهمیت مطالعات خون شناسی در ماهیان…………. 26
1-4-1-شاخص های خونی…………………………. 26
1-4-1-1-گلبول های سفید (لکوسیت……………….. 26
1-4-1-2-گلبول های قرمز (اریتروسیت ، هموسیت )…… 26
1-4-1-3-شاخص های گلبول قرمز یا اندیس های خونی….. 27
1-4-1-4-هماتوکریت…………………………… 27
1-4-1-5-هموگلوبین…………………………… 27
1-5-شاخص های بیوشیمیایی……………………… 27
1-5-1-پروتئین کل پلاسما و آلبومین……………… 27
1-5-2-گلوکز………………………………… 28
1-5-3-گلوتامیک پیرویک ترانس آمیناز……………. 28
1-6-رابطه عوامل محیطی و میکروفلور دستگاه گوارش…. 28
1-7-باکتری های اسید لاکتیک (LAB)……………… 29
1-7-1-رده بندی علمی…………………………. 30
فصل دوم: سابقه ی تحقیق
2- سابقه ی تحقیق……………………………. 32
فصل سوم: مواد و روش ها
3-1-مکان و زمان انجام تحقیق………………….. 41
3-2-مکان پرورش……………………………… 42
3-3-ذخیره سازی ، سازگاری و تقسیم بچه ماهیان……. 43
3-4-پروبیوتیک مورد آزمایشLactobacillus plantarum…….. 44
3-5-نحوه ی آماده سازی جیره غذایی……………… 44
3-6-زیست سنجی………………………………. 45
3-7-نحوه ی غذادهی…………………………… 45
3-8-بررسی عوامل فیزیکی و شیمیایی آب…………… 46
3-9-بررسی پارامترهای خون شناسی……………….. 46
3-9-1-خون گیری و تهیه سرم……………………. 46
3-9-2-شاخص های خونی…………………………. 47
3-9-2-1-شمارش گلبول های قرمز و سفید…………… 47
3-9-2-2-اندازه گیری هماتوکریت………………… 48
3-9-2-3-اندازه گیری هموگلوبین………………… 49
3-9-2-4-شاخص های گلبول قرمز………………….. 49
3-9-2-5-تشخیص افتراقی گلبول های سفید………….. 50
3-10-فاکتورهای ایمنی………………………… 51
3-10-1-شاخص های بیوشیمیایی ایمنی اختصاصی………. 51
3-10-1-1-اندازه گیری ایمنو گلوبولینM (IgM)…….. 51
3-10-2-شاخص های بیوشیمیایی ایمنی غیر اختصاصی…… 51
3-10-2-1-اندازه گیری فعلیت لیزوزیم……………. 51
3-10-2-2-پروتئین کل سرم……………………… 52
3-11-روش انجام آزمایشات فلور باکتریایی روده در آزمایشگاه 52
3-11-1-روش آماده سازی محیط های کشت……………. 52
3-11-2-روش آماده سازی رقت های محلول روده و کشت اولیه 53
3-11-3-روش شمارش کلنی ها و تقسیم بندی آنها…….. 54
3-12-روش محاسبه شاخص های رشد…………………. 54
3-12-1-اندازه گیری طول و وزن…………………. 54
3-12-2-شاخص وضعیت…………………………… 55
3-12-3-درصد افزایش وزن………………………. 55
3-12-4-ضریب تبدیل غذایی……………………… 55
3-12-5-ضریب رشد ویژه………………………… 55
3-12-6-میانگین رشد روزانه……………………. 55
3-12-7-شاخص کبدی……………………………. 56
3-13-آماده سازی لاشه جهت تجزیه شیمیایی ………… 56
3-14-تجزیه و تحلیل آماری…………………….. 56
فصل چهارم: نتایج
4-نتایج……………………………………. 58
4-1-نتایج حاصل از اندازه گیری عوامل محیطی……… 58
4-1-1-دمای آب………………………………. 58
4-1-2-اکسیژن محلول آب……………………….. 58
4-1-3-pH آب محیط پرورش………………………. 58
4-2-نتایج حاصل از عملکرد رشد بچه ماهیان قزل آلا تحت تاثیر سطوح مختلف پروبیوتیک………………………………….. 59
4-2-1-اثر بر وزن نهایی………………………. 59
4-2-2-اثر بر طول نهایی………………………. 59
4-2-3-اثر بر ضریب تبدیل غذایی………………… 60
4-2-4-ضریب رشد ویژه…………………………. 60
4-2-5-درصد افزایش وزن……………………….. 61
4-2-6-میانگین رشد روزانه…………………….. 61
4-2-7-میزان ضریب چاقی……………………….. 62
4-3-فلور باکتریایی روده ماهیان تیمار و شاهد……. 62
4-3-1-میزان باکتریL.p در فلور روده قزل آلا در محیط کشت MRS 62
4-3-2-توتال کانت باکتریایی روده ماهی قزل آلای رنگین کمان در محیط کشتTSA ……………………………………. 62
4-4-نتایج حاصل از فاکتورهای خونی……………… 63
4-4-1-تعداد گلبول های سفید خون……………….. 63
4-4-2-تعداد گلبول های قرمز خون……………….. 64
4-4-3-غلظت هموگلوبین خون…………………….. 64
4-4-4-درصد هماتوکریت خون…………………….. 65
4-4-5-متوسط حجم گلبول قرمز…………………… 65
4-4-6-متوسط غلظت هموگلوبین سلولی……………… 66
4-4-7-متوسط هموگلوبین گلبول قرمز……………… 66
4-4-8-درصد لنفوسیت………………………….. 67
4-4-9-مقادیر نوتروفیل……………………….. 67
4-4-10-درصد منوسیت………………………….. 68
4-4-11-درصد ائوزینوفیل………………………. 68
4-5-نتایج فاکتورهای سرم……………………… 68
4-5-1-میزان توتال ایمنوگلوبولین سرم خون……….. 69
4-5-2-میزان IgM…………………………….. 69
