بررسی اثر میزان توکسیسیتی و ژنوتوکسیسیتی عصاره آبی گیاه خرفه بر روی سلول¬های سرطانی اپیتلیال رده (KB)

عنوان صفحه

فهرست مطالب

فصل اول: کلیات تحقیق

1-1-مقدمه

1-2-بیان مسئله

1-3-اهمیت و ضرورت تحقیق

1-4-اهداف تحقیق

1-4-1-هدف کلی

1-4-2-اهداف فرعی

1-5-فرضیه­ها

 

فصل دوم: مبانی نظری و پیشینه تحقیق

مبانی نظری

2-1-سرطان

2-1-1-ویژگی­های سلول سرطانی

2-2-سرطان دهان

2-2-1-بافت ­شناسی بدخیمی­های دهان

2-2-2-اپیدمیولوژی

2-2-3-اتیولوژی

2-2-4-تظاهرات بالینی

2-2-5-روش­های تشخیصی

2-2-6-پیش آگهی

2-2-7-میزان بقاء

2-2-8-روش­های متداول درمان

2-3-اساس ژنتیکی سرطان

2-3-1-آنکوژن­ها

2-3-2-ژن­های مهارکننده تومور

2-3-3-ژن­های ترمیم کننده DNA

2-3-4-مرگ برنامه­ریزی شده

2-4-متاستاز

2-5-شیوع سرطان در ایران و جهان

2-6-عوامل ایجاد­ کننده سرطان

2-7-پیشگیری از سرطان

2-8-روش­های تشخیص سرطان

2-9-روش­های درمان سرطان

2-10-گیاه خرفه

2-10-1-ترکیبات شیمیایی

2-10-2-خواص دارویی

مروری بر پیشینه­ی تحقیق

2-1-گیاهان دارویی و سلامت انسان

2-2-مروری کلی بر ترکیبات ضدسرطان و مواد موثره گیاهان دارویی

2-3-اثرات ضدسرطانی منتخبی از گیاهان دارویی

2-4-اثرات گیاه خرفه به عنوان گیاه دارویی در طب سنتی

فصل سوم: روش تحقیق

 3-1-مقدمه

3-2-شرایط تجربی

3-2-1-مکان آزمایش

3-2-2-مواد شیمیایی و وسایل استفاده شده

3-2-2-1-مواد مصرفی

3-2-2-2-وسایل مصرفی

3-2-2-3-وسایل غیر مصرفی

3-2-3-تهیه و کشت سلول­های سرطانی رده KB

3-2-3-1-روش انجام پاساژ سلولی

3-2-4-تهیه و جمع آوری گیاه خرفه

3-2-5-استخراج عصاره­ آبی گیاه خرفه

3-2-6-روش تهیه غلظت­های مختلف عصاره­ آبی گیاه خرفه

3-3-گروه­های آزمایش

3-3-1-گروه کنترل

3-3-2-ده گروه تیمار شده با دوزهای مختلف عصاره آبی گیاه خرفه

3-4-سنجش توانايي حيات سلول­ها

3-4-1-روش تهیه محلولMTT

3-4-2-روش تهیه محلول تریپان بلو 4/0 درصد

3-4-3-بررسی میزان تکثیر سلولی بااستفاده از تست MTT

3-4-3-1-روش انجام شمارش سلول

3-4-3-2-روش انجام تست MTT

3-4-4-روش بررسی میزان زنده ماندن سلول­ها با استفاده از رنگ­آمیزی تریپان­بلو

3-5-روش بررسی اثرات ژنوتوکسیسیتی عصاره آبی گیاه خرفه با استفاده از تست­ رنگ­آمیزی هوخست

3-6-آنالیز آماری

فصل چهارم: یافته­های تحقیق

 4-1-مقدمه

4-2-نتایج حاصل از تیمار سلول­های سرطانی رده KB با عصاره­آبی ­خرفه براساس آزمون MTT در مدت زمان­های 12، 24 و 48 ساعت

4-3-نتایج حاصل از تیمار سلول­های سرطانی رده KB با عصاره­آبی خرفه براساس روش تریپان­بلو در مدت زمان­های 12، 24 و 48 ساعت

4-4-نتایج حاصل از بررسی اثرات ژنوتوکسیسیتی عصاره آبی خرفه با­استفاده از تست­ رنگ­آمیزی هوخست

فصل پنجم: جمع­بندی، نتیجه­گیری و پیشنهادات

5-1-مقدمه

5-2-بحث و نتیجه گیری

5-3-ارائه پیشنهادات

منابع و مراجع

چکیده انگلیسی

 

 

 

 

فهرست شکل

عنوان صفحه

شکل2-1-سلول­های سرطانی شده (بدخیم)

شکل2-2-بدخیمی دهان

شکل2-3-بافت شناسی بدخیمی دهان

شکل2-4-تظاهرات بالینی سرطان سر و گردن

شکل2-5-مراحل انجام فرآیند آپوپتوزیس

شکل2-6-تومور متاستاز دهنده

شکل2-7-DNA سالم

شکل2-8-DNA موتاسیون دار

شکل2-9-گیاه خرفه شکل

شکل3-1-لام نئوبار

شکل3-2-رنگ سنجی با استفاده از تست MTT

شکل3-3-سلول­های رده KB بدون تیمار با عصاره آبی(گروه کنترل)

شکل3-4-سلول­های رده KB پس از تیمار با غلظت 11000 میکروگرم بر میلی­لیتر از عصاره آبی در روش تریپان بلو

شکل3-5-سلول­های رده KB پس از تیمار با غلظت 12000 میکروگرم بر میلی­لیتر از عصاره آبی در روش تریپان بلو

شکل3-6-سلول­های رده KB پس از تیمار با غلظت 13000 میکروگرم بر میلی­لیتر از عصاره آبی در روش تریپان بلو

 

 

فهرست جدول و نمودار

عنوان صفحه

جدول4-1-ميانگين درصد توانایی زيستي سلول­هاي ردهKB 12، 24 و 48 ساعت پس از تيمار با دوزهای مختلف عصاره آبی با روش رنگ سنجی MTT

جدول4-2-ميانگين درصد بقای سلول­هاي ردهKB 12، 24 و 48 ساعت پس از تيمار با دوزهای مختلف عصاره­آبی با روش تریپان بلو

نمودار4-1-درصد مهار رشد عصاره­آبی در غلظت­های مختلف پس از گذشت 12 ساعت براساس آزمون MTT

نمودار4-2-درصد مهار رشد عصاره­آبی در غلظت­های مختلف پس از گذشت 24 ساعت براساس آزمون MTT

نمودار4-3-درصد مهار رشد عصاره­آبی در غلظت­های مختلف پس از گذشت 48 ساعت براساس آزمون MTT

نمودار4-4-درصد مهار رشد عصاره آبی درغلظت­های مختلف پس از گذشت 12 ساعت به وسیله روش تریپان بلو

نمودار4-5-درصد مهار رشد عصاره آبی درغلظت­های مختلف پس از گذشت 24 ساعت به وسیله روش تریپان بلو

نمودار4-6-درصد مهار رشد عصاره­آبی درغلظت­های مختلف پس از گذشت 48 ساعت به وسیله روش تریپان بلو