تاثیرات کلروتالونیل بر برخی از پاسخ‌های فیزیولوژیکی و رفتاری در کرم خاکی آیزنیا فتیدا      

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                                    شماره صفحه         

فصل اول. 1

1- مقدمه. 1

1-1- مقدمه. 1

1-2- آسیب‌ها و اختلالات اندوكراينی. 2

1-2-1-گیرنده‌های هسته‌های شرکت‌کننده در سميت آفت‌کش‌ها 3

1-2-2- ساز و کار نارسایی‌های درون‌ریز در اثر آفت‌کش‌ها 4

1-2-1- اتصال مستقيم به گیرنده‌های هسته‌ای هورمون. 5

1-2-2-2- رقابت گزنوسنسورهاي ایجادکننده‌ی اختلالات اندوكرايني بر فعال‌کننده‌های كمكی. 6

1-2-2-3- اختلالات تنظيم متابولیسم‌های هورموني. 6

1-2-2-4- اختلالات تنظيمي ثبات.. 8

1-2-2-5-اجزاي پاسخ گزنوبيوتيک مهاري.. 8

1-2-3- اختلالات اندوكراين به‌عنوان يكي از مکانیسم‌های دخيل در سرطان‌زایی به‌وسیله‌ی آفت‌کش‌ها 9

1-3- پاسخ به‌واسطه‌ی اكسيدانت ها به آفت‌کش‌ها. 9

1-3- 1- مروري بر سميت اكسيژن و دفاع‌های آنتی‌اکسیدانی. 10

1-3-2- استرس اكسيداتيو و مرگ سلولي. 12

1-3-2-1- انواع مرگ سلولي. 12

1-3-2-2-استرس اکسیداتیو. 13

1-3-2-3- استرس اکسیداتیو و اتوفاژی.. 13

1-3-2-4- استرس اکسیداتیو و نکروزیس.. 14

1-3-2-5- رادیکال آزاد 14

1-3-2-6- آسیب‌های سلولی ناشی از رادیکال های آزاد عبارت‌اند 15

1-3-2-7- آنتی‌اکسیدان‌ها 15

1-4- آفت‌کش‌ها. 17

1-4-1-ویژگی‌های آفت‌کش ایده آل. 18

1-4-2-اثر آفت‌کش بر محیط‌زیست.. 18

1-5- طبقه‌بندی قارچ‌کش‌ها. 19

1-5-1-طبقه‌بندی بر اساس منشا قارچ‌کش‌ها 19

1-5-1-1 – قارچ‌کش‌ها بر اساس نوع فعالیت آن‌ها به گروه‌های زیر تقسیم‌بندی می‌شوند 19

1-5-1-2-مدل‌های عمل. 19

1-5-2-سمیت قارچ‌کش‌ها 22

1-6-  كلروتالونيل. 22

1-7- کرم‌های خاکی مهندسین زمین‌های حاصلخیز. 24

1-7-1-رده‌بندی کرم‌های خاکی. 25

1-7-1-ویژگی‌های عمومی کرم‌های خاکی : 26

1-7-2-1-ویژگی‌های ظاهری کرم‌های خاکی. 26

1-7-2-2-دستگاه گوارش در کرم‌های خاکی. 27

1-7-2-3-نقش کرم‌های خاکی در پزشکی. 29

فصل دوم 30

2- مواد و روش‌ها 30

2-1- تهیه و آماده سازی کرم‌های خاکی موردمطالعه. 30

2-2-تهيه و آماده سازی خاک موردنیاز :. 30

2-3- آفت‌کش مورداستفاده:. 31

کلروتالونیل قارچ‌کش مورداستفاده در این آزمایش بود و از  شرکت آریا شیمی تهیه گردید. این آفت‌کش دارای مشخصات زیر می‌باشد.. 31

2-4- روش تعیین LC50. 31

2-5- تیمار کرم‌های خاکی:. 31

2-6- مراحل مربوط به آماده سازی و تهيه‌ی عصاره‌ی بافتی و مايع سلومی از کرم‌های خاکی قرمز:. 31

2-6-1-استخراج و تهیه مایع سلومی: 32

2-6-2- تهيه‌ی هوموژنيت: 32

2-7- مراحل انجام آزمايش سنجش MDA (اندازه‌گیری پراکسیداسیون لیپیدها)  33

2-7-1- نحوه ی تهيه محلول يک درصد TBA (درسود  0/05نرمال) : 34

2-7-2- نحوه ی تهيه محلول 10 درصد TCA : 34

2-8- مراحل انجام آزمايش سنجش فعاليت کاتالاز. 34

2-9- تهیه برش مقطع عرضی کرم‌های خاکی جهت بررسی بافت شناسی. 34

2-10- اندازه گیری فعالیت آنتی‌اکسیدان‌های تام (TAC) مایع سلومی کرم‌های خاکی به روش احیای آهن فریک (FRAP). 35

2-10-1- مبانی روش FRAP: 35

2- 10-1- روش کار. 35

2-11- تست گریز از محل (ISO, 2008): 35

2-12: تجزیه و تحلیل آماری داده‌ها. 37

فصل سوم 38

3-نتایج. 38

3-1- مقدار و محاسبه LC50. 38

3-2: نتایج مربوط به آزمایشات سنجش میزان MDA (پراکسیداسیون لیپیدها) در عصاره‌ی کل بدن کرم‌های خاکی Eisenia foetida. 38

