%53تخفیف

بررسی ساختار تشریحی- تکوینی و خواص ضد میکروبی و آنتی اکسیدانتی گیاه Phlomidoschema parviflorum از خانواده نعنائیان

تعداد20صفحه در فایل word

گیاه Phlomidoschema parviflorum(Phlomidoschema parviflorum (Benth.) Vved)  به تیره نعنائیان (Lamiaceae) تعلق دارد. این گیاه دولپه ای، چندساله و علفی می باشد. در این گیاه ترکیبات فعال زیستی متنوعی یافت شده است و انتظار می رود همانند دیگر گیاهان تیره نعنائیان دارای خواص دارویی بسیاری باشد. لذا در پژوهش حاضر بر آن شدیم که ساختار تشریحی- تکوینی و نیز خواص ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی این گیاه را مورد بررسی قرار دهیم. برای بررسی ساختار تشریحی- تکوینی از روش های برش گیری دستی و برش گیری با میکروتوم و سپس رنگ آمیزی برش ها با کارمن زاجی، آبی متیلن، هماتوکسیلین و ائوزین و برای مطالعه دانه گرده از میکروسکوپ الکترونی نگاره استفاده شد. برای بررسی خاصیت ضد میکروبی در مراحل تکوینی مختلف گیاه از روش انتشار دیسک و سنجش قطر هاله عدم رشد و روش تعیین حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد استفاده گردید. برای ارزیابی خاصیت آنتی اکسیدانی در مراحل تکوینی مختلف از روش DPPH استفاده شد.

نتایج بررسی های تشریحی نشان داد که در اندام های رویشی این گیاه شامل برگ و ساقه و ریشه ساختمان بافتی مشابه با سایر گیاهان دولپه ای بوده و ویژگی هایی از قبیل افزایش تراکم سیستم های آوندی، افزایش ضخامت دیواره سلول ها، کاهش فضاهای بین سلولی، نمو افزاینده بافت های استحکامی مانند اسکلرانشیم و افزایش تراکم بافت نردبانی در برگ، همچنین تراکم بالای کرک های سطح پیکر گیاه متناسب با زیستگاه گیاه که منطقه خشک می باشد سازمان یافته است. استوانه مرکزی در ریشه از نوع تترارش و کرک های پوشاننده سطح پیکر گیاه از نوع درختی می باشد. همچنین نتایج بررسی های تکوینی اندام های زایشی نشان داد که گل های این گیاه فاقد دمگل و پرچم ها به صورت دی دینام و درون لوله گل مخفی می باشد. لایه های تشکیل دهنده بساک از خارج به داخل شامل اپیدرم، لایه مکانیکی و تپتوم بوده، تپتوم از نوع ترشحی و لایه میانی از نوع تحلیل رونده می باشد. تترادها از نوع تتراگونال هستند. مادگی چهار برچه ای و تخمک از نوع واژگون می باشد. بررسی دانه گرده این گیاه نشان داد که دانه های گرده دارای منظره قطبی تقریبا کروی و منظره استوایی کشیده بوده و دانه گرده سه شکافه و تزئینات سطح آن از نوع مشبک منفذدار (Reticuloporate) می باشد.

نتایج بررسی خاصیت ضد میکروبی نشان داد که این گیاه دارای خاصیت ضد میکروبی متوسط بر روی باکتری های مورد آزمایش بوده و عصاره های گیاه در مرحله پس از گلدهی (فاز زایشی) دارای خاصیت ضد میکروبی بیشتری نسبت به مرحله پیش از گلدهی (فاز رویشی) می باشند.

نتایج بررسی خاصیت آنتی اکسیدانی نشان داد که این گیاه دارای خاصیت آنتی اکسیدانی نسبتا بالایی بوده، همچنین تاثیر عصاره های تهیه شده از گیاه در مرحله زایشی بیش از مرحله رویشی است. مقدار IC50  برای عصاره رویشی و زایشی به ترتیب  35/106و 82/105 میکروگرم بر میلی لیتر می باشد.

اهداف پژوهش

پس از بررسی های به عمل آمده مشخص شد که اطلاعات دقیق و کافی در مورد ساختار تشریحی و مراحل تکوینی گیاه  Phlomidoschema parviflorum موجود نیست. همچنین پژوهشی در مورد خواص ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی آن انجام نشده است. لذا بر آن شدیم که در این زمینه پژوهشی را با استفاده از روشهای متداول علمی به عمل آوریم.

مهم ترین اهداف این پژوهش عبارتند از:

بررسی ساختار تشریحی اندام های رویشی ریشه، ساقه و برگ

بررسی مراحل تکوین بساک و نمو دانه های گرده

بررسی مراحل تکوین مادگی و تخمک

بررسی خاصیت ضد میکروبی عصاره های گیاهی

بررسی خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره متانولی

فهرست مطالب  

صفحه

مقدمه

1

1-1- پیشگفتار………………………………………………………………………………………………………………………………………….

2

1-2- گیاه شناسی……………………………………………………………………………………………………………………………………..

3

1-3- گیاه شناسی تیره نعنائیان …………………………………………………………………………………………………………………..

4

1-3-1- جنس های مهم تیره نعنائیان…………………………………………………………………………………………………………..

5

1-3-2- معرفی جنس Phlomidoschema  ………………………………………………………………………………………………

6

1-4- پراکنش جغرافیایی و شرایط زیستگاه گیاه Phlomidoschema parviflorum ……………………………………….

7

1-5- کاربردها و اهمیت اقتصادی گیاهان تیره نعنائیان ……………………………………………………………………………………

7

1-6- پیشینه مطالعاتی………………………………………………………………………………………………………………………………

8

1-7- فیتوکمیکال ها ………………………………………………………………………………………………………………………………..

11

1-8- تکوین اندام های زایشی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..

12

1-8-1- تکوین پرچم ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

14

1-8-2- نمو دانه گرده ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

16

1-8-3- تکوین تخمک …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

17

1-9- کرک ها در گیاهان تیره نعنائیان ……………………………………………………………………………………………………………………………….

18

1-9-1- تکوین کرک های غده ای ……………………………………………………………………………………………………………………………………….

19

1-10- تغییرات در غلظت، ترکیب و میزان تولید ترکیبات فعال زیستی طی مراحل تکوینی و  در میان بخش های مختلف گیاه ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

21

1-11- فعالیت آنتی اکسیدانی ………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

23

1-11-1- رادیکال های آزاد، گونه های فعال اکسیژن (ROS) و نیتروژن (RNS) …………………………………………………………….

23

1-11-2- مواد آنتی اکسیدانت ………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

23

1-11-3- فلاونوئیدها به عنوان آنتی اکسیدانت …………………………………………………………………………………………………………………….

24

1-11-4- اصول روش سنجش  2 و 2- دی فنیل-1-پیکریل هیدرازیل(DPPH) ……………………………………………………………..

26

1-12- فعالیت ضدباکتریایی …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

27

مواد و روش ها

28

2-1- گیاه مورد استفاده در این پژوهش ………………………………………………………………………………………………………………………………..

29

2-2- جمع آوری نمونه های گیاهی ……………………………………………………………………………………………………………………………………….

29

2-3- بررسی های تشریحی  …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

30

2-4- مواد و محلول های مورد نیاز …………………………………………………………………………………………………………………………………………

30

2-5- تهیه برش های دستی برای مشاهدات میکروسکوپی ……………………………………………………………………………………………………

31

2-6- بررسی مراحل تکوین اندام زایشی و مریستم راس ساقه ………………………………………………………………………………………………

32

2-7- تهیه برش های میکروتومی …………………………………………………………………………………………………………………………………………..

33

2-8- بررسی اثرات ضد میکروبی …………………………………………………………………………………………………………………………………………….

36

2-8-1- انتخاب دیسک های کاغذی ……………………………………………………………………………………………………………………………………..

36

2-8-2- روش تهیه پودر قسمت های مختلف ……………………………………………………………………………………………………………………….

37

2-8-3- روش سترون کردن پودرهای گیاهی ……………………………………………………………………………………………………………………….

37

2-8-4- تهیه عصاره های گیاهی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………

37

2-8-5- میکروارگانیسم های مورد آزمایش …………………………………………………………………………………………………………………………..

