%46تخفیف

بررسی خواص ضداکسیدانی ژلاتین آبکافت شده حاصل از پوست و استخوان سر گربه ماهی دریایی (Arius thalassinus) سواحلچابهار

تعداد78 صفحه در فایل word

کارشناسی ارشددر رشته مهندسی منابع طبیعی شیلات

گرایش فرآوری محصولات شیلاتی

بررسی خواص ضداکسیدانی ژلاتین آبکافت شده حاصل از پوست و استخوان سر گربه ماهی دریایی (Arius thalassinus) سواحلچابهار

چکیده:

رادیکال­های آزاددرایجادبیماری­های مختلف نقشدارند، بعلاوه اکسیداسیون باعث کاهش کیفیت غذایی می­شود. ضداکسیدان­های مصنوعی از نظر سلامتی خطرناکند، بنابراین شناسایی ضداکسیدان­های طبیعی ضروری است. منابع دریایی منبع خوبی برای تولید پپتید­های ضداکسیدانی هستند. هدف این پژوهش، بررسیوبهینه­سازیشرایط تولید ژلاتین آبکافت پوست و استخوان سرگربه ماهی دریایی (Arius thalassinus) با خواص ضداکسیدانی است. ژلاتین از پوست و استخوان گربه ماهی دریایی استخراج ودر دما (40، 5/52 و 65 درجه­سانتی­گراد برای آنزیم­های فلاوورزیم و پروتامکس و 37، 46 و 55 درجه­سانتی­گراد برای آنزیم تریپسین)،غلظت آنزیم (1، 3 و 5 درصد برای آنزیم­های فلاوورزیم و پروتامکس و 5/0، 25/1 و 2 درصد برای آنزیم تریپسین) و زمان (60، 150 و 240 دقیقه برای سه آنزیم)متفاوت مورد آبکافت آنزیمی قرار گرفت. ژلاتین پوست با آنزیم­های تریپسین، فلاوورزیم و پروتامکس و ژلاتین استخوان با آنزیم پروتامکس آبکافت شد. ژلاتین­های پوست جهت سنجش فعالیت ضداکسیدانی تحت سنجش مهار رادیکال آزاد DPPH، قدرت کاهشی و کلاته کردن یون آهن فرو و ژلاتین استخوان تحت سنجش کلاته کردن قرار گرفتند. روش سطح پاسخ جهت بهینه­سازی تولید ژلاتین آبکافت پوست استفاده شد.

ژلاتین­های پوست حاصل از سه آبکافت فعالیت مهاررادیکال آزادDPPHمتوسطی را نشان دادند. ژلاتین­های پوست حاصل از آنزیم­های فلاوورزیم و پروتامکس قدرت کاهشی (067/0نانومتر) و کلاته کردن یون آهن فرو (81 درصد) و ژلاتین­های استخوان حاصل از پروتامکس فعالیت کلاته­کنندگی خوبی (78 درصد) را نشان داد. تجزیه­واریانس معنی­داری مدلدر نتایج هردو آبکافت در سطح 999/99% را نشان داد. آزمون فقدان تناسبدر مدل­ها معنی­دار نبود که نشان دهنده برخورداری مدل از تناسب خوب است.

شرایط بهینه بدست آمده برای آبکافت ژلاتین که بیشترین فعالیت کلاته کنندگی را به­دنبال داشتدرمورد آنزیم­های فلاوورزیم و پروتامکس به ترتیب دمای 73/56و55/56 درجه­سانتی­گراد،نسبت آنزیم به سوبسترا 25/3 و 93/4درصد و زمان 07/60 و 23/149دقیقه با میزان کلاته کردن یون آهن 01/73و 33/82 درصد بود.نتایج پیشنهاد می­دهند که پپتیدهایضداکسیدانی حاصل از ژلاتین آبکافت گربه ماهی می­تواند به عنوان نماینده بالقوهدر صنعت دارویی و نیز توسعه غذاهای کاربردی به کار رود.

واژگان کلیدی: ژلاتین،آبکافت،خواص ضداکسیدانی،گربه ماهی دریایی، رادیکال آزاد، قدرت کاهشی، کلاته کنندگی

فهرست مطالب

عنوان

صفحه

فصلاول:مقدمه…………………………………………………………….……………………………………………………………………………………………….

1

1-1- مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

2

1-1-1-                     خواص زیست فعال پروتئین­های آبکافت………………………………………………………………………………………………………..

7

1- 2- خواص زیست فعال ژلاتین آبکافت………………………………………………………………………………………………………………………

9

فصل دوم: سابقه وپیشینه تحقیق…………………………………………………………………………………………………………………………………..

11

2-1- مطالعات انجام شده در خصوص بررسی خواص ضداکسیدانی……………………………………………………………………………..

12

2-2-مطالعات انجام شده در خصوص بررسی خواص ضداکسیدانی با بهینه سازی شرایط آبکافت…………………………….

17

فصل سوم: مواد و روش­ها………………………………………………………………………………………………………………………………………………

22

3-1- مواد………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

23

3-2- آماده سازی پوست و استخوان………………………………………………………………………………………………………………………………

23

3-3- استخراج ژلاتین پوست و استخوان……………………………………………………………………………………………………………………..

23

3-4- آبکافت آنزیمی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

24

3-5- سنجش پروتئین…………………………………………………………………………………………………………………………………………………

24

3-6- سنجش فعالیت ضداکسیدانی……………………………………………………………………………………………………………………………….

24

3-6-1- سنجش مهار رادیکال آزادDPPH………………………………………………………………………………………………………………..

25

3-6-2- سنجش قدرت کاهشی……………………………………………………………………………………………………………………………………..

25

3-6-3- کلاته کردن یون آهن فرو………………………………………………………………………………………………………………………………..

26

3-7- طراحی آزمایش و بهینه سازی…………………………………………………………………………………………………………………………….

26

فصل چهارم: نتایج…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

30

4-1- فعالیت ضداکسیدانی ژلاتین آبکافت…………………………………………………………………………………………………………………….

31

4-1-1- فعالیت مهار رادیکال آزادDPPH…………………………………………………………………………………………………………………..

31

4-1-2- قدرت کاهشی یون آهن……………………………………………………………………………………………………………………………………

34

4-1-3- کلاته کردن یون آهن فرو………………………………………………………………………………………………………………………………..

35

4-2- نتایج طراحیآزمایشوتجزیهوتحلیلآماري…………………………………………………………………………………………………..

38

4-3- تعبیر نمودارهای باقی مانده…………………………………………………………………………………………………………………………………

41

4-3-1- رابطه دما و زمان بر درصد کلاته کردن یون آهن فرو…………………………………………………………………………………..

43

4-3-2- رابطه دما و نسبت آنزیم به سوبسترا بر درصد کلاته کردن یون آهن فرو………………………………………………………

45

4-3-3- رابطه زمان و نسبت آنزیم به سوبسترا  بر درصد کلاته کردن یون آهن فرو…………………………………………………..

46

فصل پنجم:بحث و نتیجه گیری……………………………………………………………………………………………………………………………………

49

5-1- بررسی خواص ضداکسیدانی ژلاتین آبکافت………………………………………………………………………………………………………

50

5-1-1- فعالیت مهار رادیکال آزادDPPH………………………………………………………………………………………………………………..

50

5-1-2- قدرت کاهشی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………

52

5-1-3- فعالیت کلاته کردن یون آهن فرو…………………………………………………………………………………………………………………….

54

۵-۲- طراحیآماریوتجزیهوتحلیلآزمایش……………………………………………………………………………………………………………

55

5-2-1- اثردماوزمانبردرصدکلاتهکردنیونآهنفرو…………………………………………………………………………………………

57

5-2-2- رابطهدماونسبتآنزیمبهسوبسترابردرصدکلاتهکردنیونآهنفرو……………………………………………………..

58

5-2-3- رابطهزمانونسبتآنزیمبهسوبسترابردرصدکلاتهکردنیونآهنفرو…………………………………………………..

59

نتیجه گیریکلی……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

60

آزمونفرضیه­ها……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

61

پیشنهادهایمستخرجازپایاننامه……………………………………………………………………………………………………………………………….

61

پیشنهادهایپژوهشیآینده…………………………………………………………………………………………………………………………………………..

62

منابع…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

63

فهرست جدول­ها

عنوان جدول

 

صفحه

جدول3-1.سطوح متغیرهای فرآیند آبکافت آنزیمی ژلاتین پوست و استخوان گربه ماهی الف: آنزیم فلاوورزیم و پروتامکس……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

27

جدول3-2. سطوح متغیرهای فرآیند آبکافت آنزیمی ژلاتین پوست و استخوان گربه ماهیب: آنزیم تریپسین ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

27

جدول 3-3. طراحی آزمایش آبکافت ژلاتین پوست گربه ماهی با آنزیم تریپسین……………………………………………………….

28

جدول 3-4. طراحی آزمایش آبکافت ژلاتین پوست گربه ماهی با آنزیم فلاوورزیم و پروتامکس…………………………………

29

جدول 4-1.نتایج تست مهار رادیکال آزادDPPH ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی با آنزیم تریپسین………………….

32

جدول 4-2.نتایج تست مهار رادیکال آزادDPPH ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی با آنزیم فلاوورزیم و پروتامکس……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….

33

جدول 4-3.نتایج تست قدرت کاهشی ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی با آنزیم فلاوورزیم و پروتامکس………………..

34

جدول 4-4. درصد کلاته کردن یونFe2+ ژلاتین پوست گربه ماهی در شرایط مختلف آبکافت براساس طراحیRSM……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

36

جدول4-5. درصد کلاته کردن یونFe2+ ژلاتین استخوان در شرایط مختلف آبکافت با آنزیم پروتامکس………………..

37

جدول4-6. نتایج آنالیز واریانس آبکافت تحت تأثیر متغیرهای مستقل در طول آزمایش بهینه سازیبرای ژلاتین پوست گربه ماهی(آنزیم پروتامکس)………………………………………………………………………………………………………………………………

39

جدول4-7. نتایج آنالیز واریانس آبکافت تحت تأثیر متغیرهای مستقل در طول آزمایش بهینه‌سازی برای ژلاتین پوست گربه ماهی (آنزیم فلاوورزیم)………………………………………………………………………………………………………………………………

40

فهرست شکل­ها

عنوان شکل

صفحه

شکل 4-1. توزیع احتمال نرمال داده­هاژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی حاصل از آنزیم فلاوورزیم………….

42

شکل 4-2.مقایسه مقدار پیش‌بینی مدل در برابر مقدار تجربیژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی  حاصل از آنزیم فلاوورزیم……………………………………………………………………………………………………………………………………………

42

شکل 4-3.توزیع احتمال نرمال داده­ها ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی  حاصل از آنزیمپروتامکس……..

42

شکل 4-4.مقایسه مقدار پیش‌بینی مدل در برابر مقدار تجربیژلاتین آبکافت پوستگربه ماهی  حاصل از آنزیم پروتامکس…………………………………………………………………………………………………………………………………………..

42

شکل 4-5.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر دما و زمان بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی حاصل از آنزیم فلاوورزیم……………………………………………………………………………………………………………………..

43

شکل 4-6.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر دما و زمان بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهی حاصل از آنزیم پروتامکس……………………………………………………………………………………………………………………

44

شکل 4-7.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر دما و نسبت آنزیم به سوبسترا بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهیحاصل ازآنزیم فلاوورزیم………………………………………………………………………………………

45

شکل 4-8.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر دما و نسبت آنزیم به سوبسترا بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهیحاصل از آنزیم پروتامکس……………………………………………………………………………………

46

شکل 4-9.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر زمان و نسبت آنزیم به سوبسترا بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهیحاصل ازآنزیم فلاوورزیم………………………………………………………………………………………

47

شکل 4-10.منحنی سطح پاسخ و تراز اثر زمان و نسبت آنزیم به سوبسترا بر درصد کلاته کردن ژلاتین آبکافت پوست گربه ماهیحاصل از آنزیمپروتامکس……………………………………………………………………………………

48

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo