بررسی ارتباط چند شکلی ژنتیکی ژن هایCAT C-262T وNQO1 C609T با خطر رد حاد پیوند کلیه

فهرست مطالب

عنوان                                         صفحه

فصل اول: مقدمه

1.1- پیوند کلیه ……………………….. 2

2.1- رد پیوند کلیه …………………….. 4

3.1- رد حاد پیوند ……………………… 4

4.1- DGF ……………………………… 6

5.1- آنتی بادی های ضد HLA ………………. 6

6.1- آنتی بادی علیه آنتی ژن های گروه خونی … 7

7.1- افزایش سن اهدا کننده و دریافت کننده پیوند     7

8.1- اهدا کننده بافت …………………… 8

9.1- استرس اکسیداتیو و آنتی اکسیدانت­ها …… 8

10.1- کاتالاز ………………………….. 9

11.1- NAD(P)H کوئینون اکسیدوردوکتاز1 …….. 11

12.1- هدف…………………………….. 12

13.1- فرضیه ………………………….. 12

عنوان                                         صفحه

فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین

1.2- مطالعات انجام شده بر روی ژن کاتالاز …. 14

2.2- مطالعات انجام شده بر روی ژن NQO1 …… 16

3.2- مطالعات پیشین انجام شده در خصوص پیوند کلیه    18

فصل سوم: مواد و روش ها

1.3- نمونه­گیری ……………………….. 20

2.3- وسایل مورد نیاز ………………….. 21

3.3- محلول­های استفاده شده جهت استخراج DNA از نمونه خون کامل …………………………………….. 21

4.3- محلول­های استفاده شده جهت استخراج DNA از نمونه بافی­کت 21

5.3- مواد لازم جهت انجام PCR …………….. 22

6.3- مواد لازم جهت انجام الکتروفورز ……… 22

7.3- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود­کننده    22

8.3- استخراج DNA از خون محیطی ………….. 22

9.3- استخراج DNA از بافی­کت با کیت DNP …… 23

10.3- PCR …………………………….. 24

11.3- الکتروفورز ……………………… 27

12.3- رنگ­آمیزی ژل …………………….. 28

13.3- تحلیل آماری …………………….. 29

عنوان                                         صفحه

فصل چهارم: نتایج

1.4- مشخصات افراد شرکت کننده در این مطالعه . 31

2.4- نتایج حاصل از بررسی ریسک فاکتور­های دخیل در رد پیوند کلیه

 و مشخصات بیماران …………………….. 31

3.4- نتایج حاصل از بررسی چند­شکلی ژن CAT در افراد سالم

و بیماران پیوند کلیه ………………….. 33

4.4- نتایج حاصل از بررسی چند­شکلی ژن NQO1 در افراد سالم

 و بیماران پیوند کلیه …………………. 34

5.4- مقایسه فراوانی ژنوتیپی و آللی بین دو گروه سالم و بیمار …………………………………….. 35

6.4- مقایسه فراوانی ژنوتیپی و آللی بین بیماران با رد حاد پیوند

و بیماران فاقد رد حاد پیوند ……………. 36

7.4- بررسی ارتباط ژنوتیپ­های ژن CAT و NQO1 با ریسک

فاکتور­های رد حاد پیوند کلیه ……………. 38

فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

بحث و نتیجه­گیری ………………………. 40

پیشنهادات ……………………………. 45

فهرست منابع و مأخذ ……………………… 46

فهرست جداول

عنوان                                         صفحه

جدول 1.3- ……………………………… 20

جدول 2.3- مواد مورد نیاز جهت تهیه مخلوط واکنش PCR    24

جدول 3.3- برنامه تنظیم شده برای واکنش PCR جهت تکثیر ژن NQO1 25

جدول 4.3- قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ­های

چند­شکلی ژنتیکی NQO1 …………………….. 26

جدول 5.3-  برنامه تنظیم شده برای واکنش PCR جهت تکثیر ژن CAT   26

جدول 6.3-  قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های

چندشکلی ژنتیکی CAT ……………………… 27

جدول 1.4-  بررسی ریسک فاکتورهای دخیل در رد پیوند کلیه

و مشخصات بیماران ……………………….. 32

جدول 2.4-  بررسی ریسک فاکتورهای کمی دخیل در رد پیوند کلیه

و مشخصات بیماران ……………………….. 33

جدول 3.4- مقایسه ژنوتیپ های ژن CAT در گروه سالم و بیمار پیوند کلیه ………………………………….. 33

جدول 4.4- مقایسه ژنوتیپ های ژن NQO1 در گروه سالم و بیمار پیوند کلیه ………………………………….. 34

جدول 5.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنCAT  در بین گروه سالم

و بیماران پیوند کلیه ……………………. 35

جدول 6.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژنNQO1  در بین گروه سالم

و بیماران پیوند کلیه ……………………. 35

عنوان                                         صفحه

جدول 7.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی در ژن CAT

 در بین بیماران پیوند کلیه ………………. 37

جدول 8.4- آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی در ژن NQO1

در بین بیماران پیوند کلیه ……………….. 37

جدول 9.4- اثر ریسک فاکتور منبع بافتی باژنوتیپ های ژنCAT 38

جدول 10.4- اثر ریسک فاکتور منبع بافتی باژنوتیپ های ژن NQO1   38

فهرست شکل­ها

عنوان                                         صفحه

شکل 1.1- ساختار ژن CAT و چند­شکلی ژنتیکی CAT C-262T     10

شکل 2.1- ساختار ژن NQO1 و چند­شکلی ژنتیکی NQO1 C609T   11

شکل 1.3- نتایج حاصل از PCR-RFLP چند­شکلی ژنتیکی CAT C-262T

قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز …………….. 28

شکل 2.3- نتایج حاصل از PCR-RFLP چند­شکلی ژنتیکی NQO1 C609T

قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز …………….. 29