38

2-8-6- روش های تهیه محیط کشت مناسب برای بررسی فعالیت ضد میکروبی ………………………………………………………………..

39

2-8-7- تهیه کشت مادر از سویه های میکروبی ……………………………………………………………………………………………………………………

40

2-9- روش های بررسی فعالیت ضد میکروبی عصاره های گیاهی مورد آزمایش ………………………………………………………………….

40

2-9-1- روش انتشار و اندازه گیری هاله عدم رشد (Disc diffusion) …………………………………………………

40

2-9-2- تعیین حداقل غلظت بازدارنده (Minimum Inhibitory Concentration) ……………………………….

41

2-10- سنجش فعالیت آنتی اکسیدانی ………………………………………………………………………………………………………………………………….

42

2-10-1- عصاره گیری ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

42

2-10-2- تهیه محلول DPPH  2/0 میلی مولار ………………………………………………………………………………………………………………….

42

2-10-3- اندازه گیری فعالیت آنتی اکسیدانی به روش DPPH ………………………………………………………………………………………….

42

2-10-4- محاسبه قدرت مهارکنندگی و IC50 ………………………………………………………………………………………………………………………

43

نتایج

44

3-1- بررسی ساختار تشریحی اندام های رویشی گیاه Phlomidoschema parviflorum …………………………………………

45

3-1-1- بررسی ساختار تشریحی پهنک برگ ……………………………………………………………………………………………………………………….

45

3-1-2- بررسی ساختار ساقه علفی………………………………………………………………………………………………………………………………………..

48

3-1-3- بررسی ساختار ساقه چوبی ………………………………………………………………………………………………………………………………………

49

3-1-4- بررسی ساختار نخستین ریشه ………………………………………………………………………………………………………………………………….

50

3-1-5- بررسی ساختار پسین ریشه ……………………………………………………………………………………………………………………………………….

52

3-2- بررسی ساختمان هیستولوژیک مریستم راس ساقه ………………………………………………………………………………………………………

53

3-3- بررسی ساختار تشریحی و مراحل تکوین  اندام های زایشی گیاه Phlomidoschema parviflorum ………………

55

3-3-1- تکوین بساک ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

55

3-3-2- نمو دانه گرده …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

58

3-3-3- بررسی فرا ساختار دانه گرده توسط میکروسکوپ الکترونی SEM ………………………………………………

60

3-3-4- تکوین مادگی و تخمک …………………………………………………………………………………………………………………………………………….

62

3-4- نتایج حاصل از بررسی خواص ضد باکتری گیاه Phlomidoschema parviflorum ………………………………………….

65

3-4-1- روش انتشار دیسک و محاسبه قطر هاله عدم رشد …………………………………………………………………………………………………..

65

3-4-2- روش تعیین حداقل غلظت بازدارنده رشد (MIC) ………………………………………………………………………………………………….

68

3-4-3- آنالیز آماری ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

70

3-5- نتایج حاصل از بررسی خواص  آنتی اکسیدانی گیاه Phlomidoschema parviflorum …………………………………..

71

3-5-1- آنالیز آماری ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

73

بحث و تفسیر

74

4-1- بحث و تفسیر مطالعات ریخت شناسی و تشریحی اندام های رویشی ………………………………………………………………………….

75

4-1-1- برگ …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

75

4-1-2- ساقه …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

75

4-1-3- ریشه ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

76

4-1-4- کرک ها …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

76

4-2- بحث و تفسیر مطالعات تشریحی- تکوینی اندام های زایشی ……………………………………………………………………………………….

77

4-2-1- تخمک ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

77

4-2-2- تکوین پرچم (نمو بساک) …………………………………………………………………………………………………………………………………………

78

4-2-3- مورفولوژی دانه گرده …………………………………………………………………………………………………………………………………………………

78

4-3- بحث و تفسیر نتایج مربوط به خاصیت ضدمیکروبی گیاه Phlomidoschema parviflorum …………………………..

79

4-4- بحث و تفسیر نتایج مربوط به خاصیت آنتی اکسیدانی گیاه Phlomidoschema parviflorum ………………………

79

پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

81

منابع و مآخذ ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

82

چکیده انگلیسی ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

88

 

فهرست اشکال و نمودارها

صفحه

شکل1-1- انواع فیتوکمیکال ها ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..