4-5-3-میزان لیزوزیم سرم خون………………….. 70
4-6-نتایج آنالیز لاشه………………………… 70
4-6-1-درصد رطوبت لاشه………………………… 70
4-6-2-درصد پروتئین لاشه………………………. 71
4-6-3-درصد چربی لاشه…………………………. 71
4-6-4-درصد خاکستر لاشه……………………….. 72
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری
5-بحث……………………………………… 74
5-1-عملکرد رشد……………………………… 74
5-2-فلور باکتریایی روده……………………… 77
5-3-شاخص های خونی…………………………… 78
5-4-شاخص های ایمنی خون………………………. 81
5-4-1-لیزوزیم………………………………. 81
5-4-2-ایمنوگلوبین IgM……………………….. 83
5-5-آنالیز لاشه……………………………… 84
5-6-جمع بندی……………………………….. 86
پیشنهادات …………………………………. 87
منابع……………………………………… 88
پیوست…………………………………….. 107
چکیده انگلیسی……………………………… 121
فهرست جداول
عنوان صفحه |
جدول 3-1: آنالیز تقریبی خوراک استفاده شده در تغذیه بچه ماهیان مورد آزمون……………………………………… 44
جدول4-1: ميانگين دما، اكسيژن محلول و pH آب در مقاطع زماني مشخص در طول دوره بررسی……………………………… 58
جدول 4-2- میانگین وزن نهایی (گرم) در بچه ماهیان قزل آلا در تیمارهای مختلف……………………………………… 59
جدول 4-3- میانگین طول نهایی (سانتیمتر) در بچه ماهیان قزل آلا در تیمارهای مختلف……………………………… 59
جدول 4-4- ميانگين ضريب تبديل غذايي بچه ماهيان قزلآلا در تیمارهای مختلف……………………………………… 60
جدول4-5- ميانگين ضريب رشد ويژه بچه ماهيان قزلآلا در تیمارهای مختلف 60
جدول4-6- ميانگين درصد افزايش وزن بچه ماهيان قزلآلا در تیمارهای مختلف………………………………………….. 61
جدول 4-7- ميانگين رشد روزانه بچه ماهيان قزلآلا درتیمارهای مختلف 61
جدول 4-8- ميانگين میزان ضریب چاقی بچه ماهيان قزلآلا درتیمارهای مختلف………………………………………….. 62
جدول 4-9-میزان پروبیوتیک (لاکتوباسیلوس) در روده ماهیان قزل آلا در محیط کشت MRS…………………………………… 62
جدول4-10-شمارش کلی فلور باکتریایی در روده ماهیان قزل آلا در محیط کشت TSA………………………………………. 63
جدول 4-11-تعدادگلبول های سفید خونی قزل آلا در تیمارهای شاهد وآزمایشی در پایان60روز………………………………. 63
جدول 4-12-تعدادگلبول های قرمز خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان60روز………………………………. 64
جدول 4-13- غلظت هموگلوبین g/dl)) خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان60
روز……………………………………….. 64
جدول 4-14- درصد هماتوکریت % خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 65
جدول 4-15- متوسط حجم گلبول قرمز خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60
روز………………………………………. 65
جدول 4-16- متوسط غلظت هموگلوبین سلولی خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان
60 روز……………………………………. 66
جدول 4-17- متوسط هموگلوبین گلبول قرمز خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان
60 روز……………………………………. 66
جدول4-18- درصد لنفوسیت خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 67
جدول4-19-درصد نوتروفیل خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 67
جدول4-20-درصد منوسیت خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز…………………………………….. 68
جدول4-21-درصد ائوزینوفیل خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 68
جدول4-22-توتال ایمنوگلوبولین سرم خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60
روز………………………………………. 69
جدول4-23-میزان IgM سرم خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 69
جدول4-24-میزان لیزوزیم سرم خون قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 70
جدول4-25-درصد رطوبت لاشه قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز…………………………………….. 70
جدول4-26-درصد پروتئین لاشه قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 71
جدول4-27-درصد چربی لاشه قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز…………………………………….. 71
جدول4-28-درصد خاکستر لاشه قزل آلا در تیمارهای شاهد و آزمایشی در پایان 60 روز……………………………….. 72
فهرست شکل ها
عنوان صفحه |
