%31تخفیف

بررسي اثرات عصاره ي گياه گلپر بر حافظه ي فضايي و استرس اكسيداتيو طي مسموميت با ديازنيون در موش هاي صحرایی نر

تعداد 101صفحه در فایل word

کارشناسی ارشد (MS) زیست شناسی گرایش فیزیولوژی جانوری

بررسي اثرات عصاره ي گياه گلپر بر حافظه ي فضايي و استرس اكسيداتيو طي مسموميت با ديازنيون در موش هاي صحرایی نر

کلید واژه: دیازینون، استرس اکسیداتیو، حافظه فضایی، حافظه فضایی، عصاره ی گلپر  

چکیده

زمینه و اهداف: ترکیبات ارگانوفسفره درسطح گسترده در سراسر جهان به عنوان حشره کش در کشاورزی به کار می روند، مسمومیت با این مواد یکی از مشکلات بهداشت جهانی است. ارگانوفسفره ها مهار کننده های AchE هستند که با فسفریله کردن اسید آمینه سرین موجود در جایگاه فعال آنزیم پیوندی محکم و غیرقابل برگشت با آنزیم ایجاد کرده و آن را مهار و باعث افزایش سطح  Ach می شوند و بروز مسمومیت ناشی از تجمع بیش از حد Ach می باشد. دیازینون یکی از ترکیبات جدید و مهم ارگانوفسفره است که به عنوان حشره کش علیه آفات نباتی و حشرات منازل استفاده می شود. مطالعات فارماکولوژیکی نشان می دهند که سیستم کولینرژیک مغز در حافظه و یادگیری دخیل می باشد. به گونه ای که آگونیست گیرنده های کولینرژیک اثر مثبت و تقویت کننده ای بر حافظه دارند در حالی که آنتاگونیست گیرنده های کولینرژیک نظیر اسکوپولامین باعث نقص در حافظه میشود. مهار AchE منجر به تجمع استیل کولین در سیناپس های کولینرژیک شده و تداخل با عملکرد طبیعی سیستم های اعصاب خودکار، سوماتیک و اعصاب مرکزی خواهد داشت. تجمع و اثرات طولانی Ach سبب اثرات حاد موسکارینی و نیکوتینی و سپس تنظیم کاهشی یا عدم حساسیت گیرنده های استیل کولین میشود. بیشترین نشانه های آن شامل نقصان شناختی به صورت اختلال حافظه، تمرکز و یادگیری می باشد. مطالعات نشان می دهد ارگانوفسفره های مختلف قادر به تولید رادیکال های آزاد و اختلال در سیستم آنتی اکسیدان بدن هستند. استرس اکسیداتیو ناشی از یک عدم تعادل بین تولید گونه های باز فعال اکسیژن (ROS) و توانایی سیستم زیستی برای سم زدایی این واسطه های فعال می باشد. استرس اکسیداتیو سبب القای آسیب اکسیداتیو در هیپوکامپ و آپوپتوز سلول های هرمی می شود. آنزیم های آنتی اکسیدان عهده دار عمل سم زدایی رادیکال های آزاد هستند که سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز از آنزیم های کلیدی این سیستم به شمار می روند و گلوتاتیون تیول غیر پروتیینی اصلی موجودات هوازی و فراوان ترین آنتی اکسیدان غیر آنزیمی داخل سلول است. استرس اکسیداتیو سبب القاء آسیب اکسیداتیو در هیپوکمپ و آسیب سلولهای عصبی می شود. هیپوکمپ بالغین یک مرکز حیاتی برای فرآیندهای یادگیری و حافظه می باشد و نقش اساسی در تشکیل و ذخیره سازی حافظه فضایی دارد. گلپر ایرانی یکی از گونه جنس هراکلوم در ایران است که در نیمه شمالی کشور در ارتفاعات 1500 متر و بالاتر رشد میکند. اسانس گلپر دارای خاصیت آنتی اکسیدانی است که این خاصیت آنتی اکسیدانی به دلیل فورانوکومارین موجود در آن می باشد. برخی از مطالعات نشان داده اند که گلپر فعالیت های یادگیری و حافظه را نیز تحت تاثیر قرار میدهد و به عنوان تقویت کننده حافظه کاربرد دارد. از این رو در این پایان نامه اثرات گلپر روی شاخص های استرس اکسایشی و بهبود حافظه فضایی در موش های صحرایی مسموم شده با دیازینون مورد بررسی قرار گرفت.

مواد و روش ها: 49 سر موش صحرائی نر نژاد ویستار با محدوده وزنی (50±250) گرم به صورت تصادفی به هفت گروه 7 تائی شامل گروه کنترل، گروه شاهد، گروه گلپر 50 mg/kg، گروه گلپر 150 mg/kg، گروه دریافت کننده دیازینون، گروه گلپر 50 mg/kg+دیازینون، گروه گلپر 150 mg/kg+دیازینون تقسیم شدند. گروه های تیمار، عصاره ی الکلی گلپر را به مدت 21 روز و با دو دوز µg/rat 50 و µg/rat 150 دریافت نمودند و در آخرین روز تزریق گلپر، دیازینون را به صورت تزریق داخل صفاقی و با دوز 100 mg/kg دریافت کردند. بعد از اتمام دوره های تیمار، از حیوانات تمامی گروه ها آزمون ماز آبی موریس به عمل آمد. در خاتمه، نمونه برداری از هیپوکامپ انجام گردید و میزان پارامترهای استرس اکسیداتیو در این ناحیه با استفاده از روش های FRAP، MDA و آنزیم های آنتی اکسیدانی CAT و SOD سنجش گردید. تجزیه و تحلیل اطلاعات حاصله به روش آنالیز واریانس یک طرفه انجام شد.

