بررسي اثر عصاره برگ زيتون و ترکيب اصلي آن(اولئوروپئين) بر سميت سلولي ناشي از 6-هيدروکسي دوپامين در سلول¬هاي PC12

تعداد78 صفحه در فایل word

بيماري پارکينسون يک اختلال تخريب کننده نوروني شديد و پيش رونده سيستم عصبي مرکزي است که يکي از شايع ترين اختلالات حرکتي مي­باشد. براي اکثر بيماري‌هاي تخريب کننده عصبي اقدامات موجود حکم مسکن را دارند. به علت اينکه شواهد متعددي پيشنهاد مي­کنندکه دربسياري از بيماري‌هاي تخريب کننده نوروني مرگ سلولي غير عادي رخ مي­دهد، داروهايي که بتوانند مرگ سلولي را متوقف کنند ممکن است از تخريب نوروني بيشتر جلوگيري کرده و پيشرفت بيماري را آهسته کنند. ترکيبات عمده عصاره برگ زيتون فنول هايي مانند اولئوروپئين مي­باشند، که آثار ضد آپوپتوزي از خود نشان مي­دهند بنابراين، مطالعه حاضر جهت بررسي اثر عصاره برگ زيتون و اولئوروپئين بر سميت سلولي ناشي از 6-هيدروکسي دوپامين بر روي سلول‌هاي PC12  به عنوان مدل in vitro بيماري پارکينسون طراحي شد. جهت القاء سميت سلولي، سلول‌هاي PC12 با 150 ميکرومول 6-هيدروکسي دوپامين تيمار شدند. در گروه­هاي درماني دوزهاي متفاوت برگ زيتون(g/mlμ600-100) واولئوروپئين(g/mlμ25-5) جهت بررسي اثر احتمالي محافظت کننده آنهااستفاده شد. سميت سلولي توسط تست MTT تعيين شد. ميزان ROS داخل سلولي توسط پروب فلورسنس دي­کلرو فلورسين دي استات از طريق روش فلوريمتري ارزيابي شد. قطعات DNA وپارامترهاي بيوشيميايي آپوپتوز (Bax, Bcl2  و caspase3) به ترتيب توسط الکتروفورز در ژل آگارز و ايمونوبلاتينگ ارزيابي شدند. نتايج ما نشان دادند که افزايش 6-هيدروکسي دوپامين منجر به افزايش ميزان آسيب سلولي، توليد  ROS داخل سلولي، فعال شدن کاسپاز3، قطعه­قطعه شدن DNA و همچنين افزايش نسبت Bax/Bcl2  مي­گردد. تيمار با عصاره برگ زيتون(μg/ml 400و600) و اولئوروپئين ( μg/ml20و25)  اختلالات ذکر شده را کاهش مي­دهد. روي هم رفته نتايج پيشنهاد مي­کنند که عصاره برگ زيتون و اولئوروپئين در برابر آپوپتوز القاء شده در اثر 6-هيدروکسي دوپامين اثر محافظت کننده نوروني دارند. حداقل بخشي از اين اثر محافظت کننده به واسطه کاهش آپوپتوز نوروني اعمال مي­گردد و پيشنهاد کننده پتانسيل دارويي عصاره برگ زيتون و اولئوروپئين براي کاهش تخريب عصبي سلول­هاي دوپامينرژيک مي‌باشد.

کلمات کليدي:عصاره برگ زيتون، 6-هيدروکسي دوپامين، آپوپتوز، سلول­هايPC12، اولئوروپئين.