3-3 : نتایج مربوط به آزمایش و بررسی تغییرات فعالیت ویژه کاتالاز در عصاره‌ی کل بدن کرم‌های  خاکی. 39

3-4- نتایج مربوط به آزمایش و بررسی تغییرات توان آنتی‌اکسیدانی‌تام‌(TAC) به کمک روش FRAP در مایع سلومی کرم‌های خاکی تیمارشده با غلظت‌های متفاوت از کلروتالونیل در دو دوره‌ زمانی 5 و 7 روزه. 40

3-4 : نتایج مربوط به تست گریز از محل کرم‌های خاکی تیمار شده با غلظت‌های مختلف از کلروتالونیل در یک دوره تیمار 48 ساعته:. 42

3-5 : نتایج مربوط به بررسی‌های میکروسکوپی (هیستوپاتولوژی) مقطع عرضی کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل در دوره‌‌های زمانی متفاوت. 43

فصل چهارم 47

بحث و نتیجه گیری.. 47

4-1- مقدمه. 47

4-2- بحث و نتیجه گیری در مورد تغییرات محتوای پراکسیداسیون لیپیدها (LPO) در عصاره ی کل بدن کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل:. 49

4-3- بحث و نتیجه گیری در ارتباط با تغییرات فعالیت ویژه ی کاتالاز در کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل:. 50

4-4-بحث و نتیجه گیری در ارتباط با تغییرات توان آنتی‌اکسیدانی تام (( TAC مایع سلومی کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل. 52

4-5-بحث و نتیجه گیری در ارتباط با تست گریز از محل کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل در دوره ی زمانی 48 ساعته:. 53

4-6-بحث و نتیجه گیری در ارتباط با مشاهدات هسیتوپاتولوژیک مقاطع عرضی کرم‌های خاکی تیمار شده با کلروتالونیل :. 54

پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………….. 57

منابع. 58

 

 

 

 

 

 

فهرست شکل‌ها

عنوان                                                                                                                                    شماره صفحه

 

شکل 1-1مكانیسم اختلال اندوکراینی بواسطه ی رسپتور……….. .5

 شكل1-2مكانیسم­های­غیرمستقیم­اختلال­اندوکراینی­بواسطه­رسپتور….. .7

 شكل1-3-آفت­کش­ها­و­ایجاد­استرس­و­مرگ­سلولی………………….. .12

 شکل1-4-ساختار­يک­سلول­قارچی…………………………… 20

شکل1-5- مدل های عمل قارچ کش ها………………………. 21

 شکل 1-6 ساختار بیوشیمیایی کلروتالونیل  ………………  23

 شکل1-7  نمایی ظاهری از کرم خاکی (ایزنیا فتیدا)……….. 26

 شکل1-8 نمایی از قسمت های مختلف دستگاه گوارش در کرم خاکی.. .28

 شکل 2-1   طرز جمع آوری مایع سلومی از کرم‌های خاکی به کمک شوک الکتریکی(عکس از پژوهشگر)………………………………………….. 32

 شکل 2-2 تهیه‌ی هوموژنيت با استفاده از هوموژنايزر برقي در محيط يخ دار(عکس از پژوهشگر)………………………………………….. 33

 شکل 2-3 ظروف آماده شده جهت تست گريز از محل با دو خاک شاهد و آلوده به آفت‌کش(عکس از پژوهشگر)……………………………………….. 37

 شکل3-1: نتایج آزمایش سنجش فعالیت ویژه کاتالاز در عصاره کل بدن کرم‌های خاکی تیمار شده با غلظت‌های متفاوت از کلروتالونیل در دو دوره زمانی 5 و 7 روزه     40

شکل3-3: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار5 روزه قارچ‌کش کلروتالونیل 43

شکل3-4: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار7 روزه قارچ‌کش کلروتالونیل .44

شکل3-5: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار 5 روزه قارچ‌کش کلروتالونیل     45

شکل3-6: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار7 روزه قارچ کش کلروتالونیل     46

شکل3-7: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار 5 روزه قارچ‌کش کلروتالونیل     47

شکل3-8: مقطع عرضی کرم‌های خاکی با تیمار 7 روزه قارچ کش کلروتالونیل    48

 

 

 

فهرست جدول

عنوان                                                                                                           شماره صفحه

 

جدول 1-1: رده بندی سه گروه از کرم های خاکی مورد مطالعه در پژوهش های علمی   26

جدول3-1: اثر غلظت‌های مختلف از قارچ کش کلروتالونیل بر تغییرات میزان پراکسیداسیون لیپید‌ها در دوره‌ی زمانی 5 و 7 روزه در عصاره‌ی کل بدن کرم‌های خاکی Eisenia foetida  39

جدول 3-2: اثر غلظت‌های مختلف از قارچ کش کلروتالونیل بر تغییرات توان آنتی اکسیدانی تام مایع سلومیک کرم‌های خاکی Eisenia foetida دردوره‌ی زمانی 5 و 7 روزه 41

جدول 3-3: نتایج آزمایش گریز از محل کرم‌های خاکی در تیمار با غلظت‌های مختلف از کلروتالونیل  در طی یک دوره 48 ساعته………………….. 42