یافته ها: نتایج این بررسی نشان داد که تیمار با عصاره الکلی گلپر به طور معنی داری حافظه فضایی در مدل های تجربی مسموم شده با دیازینون را بهبود بخشید (05/0 P<). همچنین میزان پارامترهای استرس اکسیداتیو در گروه های مسموم شده با دیازینون، با تیمار عصاره الکلی گلپر کاهش معنی داری را نسبت به گروه های شاهد نشان داد (05/0 P<).

بحث: عصاره گلپر حاوی فورانوکومارین های متنوعی از جمله Sphondin می باشد که قادرند با گرفتن و روبیدن گونه های باز فعال اکسیژن، وضعیت ردوکس سلولی و متابولیسم انرژی را حفظ نموده و بدین سان اثرات حفاظتی خود را اعمال نمایند. بنابراین می توان نتیجه گیری نمود که تزریق عصاره الکلی گلپر از طریق کاهش بار اکسیداتیو و تعدیل مارکرهای استرس اکسیداتیو در هیپوکامپ، حافظه فضایی در موش های صحرائی نر مسموم شده با دیازینون را به طور معنی داری بهبود می بخشد. از سوی دیگر، گلپر دارای ترکیبات ترپنوئیدی است که این ترکیبات دارای اثر حفاظتی بر گیرنده های موسکارینی استیل کولین در مقابل اثر تخریبی رادیکال های آزاد می باشند و از آنجا که این گیرنده ها برای عملکرد فرایند حافظه و یادگیری ضروری هستند، بنابراین گلپر می تواند از طریق ترکیبات ترپنوئیدی خود با تأثیر بر سیستم کولینرژیک بر حافظه مؤثر بوده باشد.

