%34تخفیف

ارزیابی کیفیت کودهای زیستی کشور و پاسخ گیاهان ذرت و لوبیا به تلقیح آن¬ها

کارشناسی ارشد      رشته: علوم خاک       گرایش: بیولوژی و بیوتکنولوژی خاک

ارزیابی کیفیت کودهای زیستی کشور و پاسخ گیاهان ذرت و لوبیا به تلقیح آن­ها

واژه­های کلیدی: کود زیستی، نیتروکسین،  PGPR، ذرت، اکسین، .CAS-agar

چکیده

بهره‌مندی از اثرات مفید کودهای زیستی در کشاورزی پایدار منوط به رعایت جنبه‌های کنترل کیفی آنهاست، بر این اساس در این مطالعه کیفیت چهار نوع کود زیستی رایج کشور شامل کود زیستی بارور2، بیوسوپرفسفات، نیتروکسین و سوپرنیتروپلاس در دو فاز آزمایشگاهی و گلخانه‌ای مورد آزمایش قرار گرفت. در بررسی اثر تلقیح کودهای فوق بر دو گیاه لوبیا و ذرت،بعد از آماده­سازی بستر کشت گیاه، که از خاک­های منطقه برای آزمایش استفاده شد، آزمایش گلدانی به صورت طرح کاملاً تصادفی با اعمال 4 تیمار کود زیستی و شاهد (بدون تلقیح میکروبی) در 4 تکرار انجام شد. تلقیح سوسپانسیون میکروبی مربوط به هر کود زیستی بر اساس توصیه شرکت­های سازنده انجام گرفت. پس از جوانه­زنی بذرها، آبیاری گلدان­ها با آب مقطر تا حد رطوبت FC8/0 انجام شد و با ورود به دوره زایشی برداشت گیاهان انجام گرفت. در جمع‌بندی نتایج آزمایش کودهای زیستی بر پارامترهای اندازه‌گیری شده گیاه لوبیا می‌توان اینگونه نتیجه گرفت که شاید بنا به دلیل حضور سویه‌های بومی خاک و بویژه باکتری ریزوبیوم همزیست با این گیاه، تفاوت محسوسی بین تیمارهای کودی و شاهد مشاهده نشد و به جز غلظت نیتروژن بخش هوایی در سایر خصوصیات اندازه‌گیری شده تیمار شاهد با کودهای زیستی مورد استفاده از نظر آماری در یگ گروه آماری قرار گرفتند. در جمع­بندی نتایج آزمایش کودهای زیستی بر پارامترهای اندازه‌گیری شده گیاه ذرت می‌توان این‌گونه نتیجه گرفت که با توجه به نوع گیاه که یک گیاه غیرلگوم و غیربهره‌مند از همزیستی ریزوبیومی است کاربرد کودهای زیستی تاثیرات معنی‌داری را از نظر خصوصیات مورد اندازه‌گیری به همراه داشته است. تلقیح کودهای زیستی حاوی باکتری­های محرک رشد گیاه کلنیزاسیون این باکتری­ها را در ریزوسفر گیاه به دنبال داشته است و شاهد اثرات افزایشی پارامترهای اندازه‌گیری شده هستیم، البته بایستی عنوان نمود که در شاخص کلروفیل و غلظت آهن ریشه کودهای زیستی با نمونه شاهد در یک گروه آماری قرار داشتند. برخلاف آزمایش نخست و در حضور گیاه لوبیا که کود زیستی نیتروکسین نتایج بهتری را به همراه داشت در این آزمایش کود بیوسوپرفسفات و به دنبال آن بارور2 نتایج بهتری را رقم زدند و کمترین مقدار خصوصیات اندازه‌گیری شده در بین کودهای زیستی متعلق به نیتروکسین بود.

همزمان با آزمایش گلخانه­ای، سنجش کیفیت کودهای زیستی مذکور از نظر جمعیت میکروبی فعال و برخی ویژگی­هایPGPR­ای در سطح آزمایشگاهی به منظور مطالعات تکمیلی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاکی از تاثیر معنی­دار کودهای زیستی مذکور بر میزان حل­کنندگی فسفات معدنی نامحلول و تولید اکسین بود به صورتیکه بیشترین میزان انحلال فسفات از تری‌کلسیم فسفات به ترتیب با مقادیر نزدیک به 400 و 350 میلی‌گرم بر لیتر برای بیوسوپرفسفات و بارور2 به دست آمد و در تولید اکسین نیز کودهای نیتروکسین و بارور2 موفق عمل کردند. همچنین کودهای زیستی به جز بارور2 قادر به تولید سیدروفور در محیطCAS-agarبودند، اما هیچ یک از کودهای زیستی تاثیر معنی­داری بر میزان رهاسازی پتاسیم از کانی­های مسکوویت و بیوتیت نشان ندادند. نتایج حاصل از شمارش جمعیت میکروبی در محیط­های عمومی و اختصاصی حاکی از جمعیت قابل قبول باکتری­ها در کودزیستی سوپرنیتروپلاس و بارور2 (cfu/ml108) بود،در حالیکه نیتروکسین و بیوسوپرفسفات به ترتیب با جمعیت میکروبی 107و 106کلنی در هر میلی­لیتر کود در رتبه‌های بعدی بودند. نتایج حاصله از شناسایی و تایید ایزوله ها و سویه­های به کار رفته در کودهای زیستی حاکی از آن بود که دو ایزوله 1 و 5 کود نیتروکسین، ایزوله1و3بیوسوپرفسفات به ترتیب متعلق به جنس Pseudomonassp.و ایزوله 2 بیوسوپرفسفات متعلق به گونه Acinetobacterbeijerinckiiمی‌باشد.

مقدمه

8

فصل اول: بررسی منابع

11

کود زیستی

12

باکتری­های ریزوسفری محرک رشد گیاه

13

تثبیت­کنندگان نیتروژن

14

حل­کنندگان فسفات

15

سابقه تولید و استفاده از کودهای زیستی در آسیا و ایران

16

نتایج حاصله از به کارگیری کودهای زیستی در مطالعات مختلف

18

کنترل کیفیت کودهای زیستی

25

جمعیت میکروبی در کودهای زیستی

25

عدم وجود آلودگی در کودهای زیستی

26

شناسایی و تایید حضور ایزوله­های موجود در کود زیستی

27

غربال­گری حل­کنندگان فسفات در محیط­های عمومی و نیمه­اختصاصی

28

سنجش تولید اکسین

29

سنجش تولید سایدروفور

29

فصلدوم: موادوروش­ها

31

انتخابوآماده­سازی و تعیین ویژگی­های خاک

32

آماده­سازی خاکجهتکشتگلدانی

34

انتخابوآماده­سازی بذرجهتجوانه­زنی

35

تلقیح کودهای زیستی وکشتبذورجوانه­دارذرت و لوبیا

35

پارامترهای اندازه­گیری شدهقبلازبرداشتگیاهان

35

اندازه­گیری شاخص کلروفیل گیاه

35

پارامترهای اندازه­گیری شدهپسازبرداشت

36

اندازه­گیری وزن تربخشهوایی و ریشه

36

اندازه­گیری وزن خشک بخش هوایی و ریشه

33

اندازه­گیری غلظتعناصردرگیاه

36

هضمنمونه­های گیاهی بهروش ترسوزانی

36

اندازه­گیری پتاسیم به روش فلیم فتومتری

37

اندازه­گیری فسفربهروشرنگ­سنجی وانادات–مولیبدات

37

اندازه­گیری نیتروژن به روش کجلدال

38

اندازه­گیری آهن گیاه به روش جذب اتمی

40

کنترل کیفیت کودهای زیستی

40

شمارش جمعیت میکروبی

40

تایید حضور ایزوله و سویه­های باکتری در کودهای زیستی

41

اندازه­گیری ویژگی­های PGPR­ای کودهای زیستی

43

آزمون کیفی حل­کنندگی فسفات معدنی نامحلول

44

آزمون کیفی فعالیت فسفاتازی کودهای زیستی

44

آزمون کمی حل­کنندگی فسفات معدنی نامحلول

44

آزمون کمی توان تولید اکسین

46

آزمون کیفی تولید سیدروفور در محیطCAS

46

آزمون کمی توان رهاسازی پتاسیم از کانی­های میکا

47

طرح آزمایشی و آنالیز آماری

44

فصل سوم: نتایج

50

نتایج تلقیح کودهای زیستی در گیاه لوبیا

50

وزن تر کل

50

وزن خشک ریشه

51

وزن تر  هوایی

53

غلظت آهن ریشه

54

مقدار آهن بخش هوایی

55

جذب فسفر ریشه

56

غلظت نیتروژن بخش هوایی

59

مقدار پتاسیم بخش هوایی

57

نتیجه­گیری آزمایش اول

61

نتایج تلقیح کودهای زیستی با گیاه ذرت

62

شاخص کلروفیل

62

غلظت نیتروژن بخش هوایی و جذب آن

63

غلظت پتاسیم بخش هوایی و جذب آن

66

غلظت آهن ریشه

68

نتیجه­گیری آزمایش دوم

69

کنترل کیفیت کودهای زیستی

71

بررسی ویژگی­های pgpr کودهای زیستی

71

آزمون نیمه­کمی توان حل­کنندگی فسفات معدنی نامحلول

71

آزمون کیفی بررسی توان فعالیت فسفاتازی کودهای زیستی

71

آزمون کمی توان حل­کنندگی فسفات معدنی نامحلول

71

آزمون کمی توان تولید اکسین

73

آزمون کمی توان رهاسازی پتاسیم از کانی­های میکا

74

آزمون کیفی توان تولید سیدروفور

75

تعیین جمعیت میکروبی

76

شناسایی و تایید ایزوله­ها و سویه­های کود زیستی

77

تست­های بیوشیمیایی

78

برخی پارامترهای اندازه­گیری شده در کود زیستی

81

رنگ­آمیزی گرم و تشخیص نوع گرم سویه­های کود زیستی

82

شناسایی مولکولی سویه­های میکروبی کودهای زیستی

88

نتیجه­گیری آزمایش سوم

89

پیشنهادات

91

منابع

96

      صفحه            فهرست جداول

جدول (1-1)، فهرستی از کودهای زیستی فسفاته تولید داخل

16

جدول (2-1)، برخی ویژگی­های فیزیکی و شیمیایی خاک

30

جدول (2-2) و (2-3)، اجزای محیط کشت (g/l) در محیطLB، Sperber، Nf،Nfbجامد و نیمه­جامد

41

جدول (2-4)، اطلاعات قید شده توسط تولید­کنندگان کودهای زیستی مورد آزمایش

47

جدول (3-3)، جعیت میکروبی کودهای زیستی

76

جدول (3-4)، برخی ویژگی­های کودهای زیستی

81

جدول (3-5)، نتایج حاصل از رنگ­آمیزی گرم

82

جدول (3-6) و (3-7)، نتایج حاصل از برخی تست­های بیوشیمیایی

84 و86

جدول (3-8)، نتایج شناسایی مولکولی سویه­های میکروبی موجود در کودهای زیستی

88

جدول (3-9)، جدول تجزیه واریانس تاثیر کودهای زیستی ازته و فسفاته بر پارامترهای گیاهی در لوبیا

94

جدول (3-10)، جدول تجزیه واریانس تاثیر کودهای زیستی ازته و فسفاته بر پارامترهای گیاهی در ذرت

95

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo