%41تخفیف

آزمون انساب در جمعیت گوسفندهای دو­رگه ایستگاه خلعت­پوشان به کمک نشانگرهای ریزماهواره

تعداد108صفحه در فایل word

گروه علوم دامی

کارشناسی ارشد در رشته علوم دامی

گرایش ژنتیک و اصلاح دام

آزمون انساب در جمعیت گوسفندهای دو­رگه ایستگاه خلعت­پوشان به کمک نشانگرهای ریزماهواره

کلید واژه:گوسفند دو­رگه، تعیین هویت، آزمون انساب، نشانگر ژنتیکی، نشانگر ریزماهواره

چکیده: موفقیت در اصلاح دام منوط به ثبت دقیق شجره و رکوردهای فنوتیپی است، در غیر این صورت استفاده از بهترین روش­ها برای ارزیابی ژنتیکی و برآورد پارامترها، موفقیتی در پی ندارد. در این تحقیق به منظور بررسی و تایید روابط شجره­ای تعداد 32 راس دام توسط 5 جایگاه ریزماهواره ای برگرفته از فهرست مشترک انجمن بین المللی ژنتیک (ISAG)که برای آزمون انساب در گوسفند توصیه شده است، در قالب یک واکنش زنجیره­ای پلیمراز چندگانه تعیین ژنوتیپ گردیدند.نژادهای مورد بررسی شامل قزل.بلوچی.مرینوس و بلوچی.مغانی.مرینوس می­باشد که شامل4 پدر به همراه 28 فرزند جهت آزمون تعیین انساب می­باشد. نتایج حاصل از شاخص­های تنوع درون جمعیت و شاخص­های چند شکلی در جایگاههای مورد مطالعه از جمله تعداد آلل­های واقعی و موثر، محتوای اطلاعات چندشکلی و هتروزیگوسیتی حاکی از سطح بالایی از تنوع و چندشکلی در جمعیت و جایگاههای مورد بررسی بود. همچنین مقادیر قدرت تشخیص ترکیبی به دست آمده از مجموع این نشانگرها در آنالیز انساب 9999/0 برآورد گردید که بر کارایی این مجموعه در آنالیز انساب و تشخیص هویت در این جمعیت اشاره داشت. نتایج این پزوهش در32 دام مورد بررسی که دارای روابط والدینی مشخص بودند، ثبت نادرست شجره را در 11 راس نشان داد.

 

فهرست

مقدمه.. 1

فصلاول: بررسی منابع                                                                                                                   6

1-1. اهميتثبتدقيقشجره.. 7

1-2.روشهایشناساییدام.. 8

1-2-1. روشهایموقت.. 8

1-2-1-1. پلاکگوش.. 8

1-2-1-2. پلاکگردن.. 9

1-2-1-3. ساقبند.. 9

1-2-1-4. پلاکسینه.. 9

1-2-2. روشهایدائم.. 9

1-2-2-1.خالکوبی.. 9

1-2-2-2. بریدنلبههایگوش.. 10

1-2-2-3.داغزدن.. 10

1-2-2-4. ابزارتعیینهویتالکترونیک (EID).. 11

1-2-2-5. لکه(اسکچ) برداری.. 11

1-3. عواملموثردرثبتنادرستشجره.. 11

1-4. تاريخچهآزمونانساب.. 13

1-4-1. روشهايآناليزوالديني ( آزمونانساب).. 14

1-4-1-1. مستثنيسازي.. 14

1-4-1-2.اختصاصدادنقیاسیوالدین.. 15

1-4-1-3. اختصاصدادنجزئیوالدین.. 17

1-4-1-4. آنالیزوالدینیبااحتمالکامل.. 17

1-4-1-5. بازسازیرابطهوالدینی.. 19

1-4-1-6. بازسازیرابطهخواهرانوبرادرانتنیوناتنی.. 21

1-4-2. موانعتکنیکیوبیولوژیکیآنالیزانساب.. 22

1-4-2-1. آلل‌هایصفر.. 22

1-4-2-2. جهش‌هایوخطاهایتعیینژنوتیپ.. 23

1-4-2-3. ساختارخانوادهدرجمعیت.. 24

1-4-2-4. تعییناطمینانآماریدرانتساب‌هایوالدینی.. 24

1-5. نشانگرهايژنتيكي.. 27

1-5-1.نشانگرهايDNA ‌ 27

1-5-2. رديفهايتكرارشوندهساده.. 28

1-5-3. ريزماهوارهها.. 28

1-5-3-1.تشخيصآللهايريزماهوارهاي.. 29

1-5-3-2. چندشكليريزماهوارهها.. 31

1-5-3-3. مزاياينشانگرريزماهواره.. 32

1-5-3-4. مشكلاتكارباريزماهوارهها.. 33

1-5-3-4-1. انتخابمدلجهشمناسب.. 33

1-5-3-4-2. اشتباهاتآللخواني.. 33

1-5-3-4-3. آللهايصفر.. 34

1-5-3-4-4. اندازهنمونهموردنياز.. 35

1-5-3-5. كاربردهايريزماهوارهها.. 37

1-5-3-5-1. نقشهيابيژنومي.. 37

1-5-3-5-2. تعيينهويت،آزمونانسابوآناليزخويشاوندي.. 37

1-6. مروریبرپژوهشهایصورتگرفتهدرآزمونوالدینی.. 38

1-6-1. پژوهشهایانجامشدهدرگوسفند.. 38

1-6-2. پژوهشهایانجامشدهدرگاو.. 39

1-6-3. پژوهشهایانجامشدهدراسب.. 40

فصلدوم:مواد و روش ها            42

2-1.موقعیتایستگاهتحقیقاتیخلعتپوشانوتعدادنژاد.. 43

2-2. جمعیتموردمطالعه.. 43

2-3. نحوهخونگیری.. 43

2-4.نحوهاستخراجDNA.. 44

2-5.نحوهتستکمیتوکیفیتDNA.. 44

2-6. جایگاههایریزماهوارهایاستفادهشده.. 45

2-7. DNA Pooling. 46

2-8. PCR. 49

2-8-1. چرخههایحرارتیPCR. 50

2-9.نحوهیتهیهژلمتافرآگارز.. 51

2-10. نحوهالکتروفوز.. 52

2-11. تجزیهوتحلیلدادهها.. 54

2-11-1. محاسباتمربوطبهتنوعژنتیکی.. 54

2-11-1-1. تعدادآللهایواقعیوتعدادآللهایموثر.. 54

2-11-1-2. میزانچندشکلی.. 54

2-11-1-3. هتروزیگوسیتییاتنوعژنی:.. 55

2-11-1-4. تعادلهاردی–واینبرگ (HWE).. 55

2-11-1-5.قدرتتشخیص(PE).. 56

2-12.آزمونوالدینی(انساب).. 58

2-12-1. نرمافزارCERVUS. 58

فصلسوم: نتایج و بحث                                                                                                         61

3-1. کمیتوکیفیتDNA.. 62

3-2. عکسژلازژنوتایپجایگاههابهصورتانفرادی.. 63

3-3. پارامترهایجمعیتیحاصلازنشانگرهایمختلف.. 64

3-3-1. چندشکلیمشاهدهشدهدرجایگاههایمختلف.. 64

3-3-1-1.جایگاهILSTS004. 65

3-3-1-2.جایگاهCSSM004. 65

3-3-1-3.جایگاهCSSM032. 66

3-3-1-4.جایگاهOARFCB5. 67

3-3-1-5.جایگاهBMC1009. 68

3-3-2. میانگینآللیجایگاهها.. 68

3-3-3.تعادلهاردی–واینبرگ.. 69

3-3-4. محتویاطلاعاتچندشکلی.. 70

3-3-5. هتروزیگوسیتی.. 71

3-3-6. قدرتتشخیص (PE).. 72

3-4. آنالیزوالدینی.. 73

3-5. نتیجهگیریکلی.. 75

3-6. پیشنهادات.. 75

منابع:    77

ضمائم :                                                                                                                        82

پیوستالف: نژادهایمورداستفادهدرتحقیق.. 83

پیوستب.. 83

فهرست جداول

جدول2-1. مشخصاتجایگاههاوپرایمرهایاستفادهشدهدرتکثیراینجایگاهها 46

جدول2-2. میزانآگارزموردنیازبرایباندهایمتفاوت.. 51

جدول2-3. اجزایتشکیلدهندهآگارز. 52

جدول3-1. آزمونتعادلهاردی- واینبرگبانرمافزارCERVUS. 69

جدول3-2. آزمونتعادلهاردی- واینبرگبانرمافزار GENALEX. 70

جدول3-3. مقادیرمیانگیناحتمالمشمولیتحاصلاز 5 جایگاهدرآنالیزهایمتفاوت.. 73

جدول3-4. دادههایحاصلازآزمونوالدینی.. 74

فهرست شکل ها

شکل1-1.پلاکگوشمنبع(حسنیبافرانیوهمکاران، 1386). 8

شکل1-2.داغسرد( حسنیوبافرانی، 1386). 10

شکل1-3.نمونههایازگمشدنشمارهدام)حسنیوبافرانیوهمکاران، 1386). 12

شکل2-1.کاغذوبافرمربوطبهاستخراجDNA( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 44

شکل2-2.عکسژلمربوطبهDNA  Pooling( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 47

شکل2-3.جایگاههایمونومورف( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 48

شکل2-4.نتایجمولتیپلکسPCR( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 48

شکل2-5.ماشینPCR( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 50

شکل2-6.الکتروفورزمویین( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 53

شکل2-7.عکسبدستآمدهازمحصولالکتروفورز( برگرفتهازآزمایشگاهدراسترالیا). 53

شکل2-8.محیطنرمافزارCERVUS(یافتهایتحقیق). 59

شکل3-1.الکتروفورزDNAیاستخراجشده. 62

شکل3-2.نتایجبدستآمدهازژنوتایپینگ…. 63

شکل3-3.آللهایبهارثرسیدهدرافراد. 63

شکل3-4.آللهایبهارثرسیدهدرافراد. 64

شکل3-5.آللوفراوانیآللیدرجایگاهILSTS004. 65

شکل3-6.آللوفراوانیآللیدرجایگاهCSSM004. 66

شکل3-7.آللوفراوانیآللیدرجایگاهCSSM032. 67

شکل3-8.آللوفراوانیآللیدرجایگاهOARFCB5. 67

شکل3-9.آللوفراوانیآللیدرجایگاهBMC1009. 68

شکل3-10.مقادیرهتروزیگوسیتیمشاهدهشدهوموردانتظاروچندشکلیدر 5 جایگاهریزماهوارهای.. 72

قبلا حساب کاربری ایجاد کرده اید؟
گذرواژه خود را فراموش کرده اید؟
Loading...
enemad-logo