%46تخفیف

بررسی وضعیت نئوسپوروزیس در گوساله های به ظاهر سالم

تعداد77 صفحه در فایل word

گروه آموزشيپاتوبیولوژی

کارشناسی ارشد در رشته انگل شناسی دامپزشکی

 

بررسی وضعیت نئوسپوروزیس در گوساله های به ظاهر سالم

 

چكيده:

               نئوسپورا کانینوم یک تک یاخته داخل سلولی اجباری از شاخه آپی کمپلکسا است که باعث ایجاد سقط جنین در گاوها و فلجی عصبی عضلانی در اندام های خلفی سگ ها می شود. برای اولین بار در سال 1984 از سگ های بیمار در نروژ گزارش گردید. هدف از این مطالعه بررسی وضعیت نئوسپوروزیس در گاوها و گوساله های به ظاهر سالم متولد شده از آن ها با استفاده از روش الایزا و PCR بود. 98 نمونه خون شامل 49 راس گاوها و 49 راس گوساله متولد شده آن ها قبل از خوردن آغوز در یکی از گاوداری های استان قزوین جمع آوری شد. نمونه های سرم گاوها و گوساله ها با روش الایزای غیر مستقیم برای یافتن آنتی بادی ضد نئوسپورا کانینوم و روش هایPCR  وnested- PCR  برای یافتنDNA  نئوسپورا کانینوم در نمونه های سرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. بر پایه آزمایشات الایزا، PCR و nested-PCR، از 49 نمونه مربوط به گاوها 14 نمونه(57/28%) و از 49 نمونه مربوط به گوساله ها 6 نمونه (24/12%) مثبت بودند. این نتایج انتقال عمودی نئوسپورا را در میان مادران آلوده، 84/42% نشان می دهد.

واژه­های کلیدی:  نئوسپورا کانینوم، الایزا، PCR، nested-PCR، انتقال عمودی

 

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                                       صفحه

مقدمه.. 1

فصل اول کلیات.. 3

1-1- تاریخچه 3

1-2- طبقه بندی انگل نئوسپورا (هیمفیل، 1999) 4

1-3- سیرتکاملی 4

1-4- آنتی ژن­های انگل 7

1-5- شباهت ها و تفاوت های نئوسپورا کانینوم با سایر انگل­ها 8

1-5-1- نئوسپورا هوقسی: 8

1-5-2- توکسوپلاسما گوندیی: 9

1-5-3- هاموندیا هیدورنی: 9

1-6- انتقال انگل 9

1-7- نشانه-های بالینی 11

1-7-1- گاو 11

1-7-2- گوسفند 12

1-7-3- اسب 12

1-7-4- بز 13

1-7-5- سگ 13

1-7-6- گربه 13

1-7-7- انسان 13

1-8- بیماری زایی 14

1-9- اهمیت و خسارت اقتصادی نئوسپوروزیس 14

1-10- عوامل مستعد کننده 15

1-10-1- میزبان نهایی 15

1-10-2- سایر گوشتخواران 16

1-10-3- میزبانان واسط به غیر از گاو 16

1-10-4- چراگاه، علوفه و آب آشامیدنی 16

1-10-5- سن گله 16

1-10-6- خوردن شیر یا آغوز 17

1-10-7- اندازه و جمعیت گله 17

1-10-8- تراکم گله 17

1-10-9- منبع جایگزینی گوساله­های ماده 17

1-10-10- آب و هوا 17

1-10-11- تراکم جمعیت انسانی 18

1-10-12- فصل و نژاد 18

1-10-13- عوامل مرتبط با آنتی بادی ضد سایر عوامل عفونی 18

1-10-14- پرورش 18

1-10-15- زمان آلودگی مادر 18

1-11- یافته­های کالبد گشایی 19

1-12- ایمنی 19

1-13- روش­های تشخیصی 20

1-13-1- روش­های سرم شناسی 21

1-13-3- الایزا 22

1-13-4- آگلوتیناسیون مستقیم 23

1-13-5- روش­های تشخیص بافتی 23

1-13-6- تکنیک­های ملکولی 25

1-13-7- تلقیح به حیوانات آزمایشگاهی 26

1-13-8- روش کشت سلولی 27

1-14- کنترل و پیشگیری 27

1-14-1- پیشگیری و کنترل نئوسپوروزیس در گاوداری های سالم 27

1-14-2- پیشگیری و کنترل نئوسپوروزیس در گاوداری های آلوده 28

1-15- درمان 29

1-16- پیشرفتهای ایمن سازی 30

1-17-پیشینه تحقیق 31

فصل دوم: مواد و روش کار.. 33

2-1- نمونه گیری 33

2-2- آزمایش الایزا 33

2-2-1- وسایل مورد نیاز برای انجام الایزا: 33

2-2-2- روش کار الایزای غیر مستقیم 33

2-3- واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) 35

2-3-1- وسایل مورد نیاز برای انجام PCR 35

2-3-2- طراحی پرایمرها PCR 36

2-3-3- طراحی پرایمرهای PCR nested- 36

2-3-4- روش کار PCR 36

2-3-5- روش کار  PCRو nested-PCR 37

2-4- الکتروفورز DNA روی ژل آگارز 38

2-4-1- وسايل مورد نياز در الكتروفورز 38

2-4-2- مواد مورد نياز 38

2-4-3- روش کار: 39

2-4-4- روش انجام آزمایش 40

فصل سوم: نتایج و بحث.. 41

3- نتایج.. 41

3-1- نتایج الایزا 41

3-2- نتایج PCR 42

3-3- نتایج nested-PCR 42

بحث 46

پیشنهادات 51

منابع.. 52

فهرست شکل ها

تصویر 1-1- چرخه زندگی نئوسپورا کانینوم (گودسفن و همکاران، 2013).   6

تصویر 1-2- چرخه های انتقال افقی و عمودی نئوسپورا (دوبی و همکاران، 2007).   11

تصویر 3-1 شناسایی DNA نئوسپورا کانینوم با استفاده از روش PCR: ستون(1) کنترل منفی، ستون(2) DNA  مارکر، ستون (3) کنترل مثبت، ستون(4) نمونه مثبت گاوی، ستون (5) نمونه مثبت گوساله.. 42

تصویر 3-2- شناسایی DNA نئوسپورا کانینوم با استفاده از روش nested-PCR: ستون(1) کنترل منفی، ستون (2) DNA مارکر، ستون (3) کنترل مثبت، ستون (4) نمونه مثبت گاوی، ستون(5) نمونه مثبت گوساله.. 43

فهرست جداول

جدول2-1- مقدار مواد مصرفی برای انجام PCR 36

جدول 3-1- میزان فراوانی آلودگی به نئوسپورا کانینوم در سرم گاوها و گوساله های مورد مطالعه با استفاده از تست الایزا 41

جدول3 -2- نتایج الایزا، PCR و nested -PCR نمونه های سرمی گاوها و گوساله های به ظاهر سالم آن ها 44

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo