بررسی الگوی بیان ژن آنتی پورترNa+/H+ غشاء پلاسما (SOS1) درپاسخ به تنش شوری درگیاه گلرنگ (Carthamus tinctorius L.)

 

فهرست

 

عنوان                                                                               صفحه

 

فصل اول : مقدمه و کلیات

1-1- مقدمه  ……………………………………………………………………………………………………..2                                                                                                     

فصل دوم: مرور منابع

2-1-گیاه شناسی گیاه گلرنگ  …………………………………………………………………………….7

2-2- طبقه بندی گیاه گلرنگ ………………………………………………………………………………8

2-3- توزیع و انتشار گیاه گلرنگ ……………………………………………………………………….. 9

2-4- کاربردهای گیاه گلرنگ …………………………………………………………………………… 9

2-4-1- روغن گلرنگ ……………………………………………………………………………………..10

2-4-2-کاربردهای دارویی گلرنگ …………………………………………………………………….11

2-4-3- غذای دام …………………………………………………………………………………………. 12

2-5- تعریف تنش …………………………………………………………………………………………. 12

2-5-1- تنش های غیرزیستی………………………………………………………………………………13

2-5-1-1- تنش شوری …………………………………………………………………………………….13

2-6- شوری خاک ……………………………………………………………………………………….. 14

2-7- اثرات تنش شوری برگیاهان ………………………………………………………………………15

2-7-1- تاثیر شوری بر جوانه زنی……………………………………………………………………….15

2-7-2- تاثیر شوری برفتوسنتزورشد…………………………………………………………………….15

2-7-3- تاثیر شوری بر تغییرات ریختی………………………………………………………………..16

2-7-4- تاثیرشوری برمیزان جذب یون ها…………………………………………………………….16

2-7-5- تاثیرشوری برپروتئین ها…………………………………………………………………………17

2-7-6- تاثیرشوری برساختارلیپیدهای غشاء………………………………………………………….18

2-7-7- تاثیرشوری برهورمون­های گیاهی…………………………………………………………….19

2-8- اثرات سدیم روی رشد گیاهان……………………………………………………………………19

2-9- تنش­های ایجادشده به واسطه تنش شوری……………………………………………………..21

2-9-1- تنش کمبودآب……………………………………………………………………………………21

2-9-2- تنش یونی…………………………………………………………………………………………..21

2-9-3- تنش اکسیداتیو…………………………………………………………………………………….22

2-10- علائم خسارت تنش­های فوق……………………………………………………………………23

2-11- مکانیسم­های دفاعی گیاه دربرابرتنش اکسیداتیو……………………………………………24

2-11-1- مکانیسم­های دفاعی آنزیمی………………………………………………………………….24

2-11-1-1- کاتالاز………………………………………………………………………………………….24

2-11-1-2- پراکسیدازها…………………………………………………………………………………..25

2-11-2- مکانیسم­های دفاعی غیرآنزیمی……………………………………………………………..26

2-11-2-1- کاروتنوئیدها………………………………………………………………………………….26

2-12- مقاومت گیاهان به شوری…………………………………………………………………………27

2-13- مکانیسم­های مقاومت گیاهان در برابر تنش شوری…………………………………………28

2-14- سنتز محلول­های سازگار(تولیدات اسمولیتی)………………………………………………..29

2-14-1- قندها…………………………………………………………………………………………………31

2-14-2- پرولین……………………………………………………………………………………………….31

2-14-3- گلیسین بتائین……………………………………………………………………………………..31

2-15- آنتی پورترها و ترانسپورترهای درگیردرتحمل به شوری درگیاهان……………………32

2-15-1- آنتی پورترHKT  و نقش آن در تحمل به شوری……………………………………….33

2-15-2-آنتی پورترهایS0S₁ وNHX  و نقش آن ها درتحمل به شوری……………………34

فصل سوم مواد و روش­ها

3-1- مواد گیاهی………………………………………………………………………………………………38

3-2- کاشت موادگیاهی…………………………………………………………………………………….38

3-3-اعمال تیمار……………………………………………………………………………………………….38

3-3-1- نحوه اعمال و بررسی تنش شوری…………………………………………………………….38

3-3-2- زمان­های نمونه برداری جهت بررسی الگوی بیان ژنsos₁  پس از اعمال تنش…..39

3-4-  طراحی آغازگر……………………………………………………………………………………….39

3-5- استخراج RNA  و ساخت cDNA ………………………………………………………………40

3- 5- 1- استخراج RNA ………………………………………………………………………………….40

3-5-2- بررسی کمی و کیفی RNA استخراج شده…………………………………………………40

3-5-3- تیمارRNA با آنزیم DNase……………………………………………………………..41

3-5-4- ساخت DNA مکمل(cDNA) ……………………………………………………………42

3-6- واکنش PCR ………………………………………………………………………………………….42

3-7- آنالیز تصاویر حاصل ازRT-PCR نیمه کمی………………………………………………….44

فصل چهارم : نتایج و بحث

4-1- تعیین کیفیت و کمیت RNA استخراج شده…………………………………………………..46

4-2- بیان ژنSOS₁…………………………………………………………………………………………..46

4-3- نتایج حاصل از RT- PCR  نیمه­کمی تحت تیمار غلظت های متفاوت کلریدسدیم درزما­ن­های مختلف…………………………………………………………………………………………..47

4–4- بررسی بیان ژن SOS₁  در غلظت های متفاوت کلرید سدیم…………………………….47

4-5- بررسی بیان ژن SOS₁ در زمان های مختلف………………………………………………….49

4-6- بررسی اثر متقابل تیمارهای شوری و زمان بر بیان ژن SOS₁ …………………………….50

4-7- بحث و نتیجه گیری ……………………………………………………………………………..52

4- 8- پیشنهادات…………………………………………………………………………………………….54

فصل پنجم : منابع

منابع……………………………………………………………………………………………………………56