12

شکل 1-2- مکانیسم عمل رادیکال DPPH ………………………………………………………………………………………………………………………….

26

شکل2-1- تصاویری از گیاه فلومیدوشماپاروی فلوروم و زیستگاه آن …………………………………………………………………………………….

29

شکل3-1- کرک های پوششی و ترشحی سطح برگ گیاه Phlomidoschema parviflorum …………………………………..

46

شکل3-2- برش عرضی از پهنک برگ …………………………………………………………………………………………………………………………………..

47

شکل 3-3- برش عرضی ساقه علفی ………………………………………………………………………………………………………………………………………

49

شکل 3-4- برش عرضی ساقه چوبی ………………………………………………………………………………………………………………………………………

50

شکل3-5-  برش عرضی ساختار نخستین ریشه …………………………………………………………………………………………………………………….

51

شکل 3-6-  برش عرضی ساختار پسین ریشه ……………………………………………………………………………………………………………………….

52

شکل 3-7-  برش طولی مریستم راس ساقه ………………………………………………………………………………………………………………………….

54

شکل3-8- بساک و مادگی Phlomidoschema parviflorum در برش طولی …………………………………………………………..

56

شکل 3-9- برش عرضی بساک ………………………………………………………………………………………………………………………………………………

57

شکل3-10- مراحل تکوین دانه های گرده در گیاه Phlomidoschema parviflorum ……………………………………………

59

شکل3-11-  تصاویر میکروسکوپ الکترونی نگاره از دانه گرده گیاه Phlomidoschema parviflorum ……………………

61

شکل 3-12- برش طولی از گل کامل Phlomidoschema parviflorum و برش عرضی از تخمدان …………………………

63

شکل 3- 13- مراحل تکوین تخمک و کیسه رویانی ……………………………………………………………………………………………………………..

64

شکل3-14- نمودار میله ای مربوط به اثر ضدباکتریایی عصاره های گیاه Phlomidoschema parviflorum روی باکتری اشرشیا کولای ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

66

شکل3-15- نمودار میله ای مربوط به اثر ضدباکتریایی عصاره های گیاه Phlomidoschema parviflorum روی باکتری سودوموناس آئروجینوزا ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….

66

شکل 3-16- نمودار میله ای مربوط به اثر ضدباکتریایی عصاره های گیاه Phlomidoschema parviflorum روی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..

67

شکل3-17-  اثر عصاره های مختلف بر روی باکتری های مورد مطالعه ومقایسه با کنترل مثبت (آنتی بیوتیک تتراسایکلین) ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

67

شکل3-18- نمودار میله ای مربوط به اثر آنتی اکسیدانی عصاره های متانولی گیاهPhlomidoschem parviflorum

71

شکل3-19- خط ترسیم شده به منظور محاسبه شاخص IC50 مربوط به عصاره فاز رویشی ………………………………………………

72

شکل3-20- خط ترسیم شده به منظور محاسبه شاخص IC50 مربوط به عصاره فاز زایشی ……………………………………………….

72

فهرست جدول ها

صفحه

جدول3-1- معرفی نتایج مربوط به میانگین و انحراف معیار داده های قطر هاله عدم رشد عصاره های Phlomidoschema parviflorum ………………………………………………………………………………………………………………………………..

70

جدول 3-2-  معرفی نتایج مربوط به تجزیه واریانس داده های مربوط به قطر هاله عدم رشد عصاره های Phlomidoschema parviflorum ………………………………………………………………………………………………………………………………..

70

جدول3-3- معرفی نتایج مربوط به میانگین و انحراف معیار داده های مربوط به بررسی اثر آنتی اکسیدانی عصاره های گیاه Phlomidoschema parviflorum ……………………………………………………………………………………………………………………….

73

جدول3-4-  معرفی نتایج مربوط به تجزیه واریانس داده های مربوط به بررسی اثر آنتی اکسیدانی عصاره های گیاه Phlomidoschema parviflorum ……………………………………………………………………………………………………………………………….

73

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo