%53تخفیف

بررسی پویایی تغییرات ضربان قلب به روش آمار وارون در موش صحرایی نر نژاد اسپراگ دالی مبتلا به سیروز کبدی

تعداد132 صفحه در فایل word

مطالعات اخیر انسانی بر روی بیماران مبتلا به سیروز نشان داده است که احتمال توزیع رویدادهای نادر در سری زمانی ریتم این بیماران، غیرتصادفی تر از انسان های سالم است، ولی مشخص نیست که این تغییرات مشاهده شده در ریتم قلبی بیماران سیروزی بخاطر اشکال در سیستم اتونوم می باشد یا اشکال در فعالیت ذاتی ضربان ساز قلبی است. آمار وارون روشی است که توزیع احتمال دیده شدن رویدادهای نادر (مثل تاکیکاردی و برادیکاردی) را مورد بررسی قرار می دهد. علاوه بر این در مبتلایان به سیروز ابتلا به انواع عفونت ها از جمله عفونت خون یا سپسیس بسیار شایع است که پیش آگهی مرگ این بیماران است. از آنجا که منشا اشکالات مشاهده شده در ریتم قلبی بیماران سیروزی مبتلا به سپسیس مشخص نیست، مطالعه حاضر به منظور بررسی منشا اشکالات مشاهده شده در ریتم قلبی موش های سیروزی مبتلا به سپسیس با استفاده از روش آمار وارون انجام شد. مطالعه در دو فازin vivo و in vitro طراحی شد. در فاز in vivo برای ثبت الکتروکاردیوگرام از تکنیک تلمتری استفاده شد و سپس حیوانات دچار سیروز کبدی و سالم از نظر تغییرات پایه ضربان قلب و همچنین از نظر پاسخ دهی به اندوتوکسین (لیپوساکارید باکتری) با هم مقایسه شدند. در فاز in vitro قلب حیوانات سالم و سیروتیک در بساط لانگندورف ایزوله شده و از نظر تغییرات دینامیکی گره سینوسی دهلیزی مورد بررسی قرار گرفتند. میزان بیان گیرنده اندوتوکسین (TLR4) در دهلیز حیوانات دچار سیروز و سالم با هم مقایسه شد. مطالعات تلمتری نشان داد که حیوانات سیروتیک در پاسخ به اندوتوکسین تغییرات دینامیکی ضربان قلب از خود نشان می دهند و آنالیز آمار وارون افزایش طول خاطره را در این گروه از موش ها نشان داد، این تغییرات در طول خاطره حیوانات سالم مشاهده نشد. نتایج مطالعات در قلب های ایزوله بر گرفته شده از حیوانات سالم و سیروتیک نشان داد که طول خاطره در ریتم قلب این دو گروه چه در حالت پایه و چه در حالت بعد از تزریق اندوتوکسین تغییر چشمگیری نمی کند. این یافته ها نشان می دهد که اشکالات مشاهده شده در ریتم قلبی حیوانات سیروزی مبتلا به سپسیس احتمالا به علت اشکال در ساختار یا عملکرد سیستم اتونوم می باشد.

واژه های کلیدی: سیروز، سپسیس، تغییرات ضربان قلب، آمار وارون، موش صحرائی

دسته: زیست شناسی, علوم تجربی برچسب: آمار وارون, تغییرات ضربان قلب, سپسیس, موش صحرائی, واژه های کلیدی: سیروز

توضیحات

فهرست مطالب

فصل اول.. 1

مقدمه.. 1

1-1 کلیات مقدمه.. 2

1-2 تغییرات ضربان قلب.. 4

1-2-1 مروری تاریخی بر مفهوم HRV.. 4

1-2-2 تعریف HRV.. 5

1-2-3 سری زمانی ضربان قلب.. 5

1-2-4 اهمیت و مکانیسم های فیزیولوژیکHRV.. 7

1-2-5 اهمیت HRV در تشخیص بیماری ها.. 9

1-3 روش های اندازه گیری HRV.. 10

1-3-1 روش Sample Entropy (SampEn) 11

1-3-2 روش تحلیل نوسانات بی روند شده(DFA) 12

1-3-3 روش آمار وارون.. 15

1-3-3-1 آمار وارون.. 16

1-3-3-2 بر زدن.. 18

1-3-3-3 طول خاطره (طول حافظه).. 20

1-4 سیروز.. 21

1-4-1 مکانیسم ایجاد فیبروز در سیروز.. 21

1-4-2 علل عمده مرگ و میر در سیروز.. 22

1-4-3 اهمیت HRV در سیروز.. 24

1-4-5 آنسفالوپاتی کبدی.. 25

1-5 فرضیه مطالعه.. 27

1-6 اهداف پژوهش.. 27

فصل دوم.. 28

مواد و روش ها.. 28

2-1 حیوانات مورد آزمایش.. 29

2-2 روش مطالعه حیوانات در فاز in vivo. 29

2-2-1 ایجاد سیروز کبدی در حیوانات مطالعاتی.. 30

2-2-2 مطالعه تله متری و روش کاشت پروپ تله متری در بدن موش 32

2-3 روش مطالعه حیوانات در فاز in vitro. 36

2-3-1 مطالعه قلب ایزوله.. 36

2-4 روش های تحلیل سیگنالهای فیزیولوژیک قلب.. 52

2-5 مطالعات مولکولی.. 53

2-5-1 نمونه برداری و استخراج RNA.. 53

2-5-2 ساخت cDNA.. 53

2-5-3 واکنش زنجیره ایی پلیمراز کمی (qRT-PCR) 54

2-5-3-1 تعیین دمای اتصال پرایمر به cDNA.. 54

2-5-3-2 آماده کردن نمونه ها جهت انجام PCR.. 55

2-6 آنالیز آماری.. 59

3-1 بررسی القای سیروز در حیوانات BDL.. 61

3-2 نتایج مطالعات in vivo. 62

3-2-1 بررسی اثر اندوتوکسین (LPS) بر روی ضربان قلب و شاخص های تغییرات ضربان قلب (HRV) در موش های صحرائی هوشیار سالم و سیروتیک 62

3-2-2 مقایسه ضربان قلب و شاخص های تغییرات دینامیکی ضربان قلب در گروه موش های سالم و سیروتیک قبل از تزریق اندوتوکسین 62

3-2-3 مقایسه طول خاطره کند شونده (∆B≥ρ) و طول خاطره تند شونده (∆B≤-ρ) در موش های سالم و سیروتیک هوشیار قبل از تزریق LPS 64

3-2-7 اثر اندوتوکسین بر ضربان قلب (HR) در موش های صحرائی هوشیار سالم و سیروتیک.. 65

3-2-8 اثر اندوتوکسین بر شاخص SDNN موش های هوشیار سالم و سیروتیک.. 66

3-2-9 اثر اندوتوکسین برمیزان بی نظمی ضربان قلب (Sample Entropy)موش های هوشیار سالم و سیروتیک.. 67

3-2-10 اثر اندوتوکسین برساختار فراکتالی ضربان قلب (DFA)موش های هوشیار سالم و سیروتیک.. 68

3-2-11 بررسی طول خاطره (memory length) کند شونده (∆B≥ρ) در گروه موش های سالم هوشیار بعد از تزریق LPS. 69

3-2-12 بررسی طول خاطره (memory length) تند شونده (∆B≤-ρ) در گروه موش های سالم هوشیار بعد از تزریق LPS. 71

3-2-13 بررسی طول حافظه (memory length) کند شونده (∆B≥ρ) در گروه موش های موش های سیروتیک هوشیار بعد از تزریق LPS 73

3-2-14 بررسی طول حافظه تند شونده (∆B≤-ρ) در گروه موش های سیروتیک هوشیار بعد از تزریق LPS. 75

3-3 نتایج مطالعات in vitro. 78

3-3-1 اثر اندوتوکسین بر میزان ضربان قلب ایزوله موش های سالم و سیروتیک.. 78

3-3-2 اثر اندوتوکسین بر میزان ضربان قلب ایزوله موش های سالم و سیروتیک.. 79

3-3-3 اثر اندوتوکسین برمیزان بی نظمی (Sample Entropy) ضربان قلب ایزوله موش های سالم و سیروتیک.. 80

3-3-4 اثر اندوتوکسین بر ساختار فرکتالی ضربان های قلب ایزوله (تحلیل نوسانات بی روند شده) در موش های سالم و سیروتیک 81

3-3-5 بررسی طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ) و تند شونده (∆B≤-ρ) درقلب ایزوله گروه موش های کنترل و سیروتیک قبل از تزریق LPS 83

3-3-6 بررسی طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ) و تند شونده (∆B≤-ρ) در قلب ایزوله گروه موش های سالم بعد از تزریق LPS. 84

3-3-7 بررسی طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ) و تند شونده (∆B≤-ρ) در قلب ایزوله گروه موش های سیروتیک بعد از تزریق LPS. 85

3-4 نتایج مطالعات مولکولی.. 86

4-1 بحث.. 88

4-2 نتیجه گیری.. 93

4-3 پیشنهادات.. 94

منابع.. 95

ضمیمه الف.. 103

ضمیمه ب.. 106

فهرست اشکال

شکل 1-1. برخی از اتفاقات مهم در کشف مفهوم HRV در طول زمان 5

شکل 1-2. تغییرات ضربان قلب در الکتروماردیوگرام ثبت شده از یک سگ هوشیار.. 6

شکل 1-3. تغییرات ضربان قلب در حالت سلامت و بیماری.. 6

شکل 1-4. برگ سرخس نمونه ایی از فرکتال هندسی در طبیعت 14

شکل 1-5. سری زمانی قلبی نمونه ایی از فرکتال تصادفی.. 14

شکل 1-6. احتمال توزیع زمان خروج(τ) مورد نیاز برای مشاهده اتفاقات نادر تند شونده یا کند شونده با یک آستانه مشخص (ρ) در سری زمانی اصلی و بر زده (B_t) نشان می دهد… 19

شکل 1-7. A. کبد سالم و سلول های کبدی در حالت سلامت را نشان می دهد. B. کبد سیروزی در حالت فیبروزی و تغییرات در سلول های کوپفر و سلول های ستاره ایی را نشان می دهد… 22

شکل 1-8. پاتولوژی مولکولی فیبروز کبدی .. 26

شکل 1-9. عبور آمونیاک و منگنز از سد خونی مغزی باعث استرس اکستداتیو و اختلال در عملکرد مغز.. 27

شکل 2-1. بساط جراحی BDL.. 31

شکل 2-2.A) پروب تلمتری B) طریقه کاشت پروب در بدن حیوان C) سیستم Powerlab برای ثبت ECG.. 34

شکل2-3. نمونه ایی از ثبت ECG با استفاده از پروب تلمتری در موش هوشیار.. 35

شکل 2-4. اطاق لانگندورف برای ثبت سیگنال قلب ایزوله.. 40

شکل 2-5. جراحی قلب ایزوله جهت کانول گذاری در آئورت.. 41

شکل2-6. ایزوله کردن آئورت با استفاده از نخ مخصوص و قرار دادن بافت قلب روی یخ.. 42

شکل 2-7. گرفتن آئورت با استفاده از پنس جراحی جهت کانول گذاری 43

شکل 2-8. برش قوس آئورت با استفاده از قیچی جراحی جهت انجام کانول گذاری.. 44

شکل 2-9. ایجاد شکاف در قوس آئورت جهت انجام کانول گذاری 45

شکل 2-10. کانوله کردن آئورت.. 46

شکل 2-11.پایین بردن کانول به داخل قلب جهت گره زدن نخ 47

شکل 2-12. گره زدن نخ جهت تثبیت کانول به آئورت.. 48

شکل 2-13. پرفیوز کردن محلول نمکی فیزیولوژیک به قلب کانوله شده 49

شکل 2-14. قرار گیری قلب ایزوله شده در جایگاه مخصوص بساط لانگندورف جهت ثبت سیگنال قلبی با استفاده از الکترود های دهلیزی و بطنی 50

شکل 2-15. نمونه ایی از ثبت سیگنال قلب ایزوله.. 51

شکل 2-16. منحنی مراحل تولید محصول PCR.. 56

شکل 2-17. انجام Real time PCR… 58

فهرست نمودار ها

نمودار 3-1. مقایسه وزن طحال در گروه موش های سالم و سیروتیک.. 61

نمودار 3-2. A) مقایسه HR در گروه موش های سیروتیک با گروه موش های سالم… 63

نمودار 3-3. طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ)و تند شونده (∆B≤-ρ) به ازای سطوح متفاوت رویداد نادر در گروه موش های سیروتیک با گروه موش های کنترل در زمان 30 دقیقه قبل از تزریق LPS. 64

نمودار 3-4. A) اثر تزریق داخل صفاقی LPSبا دوز 1mg/kg بر ضربان قلب موش های سالم و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است. B) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر ضربان قلب موش های سیروتیک 65

نمودار 3-5. A) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شاخص SDNN موش های سالم و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است. B) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شاخص SDNN موش های سیروتیک و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است… 66

نمودار 3-6. A) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شاخص Sample entropy موش های سالم و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است .B) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شاخص Sample entropy موش های سیروتیک و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است. 67

نمودار 3-7. A) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شیب خط (α)درگروه موش های سالم و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است.B) اثر تزریق داخل صفاقی LPS با دوز 1mg/kg بر شیب خط) (α موش های سیروتیک و در گروه کنترل نرمال سالین استریل تزریق شده است 68

نمودار 3-8. اثر تزریق سالین و LPS با دوز 1mg/kg بر طول خاطره کند شونده (∆B≥ρ) در گروه موش های سالم.. 70

نمودار 3-9. اثر تزریق سالین و LPS با دوز 1mg/kg بر طول خاطره تند شونده (∆B≤-ρ) در گروه موش های سالم.. 72

نمودار 3-10. اثر تزریق سالین و LPS با دوز 1mg/kg بر طول خاطره کند شونده (∆B≥ρ) موش های سیروتیک.. 74

نمودار 3-11. اثر تزریق سالین و LPS با دوز 1mg/kg بر طول خاطره تند شونده (∆B≤-ρ) در گروه موش سیروتیک.. 76

نمودار 3-12. اثر تزریق داخل صفاقی LPSبا دوز 1mg/kg بر ضربان قلب ایزوله در دو گروه موش های کنترل و سیروتیک. 1 ساعت بعد از تزریق قلب ایزوله شد… 78

نموار 3-13. اثر تزریق داخل صفاقی LPSبا دوز 1mg/kg بر SDNN قلب ایزوله در دو گروه موش های کنترل و سیروتیک.1 ساعت بعد از تزریق قلب ایزوله شد… 79

نمودار 3-14. اثر تزریق داخل صفاقی LPSبا دوز 1mg/kg بر SampEn قلب ایزوله در دو گروه موش های کنترل وسیروتیک. 1 ساعت بعد از تزریق قلب ایزوله شد… 80

نمودار 3-15. رابطه لگاریتم مقیاس به لگاریتم تغییرات در هر چهار گروه خطی می باشد که نشانگر فرکتال بودن سری زمانی قلبی است. 81

نمودار 3-16. اثر تزریق داخل صفاقی LPSبا دوز 1mg/kg بر ساختار فرکتالی قلب ایزوله در دو گروه موش های کنترل وسیروتیک. 1 ساعت بعد از تزریق قلب ایزوله شد… 82

شکل 3-17. طول خاطره کند شونده (∆B≥ρ) و تند شونده (∆B≤-ρ) قلب موش های سالم و سیروتیک در حالت ایزوله قبل از تزریق LPS. 83

نمودار 3-18. A) مقایسه طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ) به ازای سطوح متفاوت اتفاقات نادر بعد از تزریق LPS در گروه موش های سالم (B .مقایسه طول حافظه تند شونده (∆B≤-ρ) به ازای سطوح متفاوت اتفاقات نادر بعد از تزریق LPSدر گروه موش های سالم.. 84

نمودار 3-19. A) مقایسه طول حافظه کند شونده (∆B≥ρ) به ازای سطوح متفاوت اتفاقات نادر در گروه موش های سیروتیک بعد از تزریق .LPS B) مقایسه طول حافظه تند شونده (∆B≤-ρ) به ازای سطوح متفاوت اتفاقات نادر در گروه موش های سالم بعد از تزریق LPS. 85

نمودار 3-20. داده های خام حاصل از qRT- PCR ژن TLR4 و ژن خانه دار 18S. 86

نمودار 3-21. مقایسه میزان بیان ژن TLR4 در موش های سیروتیک و موش های سالم… 86

فهرست جدول ها

جدول 2-1. ترکیب محلول نمکی فیزیولوژیک (PSS) 39

جدول 2-2. مشخصات پرایمرهای TLR4و 18S. 54

امتیاز 0 از 5 از 0 دیدگاه

قیمت اصلی 45,000 تومان بود.قیمت فعلی 21,000 تومان است.

تاریخ ایجاد آذر 9, 1399
تاریخ بروزرسانی اسفند 13, 1401
فروش 0
دیدگاه 0

شرایط استفاده از محصول

تمام محصولات به ازای پرداخت پروژه تنها قابل استفاده می باشند. این بدین معنی است که برای استفاده از یک یا چند محصول ، لازم به خرید آن محصول است.

مزایای خرید این محصول:

دسترسی به فایل به صورت همیشگی
پشتیبانی رایگان
پشتیبانی 24 ساعته محصول
بازگشت وجه در صورت عدم رضایت مشتری

مشاهده قوانین سایت