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                 صفحه

مقدمه 1

فصل اول: بررسی منابع

1- مقدمه و بررسی منابع 6

1-1- ارگانوفسفره ها 6

1-1-1- دیازینون 7

1-1-2- شیوع و گستردگی مسمومیت 8

1-1-3- ساختمان 9

1-1-4- توکسیکوکینتیک 10

1-1-4-1- جذب، توزیع و ذخیره10

1-1-4-2- بیوترانسفرماسیون11

1-1-4-3- دفع12

1-1-5- توکسیکودینامیک12

1-1-5-1- استنباط بالینی توکسیکوکینتیک و توکسیکودینامیک ارگانوفسفره ها13

1-1-6- پاتوفیزیولوژی اثرات توکسیک14

1-1-7- تظاهرات بالینی مسمومیت با ارگانوفسفره ها16

1-1-7-1- بحران کولینرژیک حاد16

1-1-7-2- سندرم بینابینی17

1-1-7-3- نوروپاتی تأخیری القاء شده ارگانوفسفره ها18

1-1-7-4- اختلال مزمن عصبی روانی القاء شده با ارگانوفسفره ها18

1-2- حافظه و یادگیری19

1-2-1- تثبیت حافظه21

1-2-2- حافظه فضایی24

1-2-3- نقش هیپوکامپ در یادگیری24

1-2-4- اختلال حافظه در افراد تماس یافته با ارگانوفسفره26

1-3- استرس اکسیداتیو27

1-3-1- سیستم دفاع آنتی اکسیدانی29

1-3-2- استرس اکسیداتیو در افراد تماس یافته با ارگانوفسفره ها31

1-4- گلپر33

1-4-1- ترکیبات شیمیایی گلپر33

1-4-2- خواص زیستی-طبی گلپر34

1-4-2-1- فعالیت آنتی اکسیدانی گلپر34

1-4-2-2- ویژگی های ضد تشنجی گلپر35

1-4-2-3- تأثیرات ضد میکروبی35

1-4-2-4- فعالیت های تعدیل کنندگی سیستم ایمنی35

1-5- هدف تحقیق36

فصل دوم: مواد و روش ها

2- مواد و روش ها39

2-1- طرح تحقیق39

2-2- حیوانات39

2-3- گروه بندی39

2-4- تهیه عصاره الکلی گلپر40

2-5- روش تهیه دیازینون40

2-6- روش مطالعه یادگیری فضایی در ماز آبی موریس41

2-7- نمونه برداری41

2-7-1- تهیه هموژن از بافت هیپوکامپ42

2-7-2- سنجش فعالیت کل آنتی اکسیدانی42

2-7-3- سنجش پراکسیداسیون لیپیدی43

2-7-4- سنجش فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی43

2-7-4-1- کاتالاز43

2-7-4-2- سوپراکسید دیسموتاز44

2-7-5- تعیین غلظت پروتئین44

2-8- آنالیز آماری45

فصل سوم: نتایج

3- نتایج47

3-1- نتایج حافظه فضایی47

3-2- نتایج سنجش پارامترهای استرس اکسیداتیو57

3-2-1- نتایج سنجش فعالیت کل آنتی اکسیدانی57

3-2-2- نتایج سنجش پرواکسیداسیون لیپیدی61

3-2-3- نتایج سنجش فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی65

3-2-3-1- نتایج سنجش فعالیت کاتالاز65

3-2-3-2- نتایج سنجش سوپراکسید دیسموتاز69

فصل چهارم: بحث

4- بحث74

4-1- حافظه فضایی74

4-2- پارامترهای استرس اکسیداتیو81

4-3- نتیجه گیری و پیشنهادات87

منابع89

فهرست اختصارات99

فهرست اشکال

عنوان                                                                                                                 صفحه

فصل اول

شکل 1-1-1- ساختمان کلی حشره کش های ارگانوفسفره9

شکل 1-1-2- مسیر واکنش های اتفاق افتاده بین ارگانوفسفره ها و استیل کولین15

شکل 1-2-1- انواع حافظه21

شکل 1-2-2- سازمان یابی آناتومیکی تشکیلات هیپوکامپی23

شکل 1-2-3- مسیرهای ورودی و خروجی تشکیلات هیپوکامپی23

شکل 1-2-4- تصویری مرکب از هیپوکامپ و ژیروس دندانه ای موش صحرایی26

فصل سوم

شکل 3-1-1- مقایسه نتایج آزمون ماز آبی موریس در طی روزهای آموزش بین گروه های کنترل، گلپر 50 mg/kg و گلپر150 mg/kg 48

شکل 3-1-2- مقایسه نتایج آزمون ماز آبی موریس در طی روزهای آموزش بین گروه های کنترل، شاهد و دیازینون50

شکل 3-1-3- نتایج آزمون ماز آبی موریس در طی روزهای آموزش بین گروه های کنترل، شاهد و دیازینون و گلپر 50 mgk/kg+دیازینون52

شکل 3-1-4- نتایج آزمون ماز آبی موریس در طی روزهای آموزش بین گروه های کنترل، شاهد و دیازینون و گلپر 150 mgk/kg+دیازینون 54

شکل 3-1-5- نتایج آزمون ماز آبی موریس در طی روزهای آموزش بین گروه های گلپر 50,150 mg/kg، گلپر 50 mg/kg+دیازینون و گلپر 150 mg/kg+دیازینون56

شکل 3-2-1- مقایسه نتایج سنجش میزان FRAP بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg، دیازینون و گلپر 50 mg/kg+دیازینون58

شکل 3-2-2- مقایسه نتایج سنجش میزان FRAP بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg ، گلپر 50 mg/kg+دیازینون و گلپر 150 mg/kg+دیازینون60

شکل 3-2-3- مقایسه نتایج سنجش میزان TBARS بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg، دیازینون و گلپر 50 mg/kg+دیازینون62

شکل 3-2-4- مقایسه نتایج سنجش میزان TBARS بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg ، گلپر 50 mg/kg+دیازینون و گلپر 150 mg/kg+دیازینون64

شکل 3-2-5- مقایسه نتایج سنجش میزان CAT بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg، دیازینون و گلپر 50 mg/kg+دیازینون 66

شکل 3-2-6- مقایسه نتایج سنجش میزان CAT بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg ، گلپر 50 mg/kg+دیازینون و گلپر 150 mg/kg+دیازینون68

شکل 3-2-7- مقایسه نتایج سنجش قدرت مهارکنندگی SOD بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg، دیازینون و گلپر 50 mg/kg+دیازینون 70

شکل 3-2-8- مقایسه نتایج سنجش قدرت مهارکنندگی SOD بین گروه های کنترل، شاهد، گلپر 50,150 mg/kg ، گلپر 50 mg/kg+دیازینون و گلپر 150 mg/kg+دیازینون 72

فصل چهارم

شکل 4-1- تصویر شماتیک فعال شدن Nrf2-ARE توسط ROS 85

 

 

 

 

 

فهرست جداول

عنوان                                                                                                  صفحه

جدول 3-2-1- نتایج سنجش میزان FRAP در هیپوکامپ…………………………………………………………. 57

جدول 3-2-2- نتایج سنجش میزان TBARS در هیپوکامپ……………………………………………………… 61

جدول 3-2-3- نتایج سنجش میزان GPx در هیپوکامپ…………………………………………………………….. 65

جدول 3-2-4- نتایج سنجش قدرت مهارکنندگی SOD در هیپوکامپ…………………………………….. 69

 

نقد و بررسی‌ها

هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.

اولین کسی باشید که دیدگاهی می نویسد “بررسي اثرات عصاره ي گياه گلپر بر حافظه ي فضايي و استرس اكسيداتيو طي مسموميت با ديازنيون در موش هاي صحرایی نر”

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo